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慢性肾病相关自身免疫靶蛋白的筛选

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
1 绪论第10-23页
    1.1 细胞骨架蛋白第10-16页
        1.1.1 细胞骨架蛋白的概述第10页
        1.1.2 细胞骨架蛋白与相关病理第10-12页
        1.1.3 与肾脏自身免疫疾病相关的蛋白的总结第12-16页
    1.2 原肌球蛋白第16-21页
        1.2.1 原肌球蛋白概述第16-21页
    1.3 二维凝胶电泳技术概述第21页
    1.4 PDQuest图像分析技术第21页
    1.5 研究目的及意义第21-23页
2 建立双肾缺血再灌注致大鼠慢性肾病模型第23-28页
    2.1 试剂与仪器第23-24页
    2.2 实验方法第24-25页
        2.2.1 动物分组及缺血再灌注(ischemia-reprfusion)方法第24页
        2.2.2 蛋白尿指标检测第24页
        2.2.3 肾脏组织学病理检查第24页
        2.2.4 肾脏IgG抗体沉积检测第24页
        2.2.5 统计学分析第24-25页
    2.3 结果与分析第25-28页
        2.3.1 肾功能检测结果第25页
        2.3.2 肾脏组织病理检查结果第25-26页
        2.3.3 肾脏IgG抗体沉积检测结果第26-28页
3 大鼠肾脏总蛋白与慢性肾病大鼠血清存在抗原抗体反应第28-35页
    3.1 实验原理第28页
    3.2 材料与方法第28-31页
        3.2.1 提取正常大鼠肾脏总蛋白第29-30页
        3.2.2 肾脏总蛋白包埋大鼠血清反应的Elisa实验第30页
        3.2.3 肾脏总蛋白跑胶后与大鼠血清反应的westernblot实验第30-31页
        3.2.4 统计学分析第31页
    3.3 结果与分析第31-35页
        3.3.1 肾脏总蛋白包埋后与大鼠血清反应的Elisa实验结果第31-32页
        3.3.2 肾脏总蛋白一维凝胶跑胶后与大鼠血清做westernblot的实验结果第32-35页
4 疾病肾脏中抗原抗体复合物的共沉淀反应及目标条带的确定第35-41页
    4.1 免疫共沉淀Co-Immunoprecipitation实验第35-41页
        4.1.1 实验原理第35页
        4.1.2 材料与方法第35-37页
        4.1.3 Input实验验证样品中是否含有IgG第37页
        4.1.4 COIP实验第37-38页
        4.1.5 结果与分析第38-41页
5 质谱筛选靶蛋白第41-44页
    5.1 实验原理第41页
    5.2 实验器材及试剂第41-42页
    5.3 实验步骤第42页
    5.4 结果与分析第42-44页
6 基于一维及二维凝胶电泳以已知抗体鉴定靶蛋白TMP3第44-54页
    6.1 一维凝胶电泳验证TMP3第44-46页
        6.1.1 实验原理第44页
        6.1.2 实验仪器与试剂第44页
        6.1.3 实验步骤第44-45页
        6.1.4 结果与分析第45-46页
    6.2 基于二维凝胶电泳以已知抗体鉴定靶蛋白TMP3第46-48页
        6.2.1 实验原理第46页
        6.2.2 实验器材及试剂第46-47页
        6.2.3 实验步骤第47-48页
    6.3 用大鼠肾脏总蛋白跑二维凝胶后的westenblot实验第48-54页
        6.3.1 实验分组第48页
        6.3.2 以大鼠血清或已知抗体为一抗分别与大鼠肾脏总蛋白做二维凝胶的westenblot实验第48页
        6.3.3 PDQuest软件直接分析2-DE图片上疾病组与对照组蛋白点表达差异第48-49页
        6.3.4 结果与分析第49-54页
7 Elisa实验验证慢性肾病大鼠血清中抗TMP3抗体水平第54-58页
    7.1 实验原理第54页
    7.2 实验器材及试剂第54页
    7.3 实验步骤第54-55页
        7.3.1 TMP3抗体包埋用肾脏总蛋白孵育后血清反应第54-55页
        7.3.2 Vimentin抗体包埋用肾脏总蛋白孵育后血清反应第55页
        7.3.3 统计学分析第55页
    7.4 结果与分析第55-58页
8 结论第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66-67页
附录第67-68页
攻读学位期间的研究成果第68页

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