| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1. 绪论 | 第15-37页 |
| 1.1 前言 | 第15-16页 |
| 1.2 农药的内分泌干扰作用 | 第16-18页 |
| 1.2.1 农药污染状况 | 第16-17页 |
| 1.2.2 农药的内分泌干扰作用 | 第17-18页 |
| 1.3 金属的内分泌干扰作用 | 第18-21页 |
| 1.3.1 微量金属元素 | 第18-19页 |
| 1.3.2 非必需金属元素 | 第19-20页 |
| 1.3.3 金属的内分泌干扰作用 | 第20-21页 |
| 1.4 皮质激素及其生理作用 | 第21-28页 |
| 1.4.1 糖皮质激素 | 第21-22页 |
| 1.4.2 糖皮质激素受体 | 第22-25页 |
| 1.4.3 盐皮质激素 | 第25-26页 |
| 1.4.4 盐皮质激素受体 | 第26-28页 |
| 1.5 GR和MR介导的内分泌干扰作用 | 第28-30页 |
| 1.6 EDCs与激素受体相互作用的研究方法 | 第30-36页 |
| 1.6.1 竞争性结合实验 | 第31页 |
| 1.6.2 哺乳动物细胞报告基因实验 | 第31-33页 |
| 1.6.3 酵母重组报告基因体系 | 第33页 |
| 1.6.4 激素响应基因表达的干扰 | 第33-34页 |
| 1.6.5 甾体激素调控的细胞分化与增殖 | 第34-35页 |
| 1.6.6 分子对接与计算模拟 | 第35-36页 |
| 1.7 本论文研究目的和意义 | 第36-37页 |
| 1.7.1 研究目的和意义 | 第36页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第36-37页 |
| 2. 糖皮质激素受体介导的农药的内分泌干扰效应 | 第37-68页 |
| 2.1 前言 | 第37-38页 |
| 2.2 材料与方法 | 第38-47页 |
| 2.2.1 农药以及其他化学试剂 | 第38页 |
| 2.2.2 主要实验仪器设备 | 第38-40页 |
| 2.2.3 质粒以及质粒制备 | 第40-41页 |
| 2.2.4 细胞系以及细胞培养 | 第41-42页 |
| 2.2.5 细胞毒性实验 | 第42-43页 |
| 2.2.6 双荧光素酶报告基因检测体系 | 第43-45页 |
| 2.2.7 荧光实时定量PCR | 第45-46页 |
| 2.2.8 分子对接和分子动力学模拟 | 第46-47页 |
| 2.2.9 数据处理 | 第47页 |
| 2.3 实验结果 | 第47-64页 |
| 2.3.1 农药及农药代谢产物的细胞毒性 | 第47页 |
| 2.3.2 糖皮质激素标准曲线 | 第47-49页 |
| 2.3.3 农药及代谢产物对GR激动作用 | 第49-51页 |
| 2.3.4 农药及代谢产物对GR拮抗作用 | 第51-57页 |
| 2.3.5 农药及农药代谢产物对糖皮质激素响应基因表达的干扰作用 | 第57-61页 |
| 2.3.6 分子对接 | 第61-64页 |
| 2.4 讨论 | 第64-67页 |
| 2.5 小结与创新 | 第67-68页 |
| 3. 盐皮质激素受体介导的农药的内分泌干扰效应 | 第68-102页 |
| 3.1 前言 | 第68-69页 |
| 3.2 材料与方法 | 第69-78页 |
| 3.2.1 农药以及其他化学试剂 | 第69-71页 |
| 3.2.2 主要实验仪器设备 | 第71-72页 |
| 3.2.3 质粒以及质粒制备 | 第72页 |
| 3.2.4 细胞系以及细胞培养 | 第72-73页 |
| 3.2.5 细胞毒性实验 | 第73页 |
| 3.2.6 双荧光素酶报告基因检测体系 | 第73-74页 |
| 3.2.7 联合作用机制 | 第74-75页 |
| 3.2.8 荧光实时定量PCR | 第75-76页 |
| 3.2.9 免疫荧光与共聚焦显微镜观察MR核转移 | 第76页 |
| 3.2.10 核蛋白提取及蛋白电泳 | 第76-78页 |
| 3.2.11 数据处理与分析 | 第78页 |
| 3.3 实验结果 | 第78-99页 |
| 3.3.1 农药及农药代谢产物的细胞毒性 | 第78-79页 |
| 3.3.2 盐皮质激素标准曲线与阳性拮抗剂螺内酯标准曲线 | 第79页 |
| 3.3.3 农药及代谢产物对MR激动作用 | 第79-83页 |
| 3.3.4 农药及代谢产物对MR拮抗作用 | 第83-84页 |
| 3.3.5 农药及代谢产物混合物的联合暴露 | 第84-88页 |
| 3.3.6 农药及农药代谢产物对盐皮质激素响应基因表达的干扰作用 | 第88-93页 |
| 3.3.7 农药及代谢产物对醛固酮在肝癌细胞SMMC-7721中抑癌作用的干扰 | 第93-96页 |
| 3.3.8 农药及农药代谢产物对MR核转移的干扰 | 第96-99页 |
| 3.4 讨论 | 第99-101页 |
| 3.5 小结与创新 | 第101-102页 |
| 4. 皮质激素受体介导的金属的内分泌干扰效应 | 第102-120页 |
| 4.1 前言 | 第102-103页 |
| 4.2 材料与方法 | 第103-106页 |
| 4.2.1 金属以及其他化学试剂 | 第103-104页 |
| 4.2.2 主要实验仪器设备 | 第104页 |
| 4.2.3 质粒以及质粒制备 | 第104-105页 |
| 4.2.4 细胞系以及细胞培养 | 第105页 |
| 4.2.5 细胞毒性实验 | 第105页 |
| 4.2.6 双荧光素酶报告基因检测体系 | 第105-106页 |
| 4.2.7 暴露溶液中BF浓度测定 | 第106页 |
| 4.2.8 数据处理 | 第106页 |
| 4.3 实验结果 | 第106-117页 |
| 4.3.1 金属盐对GR激动作用及拮抗作用 | 第106-113页 |
| 4.3.2 金属盐对MR激动作用及拮抗作用 | 第113-117页 |
| 4.4 讨论 | 第117-119页 |
| 4.5 小结与创新 | 第119-120页 |
| 5. 研究结论与未来工作展望 | 第120-123页 |
| 5.1 研究结论 | 第120-121页 |
| 5.2 未来工作展望 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-138页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第138-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
