| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 论文创新点 | 第9-10页 |
| 符号说明 | 第10-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| 1.1 引言 | 第14-17页 |
| 1.1.1 念珠菌感染及其防治 | 第14-15页 |
| 1.1.2 蓝藻水华及其治理 | 第15-17页 |
| 1.2 糖代谢及光合作用过程中FBA的调控 | 第17-20页 |
| 1.2.1 糖代谢过程中FBA的调控 | 第17-18页 |
| 1.2.2 光合作用过程中FBA的调控 | 第18-20页 |
| 1.3 FBA的分布与分类 | 第20-21页 |
| 1.4 FBA-Ⅱ作为药物靶标的可能 | 第21-22页 |
| 1.5 本文立意 | 第22-24页 |
| 第二章 Ca-FBA-Ⅱ的表达纯化 | 第24-33页 |
| 2.1 蛋白表达系统的构建 | 第24页 |
| 2.2 蛋白纯化方法的选择 | 第24页 |
| 2.3 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.3.1 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.3.2 实验药品 | 第25-26页 |
| 2.3.3 实验溶液的配置 | 第26-27页 |
| 2.4 实验部分 | 第27-31页 |
| 2.4.1 Ca-FBA-Ⅱ蛋白的表达 | 第27-28页 |
| 2.4.2 Ca-FBA-Ⅱ蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| 2.4.3 纯化所得Ca-FBA-Ⅱ的脱盐 | 第29-30页 |
| 2.4.4 SDS-PAGE凝胶电泳实验 | 第30-31页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第31-32页 |
| 2.5.1 SDS-PAGE凝胶电泳结果分析 | 第31-32页 |
| 2.5.2 重组Ca-FBA-Ⅱ融合蛋白含量计算 | 第32页 |
| 2.6 本章小结 | 第32-33页 |
| 第三章 Ca-FBA-Ⅱ酶学性质的研究 | 第33-42页 |
| 3.1 引言 | 第33-34页 |
| 3.2 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第34页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第34页 |
| 3.2.3 实验溶液的配置 | 第34-35页 |
| 3.3 Ca-FBA-Ⅱ酶学性质的研究 | 第35-37页 |
| 3.3.1 温度对Ca-FBA-Ⅱ的活性影响 | 第36页 |
| 3.3.2 钾离子对Ca-FBA-Ⅱ的活性影响 | 第36页 |
| 3.3.3 二价金属离子对Ca-FBA-Ⅱ的活性影响 | 第36页 |
| 3.3.4 酶含量对Ca-FBA-Ⅱ的活性影响 | 第36-37页 |
| 3.3.5 关于Ca-FBA-Ⅱ的底物米氏常数Km的测定 | 第37页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第37-41页 |
| 3.4.1 Ca-FBA-Ⅱ比活力的分析 | 第37-38页 |
| 3.4.2 温度对Ca-FBA-Ⅱ活性的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.3 钾离子对Ca-FBA-Ⅱ活性的影响 | 第39页 |
| 3.4.4 二价金属离子对Ca-FBA-Ⅱ活性的影响 | 第39页 |
| 3.4.5 GPDH及TIM的浓度对Ca-FBA-Ⅱ活性的影响 | 第39-41页 |
| 3.4.6 Ca-FBA-Ⅱ的底物米氏常数Km的测定 | 第41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 Ca-FBA-Ⅱ抑制剂的筛选 | 第42-64页 |
| 4.1 引言 | 第42-43页 |
| 4.1.1 抑制剂的作用类型 | 第42-43页 |
| 4.2 实验材料 | 第43-44页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第43页 |
| 4.2.2 实验材料 | 第43页 |
| 4.2.3 实验溶液的配置 | 第43-44页 |
| 4.3 实验部分 | 第44-46页 |
| 4.3.1 化合物的初筛 | 第44页 |
| 4.3.2 抑制活性较高化合物对Ca-FBA-Ⅱ的IC_(50)的测定 | 第44-45页 |
| 4.3.3 抑制活性较高化合物对Ca-FBA-Ⅱ的K_i的测定 | 第45页 |
| 4.3.4 部分抑制活性较高Ⅰ系列化合物Ra-FBA-I初筛 | 第45-46页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第46-63页 |
| 4.4.1 苯肼叉间二酮类化合物对Ca-FBA-Ⅱ酶体活性的研究 | 第46-53页 |
| 4.4.2 苯肼叉间二酮类化合物对白色念珠菌活性抑制的结果与讨论 | 第53-56页 |
| 4.4.3 酰腙类化合物50 μM的初筛结果 | 第56页 |
| 4.4.4 酰腙类初筛抑制率较高化合物IC_(50)测定 | 第56-59页 |
| 4.4.5 苯腙类化合物50 μM的初筛结果 | 第59页 |
| 4.4.6 苯腙类初筛抑制率较高化合物IC_(50)测定 | 第59-63页 |
| 4.5 本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 CY-FBA-Ⅱ酶体水平的筛选 | 第64-76页 |
| 5.1 引言 | 第64-65页 |
| 5.2 实验材料 | 第65-66页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第65页 |
| 5.2.2 实验材料 | 第65页 |
| 5.2.3 实验溶液的配置 | 第65-66页 |
| 5.3 实验部分 | 第66-67页 |
| 5.3.1 化合物的初筛方法 | 第66页 |
| 5.3.2 高活性化合物对Cy-FBA-Ⅱ的IC_(50)的测定 | 第66-67页 |
| 5.3.3 高活性化合物对Ra-FBA-Ⅰ的IC_(50)的测定 | 第67页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第67-74页 |
| 5.4.1 苯甲酰亚胺类衍生物50μM的初筛结果 | 第67-68页 |
| 5.4.2 苯甲酰亚胺类衍生物初筛抑制率较高化合物IC_(50)测定 | 第68-71页 |
| 5.4.3 苯甲酰亚胺类衍生物对Cy-FBA-Ⅱ和Ra-FBA-Ⅰ的选择性 | 第71-72页 |
| 5.4.4 苯甲酰亚胺类衍生物对蓝藻活性抑制的结果与讨论 | 第72-74页 |
| 5.5 本章小结 | 第74-76页 |
| 第六章 全文总结与展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 攻读学位期间发表的论文、科研成果等 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
