摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 绪论 | 第8-18页 |
1.1 课题来源及研究的目的和意义 | 第8-9页 |
1.2 鼠源转录因子Oct4 和Sox2 | 第9-11页 |
1.3 重组蛋白质 | 第11-13页 |
1.3.1 重组蛋白质的表达系统 | 第11-12页 |
1.3.2 包涵体 | 第12页 |
1.3.3 融合标签 | 第12-13页 |
1.3.4 重组蛋白质的纯化方法 | 第13页 |
1.4 细胞穿透肽 | 第13-14页 |
1.5 可降解的阳离子聚合物 | 第14-16页 |
1.6 本课题的主要研究内容 | 第16-17页 |
1.7 本章小结 | 第17-18页 |
第2章 实验材料与方法 | 第18-27页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.2 实验试剂 | 第18-20页 |
2.3 实验仪器 | 第20页 |
2.4 实验方法 | 第20-26页 |
2.4.1 制备感受态大肠杆菌(Inoue法) | 第20页 |
2.4.2 低温诱导重组蛋白质表达 | 第20-21页 |
2.4.3 重组蛋白质粗提取 | 第21页 |
2.4.4 重组蛋白质纯化 | 第21-23页 |
2.4.5 重组蛋白质细胞内移动的观察 | 第23页 |
2.4.6 Western Blot分析 | 第23-24页 |
2.4.7 细胞增殖实验 | 第24页 |
2.4.8 重组蛋白质诱导MSCs成骨实验 | 第24-25页 |
2.4.9 荧光素酶活性分析实验 | 第25-26页 |
2.5 实验所用软件和网站 | 第26-27页 |
第3章 重组蛋白质mOct4 和mSox2 的表达和纯化 | 第27-37页 |
3.1 引言 | 第27页 |
3.2 人工优化改良mOct4 和mSox2 密码子 | 第27-32页 |
3.3 重组蛋白质在大肠杆菌中的表达 | 第32-33页 |
3.4 重组蛋白质的纯化 | 第33-34页 |
3.5 本章讨论 | 第34-36页 |
3.6 本章小结 | 第36-37页 |
第4章 重组蛋白质mOct4 和mSox2 的功能检测 | 第37-45页 |
4.1 引言 | 第37页 |
4.2 重组蛋白质进入细胞及其稳定性 | 第37-38页 |
4.3 重组蛋白质对靶基因转录的影响 | 第38-39页 |
4.4 重组蛋白质对MSCs增殖能力的影响 | 第39-40页 |
4.5 重组蛋白质对MSCs分化能力的影响 | 第40-42页 |
4.6 本章讨论 | 第42-44页 |
4.7 本章小结 | 第44-45页 |
结论 | 第45页 |
展望 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第53-55页 |
致谢 | 第55页 |