| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第15-27页 |
| 1.1 六价铬 | 第15-18页 |
| 1.1.1 六价铬的概述 | 第15-16页 |
| 1.1.2 六价铬的致癌机制 | 第16-18页 |
| 1.2 肺癌 | 第18-19页 |
| 1.2.1 肺癌的流行趋势 | 第18页 |
| 1.2.2 肺癌的研究现状 | 第18-19页 |
| 1.3 肿瘤迁移、侵袭 | 第19-22页 |
| 1.4 LKB1 | 第22-24页 |
| 1.4.1 LKB1的概述 | 第22页 |
| 1.4.2 LKB1与肿瘤的关系 | 第22-24页 |
| 1.5 Beas-2B细胞 | 第24页 |
| 1.6 研究内容 | 第24-27页 |
| 1.6.1 研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 1.6.2 实验设计思路 | 第25-27页 |
| 第二章 构建六价铬［Cr(Ⅵ)］诱导人支气管上皮细胞Beas-2B恶性转化模型 | 第27-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-31页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第27页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第28-30页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-38页 |
| 2.2.1 Beas-2B细胞培养 | 第31-32页 |
| 2.2.2 MTT法 | 第32-33页 |
| 2.2.3 平板克隆实验 | 第33页 |
| 2.2.4 软琼脂克隆形成实验 | 第33-34页 |
| 2.2.5 裸鼠成瘤实验 | 第34-35页 |
| 2.2.6 蛋白质组学实验 | 第35-36页 |
| 2.2.7 蛋白免疫印迹法 | 第36-38页 |
| 2.3 数据分析 | 第38-39页 |
| 2.4 实验结果 | 第39-51页 |
| 2.4.1 Cr(Ⅵ)对人支气管上皮细胞Beas-2B增殖活性的影响 | 第39-41页 |
| 2.4.2 软琼脂克隆形成实验检测Cr(Ⅵ)长期诱导Beas-2B细胞恶性转化情况 | 第41-42页 |
| 2.4.3 异体移植小鼠模型中Cr(Ⅵ)转化细胞可以诱导肿瘤发生 | 第42-44页 |
| 2.4.4 多种重要蛋白在Cr(Ⅵ)转化细胞Beas-2B-Cr中差异表达 | 第44-47页 |
| 2.4.5 蛋白免疫印迹法检测到多种重要蛋白在Cr(Ⅵ) 转化细胞Beas-2B-Cr中差异表达 | 第47-48页 |
| 2.4.6 Cr(Ⅵ)长期诱导对支气管上皮细胞Beas-2B细胞形态的影响 | 第48-51页 |
| 2.5 讨论 | 第51-53页 |
| 2.6 小结 | 第53-54页 |
| 第三章 六价铬诱导Beas-2B细胞的迁移、侵袭 | 第54-69页 |
| 3.1 实验材料 | 第54页 |
| 3.1.1 实验细胞 | 第54页 |
| 3.1.2 实验材料 | 第54页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第54页 |
| 3.2 实验方法 | 第54-55页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第54-55页 |
| 3.2.2 蛋白免疫印迹法 | 第55页 |
| 3.2.3 Transwell迁移侵袭实验 | 第55页 |
| 3.3 数据分析 | 第55-56页 |
| 3.4 实验结果 | 第56-66页 |
| 3.4.1 Cr(Ⅵ)短期诱导Beas-2B细胞下调LKB1表达并对下游迁移、侵袭相关蛋白产生影响 | 第56-57页 |
| 3.4.2 Cr(Ⅵ)短期诱导Beas-2B细胞可以增强细胞迁移的能力 | 第57-59页 |
| 3.4.3 Cr(Ⅵ)长期诱导Beas-2B细胞20代下调LKB1表达并对下游迁移、侵袭相关蛋白产生影响 | 第59-60页 |
| 3.4.4 Cr(Ⅵ)长期诱导Beas-2B细胞20代可以增强细胞迁移、侵袭能力 | 第60-61页 |
| 3.4.5 Cr(Ⅵ)长期诱导Beas-2B细胞40代下调LKB1表达并对下游迁移、侵袭相关蛋白产生影响 | 第61-62页 |
| 3.4.6 Cr(Ⅵ)长期诱导Beas-2B细胞40代可以增强细胞迁移、侵袭能力 | 第62-64页 |
| 3.4.7 Cr(Ⅵ)长期诱导Beas-2B细胞60代下调LKB1表达并对下游迁移、侵袭相关蛋白产生影响 | 第64-65页 |
| 3.4.8 Cr(Ⅵ)长期诱导Beas-2B细胞60代可以增强细胞迁移、侵袭能力 | 第65-66页 |
| 3.5 讨论 | 第66-68页 |
| 3.6 小结 | 第68-69页 |
| 第四章 LKB1对六价铬转化细胞Beas-2B-Cr迁移、侵袭的影响 | 第69-87页 |
| 4.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 4.1.1 实验细胞 | 第69页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第69-70页 |
| 4.1.3 主要试剂配制 | 第70页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第70页 |
| 4.2 实验方法 | 第70-73页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第70页 |
| 4.2.2 软琼脂克隆形成实验 | 第70-71页 |
| 4.2.3 感受态的制备 | 第71页 |
| 4.2.4 质粒转化 | 第71-72页 |
| 4.2.5 质粒抽提 | 第72-73页 |
| 4.2.6 瞬时转染 | 第73页 |
| 4.2.7 蛋白免疫印迹法 | 第73页 |
| 4.2.8 Transwell迁移侵袭实验 | 第73页 |
| 4.3 数据分析 | 第73-74页 |
| 4.4 实验结果 | 第74-83页 |
| 4.4.1 Cr(Ⅵ)转化细胞Beas-2B-Cr的检测采用软琼脂克隆形成实验 | 第74-75页 |
| 4.4.2 蛋白免疫印迹法检测Beas-2B-Cr细胞中LKB1及迁移、侵袭相关蛋白表达情况 | 第75-76页 |
| 4.4.3 Transwell实验验证Beas-2B-Cr细胞迁移、侵袭能力 | 第76-77页 |
| 4.4.4 过表达LKB1后细胞中的蛋白表达及迁移、侵袭相关蛋白表达情况 | 第77-78页 |
| 4.4.5 上调LKB1表达可以减弱Beas-2B-Cr细胞迁移、侵袭的能力 | 第78-80页 |
| 4.4.6 检测基因干扰LKB1表达下调在细胞中蛋白表达及迁移、侵袭相关蛋白表达 | 第80-81页 |
| 4.4.7 基因干扰LKB1表达下调可以增强Beas-2B-Cr细胞迁移、侵袭的能力 | 第81-83页 |
| 4.5 讨论 | 第83-86页 |
| 4.6 小结 | 第86-87页 |
| 第五章 总结和展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 英文缩略词索引 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 硕士期间学术研究成果 | 第101页 |
