中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
引言 | 第10-15页 |
参考文献 | 第12-15页 |
材料与方法 | 第15-25页 |
1 材料 | 第15-16页 |
1.1 胃癌细胞株 | 第15页 |
1.2 实验试剂 | 第15页 |
1.3 主要仪器设备 | 第15-16页 |
2 方法 | 第16-25页 |
2.1 细胞复苏、培养与冻存 | 第16-17页 |
2.2 流式细胞术检测胃癌细胞PD-L1表达及分析抗体最佳滴度 | 第17页 |
2.3 PD-L1-siRNA慢病毒载体构建及相关试剂 | 第17页 |
2.4 目的细胞慢病毒感染 | 第17-18页 |
2.5 流式分选及拍摄荧光照片 | 第18页 |
2.6 总RNA抽提 | 第18-19页 |
2.7 荧光定量PCR检测细胞株中PD-L1表达水平 | 第19页 |
2.8 Western blot检测细胞株中PD-L1表达水平 | 第19-22页 |
2.9 流式细胞术检测细胞株中PD-L1表达水平 | 第22页 |
2.10 细胞功能学实验 | 第22-23页 |
2.11 CIK细胞与胃癌细胞共培养 | 第23页 |
2.12 移植瘤模型构建及免疫组化检测EMT相关蛋白 | 第23-24页 |
2.13 统计学方法 | 第24-25页 |
结果 | 第25-33页 |
1.PD-L1抗体滴度试验确认最佳抗体用量 | 第25页 |
2.构建PD-L1稳定下调表达的胃癌细胞株SGC-7901 及AGS | 第25-26页 |
3.PD-L1下调表达对胃癌细胞增殖能力的影响 | 第26-27页 |
4.PD-L1下调表达对胃癌细胞迁移能力的影响 | 第27-28页 |
5.PD-L1下调表达对胃癌细胞侵袭能力的影响 | 第28页 |
6.PD-L1下调表达对胃癌细胞凋亡的影响 | 第28-29页 |
7.PD-L1下调表达对胃癌细胞周期的影响 | 第29-30页 |
8.胃癌细胞PD-L1下调表达对CIK细胞杀伤敏感性的影响 | 第30-31页 |
9.PD-L1下调表达对体内移植瘤生长的影响 | 第31-32页 |
10.免疫组化检测移植瘤内PD-L1及EMT相关蛋白的表达情况 | 第32-33页 |
讨论 | 第33-36页 |
结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
综述 | 第41-49页 |
参考文献 | 第46-49页 |
中英文对照缩略词汇表 | 第49-50页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第50-51页 |
本研究所获的基金资助 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |