摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 前言 | 第11-15页 |
1.1 植物寄生线虫的危害及防治方法 | 第11-12页 |
1.1.1 植物寄生线虫的危害 | 第11页 |
1.1.2 植物线虫病害防治现状及发展趋势 | 第11-12页 |
1.2 微生物杀线活性菌株的研究现状及存在问题 | 第12-13页 |
1.2.1 微生物资源的特点 | 第12页 |
1.2.2 研究现状及存在问题 | 第12-13页 |
1.3 线虫生防菌Sr18研究概况 | 第13-14页 |
1.4 本论文研究的主要内容及目的意义 | 第14-15页 |
2 Sr18菌杀线虫代谢产物发酵工艺放大 | 第15-37页 |
2.1 引言 | 第15-17页 |
2.1.1 发酵形式 | 第15页 |
2.1.2 发酵工艺的优化 | 第15-17页 |
2.1.3 实验思路、内容和意义 | 第17页 |
2.2 材料和方法 | 第17-22页 |
2.2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.2.1.1 菌种 | 第17页 |
2.2.1.2 供试线虫 | 第17页 |
2.2.1.3 培养基 | 第17-18页 |
2.2.1.4 主要试剂 | 第18页 |
2.2.1.5 主要仪器设备 | 第18页 |
2.2.2 实验方法 | 第18-22页 |
2.2.2.1 Sr18菌活化培养 | 第18页 |
2.2.2.2 孢子悬液的制备 | 第18页 |
2.2.2.3 Sr18菌摇瓶培养 | 第18-19页 |
2.2.2.4 30L发酵罐放大培养 | 第19-20页 |
2.2.2.5 生物量测定 | 第20-21页 |
2.2.2.6 pH测定 | 第21页 |
2.2.2.7 生物活性测定 | 第21页 |
2.2.2.8 菌株生长和杀线虫活性物质形成的动态曲线绘制 | 第21页 |
2.2.2.9 光镜(LM)样品的制备及光镜观察 | 第21-22页 |
2.3 结果与讨论 | 第22-36页 |
2.3.1 培养基组分对Sr18菌菌体形态及杀线虫活性的影响 | 第22-25页 |
2.3.1.1 氮源对菌体形体和杀线活性的影响 | 第22-23页 |
2.3.1.2 蛋白胨浓度对菌体形体和杀线活性的影响 | 第23-24页 |
2.3.1.3 添加麦芽精对菌体形体和杀线活性的影响 | 第24-25页 |
2.3.1.4 小结 | 第25页 |
2.3.2 Sr18菌杀线虫代谢产物30L罐发酵放大条件的优化 | 第25-29页 |
2.3.2.1 接种量对Sr18菌产杀线虫代谢物的影响 | 第25-26页 |
2.3.2.2 种子培养方式对Sr18菌产杀虫代谢物的影响 | 第26-27页 |
2.3.2.3 溶解氧对Sr18菌产杀虫代谢物的影响 | 第27-28页 |
2.3.2.4 培养时间对Sr18菌产杀虫代谢物的影响 | 第28-29页 |
2.3.2.5 小结 | 第29页 |
2.3.3 Sr18菌30L罐发酵过程中菌丝形态的动态观察和研究 | 第29-33页 |
2.3.3.1 丝状真菌生长过程的一般规律 | 第29页 |
2.3.3.2 30L罐发酵过程中菌体形态的观察及分析 | 第29-30页 |
2.3.3.3 30L罐发酵过程中菌丝形态的LM观察及分析 | 第30-31页 |
2.3.3.4 菌丝分泌晶体情况的LM观察及分析 | 第31-32页 |
2.3.3.5 小结 | 第32-33页 |
2.3.4 Sr18菌杀线虫代谢产物200L及5t罐发酵放大的研究 | 第33-36页 |
2.3.4.1 200L罐发酵放大 | 第33-34页 |
2.3.4.2 5t罐发酵放大 | 第34-35页 |
2.3.4.3 小结 | 第35-36页 |
2.4 本章小结 | 第36-37页 |
3 Sr18菌杀线虫代谢产物的中性活性组分分离 | 第37-59页 |
3.1 引言 | 第37-41页 |
3.1.1 真菌杀线虫代谢产物中活性物质的研究概况 | 第37页 |
3.1.2 未知物剖析方法 | 第37-38页 |
3.1.3 常用生物分离技术 | 第38-39页 |
3.1.4 实验思路、内容和意义 | 第39-41页 |
3.2 材料和方法 | 第41-47页 |
3.2.1 实验材料 | 第41-42页 |
3.2.1.1 主要材料 | 第41页 |
3.2.1.2 主要试剂 | 第41页 |
3.2.1.3 主要仪器设备 | 第41-42页 |
3.2.2 实验方法 | 第42-47页 |
3.2.2.1 发酵滤液超滤分级 | 第42页 |
3.2.2.2 离子交换树脂层析除酸 | 第42-43页 |
3.2.2.3 未知组分的定性检测 | 第43页 |
3.2.2.4 大孔吸附树脂层析分级 | 第43-44页 |
3.2.2.5 分子筛层析 | 第44-45页 |
3.2.2.6 组分纯度的HPLC法鉴定 | 第45页 |
3.2.2.7 微晶纤维素薄层层析 | 第45页 |
3.2.2.8 微晶纤维素柱层析 | 第45-46页 |
3.2.2.9 离子交换凝胶层析 | 第46-47页 |
3.3 结果与讨论 | 第47-58页 |
3.3.1 发酵滤液超滤分级 | 第47-48页 |
3.3.2 离子交换树脂层析除酸 | 第48页 |
3.3.3 大孔吸附树脂层析分级 | 第48-50页 |
3.3.4 分子筛层析分离 | 第50-53页 |
3.3.4.1 凝胶外水体积的测量结果 | 第50页 |
3.3.4.2 流动相的选择 | 第50-53页 |
3.3.5 组分纯度的HPLC法鉴定 | 第53-55页 |
3.3.6 微晶纤维素柱层析 | 第55-56页 |
3.3.6.1 薄层层析 | 第55页 |
3.3.6.2 柱层析 | 第55-56页 |
3.3.7 离子交换凝胶层析 | 第56-58页 |
3.4 本章小结 | 第58-59页 |
4 全文总结与展望 | 第59-61页 |
4.1 总结 | 第59-60页 |
4.2 展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录 | 第68页 |