| 摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 前言 | 第17-25页 |
| 1 角膜保存方法概述 | 第17-18页 |
| 2 中期角膜保存液及主要保存成分 | 第18-19页 |
| 3 角膜的解剖结构及生理特点 | 第19-20页 |
| 4 角膜保存对移植免疫反应的影响 | 第20页 |
| 5 角膜保存相关机制研究 | 第20-22页 |
| 5.1 生长因子与角膜保存 | 第20-21页 |
| 5.2 溶酶体与角膜损伤 | 第21页 |
| 5.3 氧自由基与角膜损伤 | 第21-22页 |
| 5.4 角膜保存过程中的细胞凋亡 | 第22页 |
| 5.5 基质金属蛋白酶与角膜损伤 | 第22页 |
| 6 肝素、透明质酸和海藻糖及其生物保护作用 | 第22-24页 |
| 6.1 肝素 | 第22页 |
| 6.2 透明质酸 | 第22-23页 |
| 6.3 海藻糖 | 第23-24页 |
| 7 本课题拟解决的问题 | 第24-25页 |
| 第二章 肝素、透明质酸和海藻糖应用于角膜中期保存液的处方研究 | 第25-33页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| 1.1 试剂 | 第25页 |
| 1.2 仪器 | 第25页 |
| 1.3 动物 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-28页 |
| 2.1 单因素试验研究 | 第26-27页 |
| 2.1.1 保存液配制及分组 | 第26页 |
| 2.1.2 角膜取材及保存 | 第26页 |
| 2.1.3 角膜茜素红—台盼蓝联合活性染色 | 第26-27页 |
| 2.2 细胞培养 | 第27页 |
| 2.3 均匀设计处方筛选 | 第27-28页 |
| 2.3.1 均匀设计 | 第27-28页 |
| 2.3.2 活性评价及筛选结果优化 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-30页 |
| 3.1 单因素处方保存角膜活性评价 | 第28-29页 |
| 3.2 均匀设计筛选试验MTT检测细胞活性 | 第29页 |
| 3.3 优化方程 | 第29-30页 |
| 3.4 变量优化 | 第30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 5 结论 | 第32-33页 |
| 第三章 含肝素和透明质酸的角膜保存液对离体角膜保护作用研究 | 第33-44页 |
| 1 材料 | 第33页 |
| 1.1 试剂 | 第33页 |
| 1.2 仪器 | 第33页 |
| 1.3 动物 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-34页 |
| 2.1 角膜保存液的分组及配制 | 第33-34页 |
| 2.2 角膜取材保存 | 第34页 |
| 2.3 保存角膜的活性检测 | 第34页 |
| 2.4 角膜内皮细胞超微结构观察 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-40页 |
| 3.1 角膜形态 | 第34-35页 |
| 3.2 兔角膜内皮细胞活性率 | 第35-37页 |
| 3.3 保存后角膜内皮细胞的超微结构 | 第37-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 第四章 含肝素和透明质酸的角膜保存液对离体角膜细胞凋亡的影响研究 | 第44-50页 |
| 1 材料 | 第44页 |
| 1.1 试剂 | 第44页 |
| 1.2 仪器 | 第44页 |
| 1.3 动物 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-45页 |
| 2.1 角膜保存液的分组及配制 | 第44页 |
| 2.2 保存角膜的凋亡检测 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 第五章 含肝素和透明质酸的角膜保存液在角膜保存过程中对NO释放的影响 | 第50-55页 |
| 1 材料 | 第50页 |
| 1.1 试剂 | 第50页 |
| 1.2 仪器 | 第50页 |
| 1.3 动物 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-51页 |
| 2.1 角膜取材分组保存 | 第50页 |
| 2.2 保存期间介质取样 | 第50-51页 |
| 2.3 各组保存介质中NO的释放及变化 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 第六章 含肝素和透明质酸的角膜保存液对角膜保存过程中溶酶体酶释放的影响 | 第55-61页 |
| 1 材料 | 第55页 |
| 1.1 试剂 | 第55页 |
| 1.2 仪器 | 第55页 |
| 1.3 动物 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-56页 |
| 2.1 角膜取材分组保存 | 第55-56页 |
| 2.2 保存期间介质取样 | 第56页 |
| 2.3 正常角膜组织匀浆 | 第56页 |
| 2.4 保存介质及新鲜角膜溶酶体酶的测定 | 第56页 |
| 2.4.1 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)的测定 | 第56页 |
| 2.4.2 酸性磷酸酶(ACP)的测定 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-58页 |
| 3.1 角膜保存期间各组保存液NAG释放量及变化 | 第56-57页 |
| 3.2 角膜保存期间各组保存液ACP释放量及变化 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-61页 |
| 第七章 含肝素和透明质酸的角膜保存液对角膜组织基质金属蛋白酶表达的影响 | 第61-68页 |
| 1 材料 | 第61-62页 |
| 1.1 试剂 | 第61页 |
| 1.2 仪器 | 第61-62页 |
| 1.3 动物 | 第62页 |
| 2 方法 | 第62-63页 |
| 2.1 角膜组织取材分组保存 | 第62页 |
| 2.2 角膜明胶酶提取 | 第62页 |
| 2.3 角膜保存过程中明胶酶的变化测定 | 第62-63页 |
| 2.3.1 明胶酶谱分析 | 第62页 |
| 2.3.1.1 角膜组织的明胶酶表达分析 | 第62页 |
| 2.3.1.2 角膜保存液的明胶酶表达分析 | 第62页 |
| 2.3.2 角膜组织明胶酶表达定量 | 第62-63页 |
| 2.3.2.1 明胶琥珀酰化 | 第63页 |
| 2.3.2.2 样本明胶酶含量测定 | 第63页 |
| 3 结果 | 第63-65页 |
| 3.1 明胶酶谱 | 第63-64页 |
| 3.2 角膜组织明胶酶表达定量分析结果 | 第64-65页 |
| 3.2.1 琥珀酰明胶含量测定 | 第64页 |
| 3.2.2 角膜组织明胶酶的表达 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第76-77页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |
