| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略词对照表 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 结直肠癌现状及诊断 | 第9-10页 |
| 1.2 STAT3、ERK与结直肠癌关系 | 第10-12页 |
| 1.2.1 STAT3与肿瘤的发生 | 第10-12页 |
| 1.2.2 ERK与肿瘤的发生 | 第12页 |
| 1.3 microRNA研究现状 | 第12-16页 |
| 1.3.1 microRNA形成 | 第12-14页 |
| 1.3.2 microRNA作用机制 | 第14-15页 |
| 1.3.3 microRNA与肿瘤的关系 | 第15页 |
| 1.3.4 microRNA与结直肠癌诊断 | 第15-16页 |
| 1.3.5 miR-375与消化道癌症 | 第16页 |
| 1.4 miR-375作用机制 | 第16-19页 |
| 1.4.1 miR-375与靶基因 | 第16-17页 |
| 1.4.2 miR-375与JAK2/STAT3、MAPK/ERK通路 | 第17-19页 |
| 1.5 研究的目的及意义 | 第19页 |
| 第二章 . 材料与方法 | 第19-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 过表达质粒 | 第19-20页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂耗材 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-37页 |
| 2.2.1 miR-375瞬时过表达载体构建 | 第22-30页 |
| 2.2.2 构建miR-375稳定转染细胞株 | 第30-32页 |
| 2.2.3 Western Blot检测miR-375调控的蛋白变化 | 第32-35页 |
| 2.2.4 miR-375对细胞增殖及迁移的影响 | 第35-36页 |
| 2.2.5 划痕实验检测miR-375对细胞迁移增殖能力的影响 | 第36-37页 |
| 2.2.6 裸鼠成瘤实验 | 第37页 |
| 第三章 . 结果与分析 | 第37-51页 |
| 3.1 miR-375靶标基因分析结果 | 第37-38页 |
| 3.2 pRNAT-CMV3.2/puro-miR375载体的构建 | 第38-40页 |
| 3.2.1 HEK293T细胞基因组DNA提取 | 第38页 |
| 3.2.2 梯度PCR扩增目的条带 | 第38-39页 |
| 3.2.3 菌落PCR检测片段连接 | 第39页 |
| 3.2.4 测序结果 | 第39-40页 |
| 3.3 pRNAT-CMV3.2/puro-miR375瞬时转染结果 | 第40-41页 |
| 3.4 miR-375稳定高表达细胞株构建及检测 | 第41-44页 |
| 3.5 Western Blot检测蛋白水平 | 第44-46页 |
| 3.6 MTS法和细胞计数法检测细胞增殖 | 第46-47页 |
| 3.7 划痕实验检测miR-375对细胞迁移能力的影响 | 第47-48页 |
| 3.8 裸鼠成瘤实验 | 第48-51页 |
| 第四章 . 讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 . 结论 | 第53-55页 |
| 5.1 hsa-miR-375过表达载体及稳转细胞株的构建 | 第53页 |
| 5.2 miR-375对JAK2/STAT3信号通路的抑制 | 第53页 |
| 5.3 miR-375对MAPK/ERK信号通路的抑制 | 第53页 |
| 5.4 miR-375对细胞增殖能力的影响 | 第53-54页 |
| 5.5 miR375对细胞迁移增殖能力的影响 | 第54页 |
| 5.6 miR375抑制裸鼠的肿瘤形成 | 第54-55页 |
| 附录一相关试剂配制方法 | 第55-56页 |
| 附录二 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
