| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语 | 第11-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-28页 |
| 1 引言 | 第15-26页 |
| 1.1 胃癌研究现状 | 第15-16页 |
| 1.2 Hedgehog信号通路 | 第16-20页 |
| 1.3 HSulf-1简介 | 第20-26页 |
| 2. 实验设计方案 | 第26-28页 |
| 2.1 实验目的与意义 | 第26-27页 |
| 2.2 实验流程图 | 第27-28页 |
| 第二章 HSulf-1稳转细胞系的筛选 | 第28-41页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第28-31页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第28页 |
| 1.2 主要溶液的配制 | 第28-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-37页 |
| 2.1 细胞复苏与培养 | 第31页 |
| 2.2 大量质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.3 质粒浓度测定与稀释 | 第32页 |
| 2.4 细胞转染 | 第32-33页 |
| 2.5 稳转细胞系的筛选 | 第33页 |
| 2.6 稳定表达HSulf-1 MNK28细胞株的鉴定 | 第33-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 HSulf-1对细胞生长与对Hedgehog信号通路的影响 | 第41-48页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第41页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂配制 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-44页 |
| 2.1 MTS实验(MTS Assay) | 第41页 |
| 2.2 克隆形成实验(Clone Formation Assay) | 第41-42页 |
| 2.3 双荧光素酶报告系统 | 第42-43页 |
| 2.4 半定量RT-PCR分析 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 HSulf-1重组蛋白的原核表达、分离纯化及活性测定 | 第48-63页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第48页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第48页 |
| 1.2 主要溶液的配制 | 第48页 |
| 2 实验方法 | 第48-54页 |
| 2.1 重组质粒的构建 | 第48-52页 |
| 2.2 重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第52-53页 |
| 2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第53-54页 |
| 2.4 蛋白质含量测定 | 第54页 |
| 2.5 HSulf-1酶活力测定 | 第54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 插图索引 | 第72-73页 |
| 硕士期间发表论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
