| 英文缩略词 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 第一部分 肝素酶可变剪接体的克隆及鉴定 | 第17-29页 |
| 实验材料 | 第17-20页 |
| 一、细胞及质粒 | 第17-18页 |
| 二、主要试剂 | 第18页 |
| 三、主要培养基和溶液的配制 | 第18-19页 |
| 四、主要仪器 | 第19-20页 |
| 实验方法 | 第20-23页 |
| 一、引物设计 | 第20页 |
| 二、白细胞的分离 | 第20-21页 |
| 三、总RNA的提取 | 第21页 |
| 四、cDNA的制备 | 第21页 |
| 五、PCR扩增肝素酶cDNA片段 | 第21-22页 |
| 六、可变剪接体的克隆筛选和测序鉴定 | 第22-23页 |
| 实验结果 | 第23-27页 |
| 一、总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 二、RT-PCR扩增肝素酶片段 | 第24-25页 |
| 三、可变剪接体的筛选 | 第25-26页 |
| 四、正常及各种可变剪接体的序列比对 | 第26-27页 |
| 小结 | 第27-29页 |
| 第二部分 肝素酶可变剪接体的亚细胞定位 | 第29-39页 |
| 实验材料 | 第29-31页 |
| 一、细胞及质粒 | 第29页 |
| 二、主要试剂 | 第29-30页 |
| 三、主要培养基和溶液的配制 | 第30页 |
| 四、主要仪器 | 第30-31页 |
| 实验方法 | 第31-34页 |
| 一、重组质粒的构建 | 第31-33页 |
| 二、肝素酶可变剪接体亚细胞定位研究 | 第33-34页 |
| 实验结果 | 第34-38页 |
| 一、PCR扩增全长肝素酶及其剪接体片段 | 第34-35页 |
| 二、菌落PCR鉴定重组质粒 | 第35-36页 |
| 三、肝素酶及其可变剪接体亚细胞定位 | 第36-38页 |
| 小结 | 第38-39页 |
| 第三部分 肝素酶可变剪接体的真核表达 | 第39-48页 |
| 实验材料 | 第39-41页 |
| 一、细胞及质粒 | 第39页 |
| 二、主要试剂 | 第39-40页 |
| 三、主要培养基和溶液的配制 | 第40-41页 |
| 四、主要仪器 | 第41页 |
| 实验方法 | 第41-44页 |
| 一、重组质粒的构建 | 第41-42页 |
| 二、肝素酶及其可变剪接体稳定表达细胞株的筛选和鉴定 | 第42-44页 |
| 实验结果 | 第44-46页 |
| 一、PCR扩增全长肝素酶及其剪接体片段 | 第44-45页 |
| 二、菌落PCR鉴定重组质粒 | 第45页 |
| 三、稳定转染细胞株的鉴定 | 第45-46页 |
| 小结 | 第46-48页 |
| 讨论 | 第48-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 综述 | 第55-63页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 个人简历 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |