致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
文献综述 | 第14-22页 |
引言 | 第22-23页 |
1 材料与方法 | 第23-33页 |
1.1 材料 | 第23-25页 |
1.1.1 细胞、毒株、血清及试验动物 | 第23页 |
1.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第23页 |
1.1.3 主要缓冲液及培养基配制 | 第23-24页 |
1.1.4 主要仪器 | 第24-25页 |
1.2 方法 | 第25-33页 |
1.2.1 重组pFastrBac-E质粒的构建及鉴定 | 第25-26页 |
1.2.2 重组转座子构建及鉴定 | 第26-27页 |
1.2.3 重组杆状病毒的获得及鉴定 | 第27-29页 |
1.2.4 重组杆状病毒TCID_(50)的测定 | 第29页 |
1.2.5 重组E蛋白免疫原性研究 | 第29-33页 |
2 结果与分析 | 第33-44页 |
2.1 E基因的扩增 | 第33页 |
2.2 pFastbac-E重组载体双酶切鉴定结果 | 第33-34页 |
2.3 重组载体rBacmid-E筛选和鉴定 | 第34-35页 |
2.4 重组杆状病毒的获得和鉴定 | 第35-37页 |
2.4.1 rBacmid-E重组载体转染sf9细胞病变观察 | 第35页 |
2.4.2 P4代病毒PCR鉴定 | 第35-36页 |
2.4.3 Western blot检测E蛋白在sf9细胞中的表达 | 第36页 |
2.4.4 IFA检测E蛋白在sf9细胞中的表达 | 第36-37页 |
2.4.5 重组杆状病毒TCID_(50)的测定 | 第37页 |
2.5 重组E蛋白免疫原性研究 | 第37-44页 |
2.5.1 E蛋白特异性抗体检测结果 | 第37-38页 |
2.5.2 血清中和抗体检测 | 第38页 |
2.5.3 淋巴细胞增殖试验 | 第38-39页 |
2.5.4 IFN-γ 和IL-4 细胞因子检测 | 第39-40页 |
2.5.5 攻毒保护试验 | 第40-42页 |
2.5.6 病理切片分析 | 第42-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
4 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
作者简介 | 第52页 |