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果蝇突触粘附分子Neuroligin2基因内含子区的miR-932功能研究

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
主要缩略词表第13-15页
前言第15-16页
第一章 文献综述第16-45页
    1.1 microRNA研究进展第16-24页
        microRNA的发现第16-18页
        经典miRNA的转录及生成通路第18-21页
        非传统的miRNA作用机制研究最新进展第21-24页
    1.2 miRNA功能与神经系统第24-39页
        miRNA与神经系统关系第24-27页
        miRNA与神经系统疾病关系第27-28页
        果蝇miRNA研究进展第28-33页
        果蝇miRNA方法学研究概要第33-39页
    1.3 miR-932及Neuroligin2分子第39-43页
        miR-932基因家族第39-41页
        Neuroligin分子简介第41-43页
    1.4 内含子microRNA与宿主基因关系第43-44页
    1.5 展望第44-45页
第二章 实验材料与方法第45-55页
    2.1 果蝇品系和转基因果蝇的制备第45-48页
        2.1.1 果蝇品系第45页
        2.1.2 转基因果蝇pUAST-miR-932制备第45-48页
    2.2 DNA质粒载体及引物序列第48页
    2.3 生物信息学分析工具及统计分析第48页
    2.4 细胞培养、转染及双荧光素酶报告基因系统第48-49页
    2.5 Western blot免疫印记第49页
    2.6 RNA提取及real-time qRT-PCR第49-51页
    2.7 microRNA原位杂交第51-52页
    2.8 免疫荧光染色第52-54页
    2.9 果蝇运动能力的测试第54-55页
第三章 实验结果与讨论第55-97页
    3.1 内含子miR-932的鉴定与表达谱分析第55-62页
        3.1.1 dnlg2内含子区包含一个昆虫特异的miR-932第55-56页
        3.1.2 miR-932在果蝇神经系统高表达第56-60页
        3.1.3 小节与讨论第60-62页
    3.2 miR-932通过靶向CDS编码区调控宿主基因dnlg2表达第62-68页
        3.2.1 miR-932可以靶向宿主基因dnlg2的编码区第62页
        3.2.2 miR-932和dnlg2编码区互作第62-64页
        3.2.3 miR-932直接抑制dnlg2表达第64-65页
        3.2.4 miR-932主要通过CDSsite1调节dnlg2的表达第65-66页
        3.2.5 小节与讨论第66-68页
    3.3 过表达miR-932导致果蝇突触生长发育缺陷第68-77页
        3.3.1 转基因UAS-miR-932果蝇的制备第68-69页
        3.3.2 过表达miR-932后初步表型分析第69-72页
        3.3.3 神经过表达miR-932引起突触形态异常第72-74页
        3.3.4 神经过表达miR-932导致突触传递异常第74-76页
        3.3.5 小节与讨论第76-77页
    3.4 miR-932突变体果蝇鉴定及功能分析第77-86页
        3.4.1 miR-932敲除突变体的制备第77-78页
        3.4.2 miR-932敲除、敲低后DNlg2及GluRⅡB表达量变化第78-79页
        3.4.3 miR-932参与抑制果蝇成虫运动活性第79-81页
        3.4.4 miR-932其它靶标筛选及功能分析第81-84页
        3.4.5 小节与讨论第84-86页
    3.5 内含子miRNA可通过CDS编码区调控宿主基因表达第86-92页
        3.5.1 果蝇内含子miRNA可以靶向其宿主基因编码区第86-88页
        3.5.2 人类内含子区miRNA靶向其宿主基因编码区第88-90页
        3.5.3 Neurexin-1可以被其外显子编码的miR-4952作用于编码区第90-92页
    3.6 全文总结与讨论第92-97页
        3.6.1 内含子miR-932与宿主dnlg2在转录水平的关系第92-93页
        3.6.2 内含子miR-932通过靶向CDS区调节宿主dnlg2表达及功能第93-94页
        3.6.3 位于CDS区的miRNA靶标序列不同于传统3'UTR的生物学意义第94-95页
        3.6.4 基因内miRNA直接靶向宿主基因CDS区可能是基因组中广泛存在的事件第95-97页
参考文献第97-107页
附录第107-115页
    附表1 本论文所用引物序列及用途第107-109页
    附表2 果蝇基因组中的内含子miRNA/宿主mRNA对及靶标关系预测结果第109-114页
    附表3 在miR-932上游发现的RNA聚合酶Ⅲ识别基序第114-115页
作者简介第115-116页
致谢第116页

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