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巴西橡胶树EMS离体诱变方法的初步研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1. 前言第9-22页
    1.1 橡胶树概述第9页
    1.2 巴西橡胶树组织培养研究概况第9-10页
    1.3 植物诱变育种技术与组织培养第10-14页
        1.3.1 诱变育种概况第10-11页
        1.3.2 诱变育种及最新进展第11-14页
            1.3.2.1 物理诱变第11-12页
            1.3.2.2 化学诱变第12-13页
            1.3.2.3 空间诱变第13-14页
    1.4 EMS在植物诱变育种中的应用第14-17页
        1.4.1 EMS诱变的原理第14-16页
        1.4.2 EMS在植物育种中的运用第16-17页
    1.5 EMS诱变后代突变体的筛选第17-18页
        1.5.1 常规筛选鉴定第17-18页
        1.5.2 分子标记鉴定第18页
    1.6 RAPD标记第18-19页
        1.6.1 RAPD标记原理第18-19页
        1.6.2 RAPD标记的应用第19页
    1.7 本研究的目的与意义第19-21页
    1.8 技术路线第21-22页
2 材料与方法第22-30页
    2.1 材料第22-23页
        2.1.1 花药供体无性系第22页
        2.1.2 主要试剂及仪器第22页
        2.1.3 培养基与培养条件第22-23页
        2.1.4 RAPD引物第23页
    2.2 方法第23-30页
        2.2.1 花药植株的诱导第23-24页
            2.2.1.1 愈伤组织的诱导第23页
            2.2.1.2 初生花药体胚发生第23-24页
            2.2.1.3 次生体胚发生第24页
            2.2.1.4 植株再生第24页
        2.2.2 EMS处理第24-26页
            2.2.2.1 诱变剂EMS无菌溶液的制备第24页
            2.2.2.2 EMS滴加法处理花药第24-25页
            2.2.2.3 EMS处理愈伤组织第25页
            2.2.2.4 EMS处理初生花药体胚第25-26页
            2.2.2.5 EMS处理次生体胚第26页
        2.2.3 再生植株的移栽第26页
            2.2.3.1 移栽基质的准备第26页
            2.2.3.2 炼苗第26页
            2.2.3.3 试管苗的移栽第26页
        2.2.4 再生植株的RAPD检测第26-30页
            2.2.4.1 再生植株叶片的DNA提取第26-27页
            2.2.4.2 DNA纯度检测第27页
            2.2.4.3 DNA的质量检测第27-28页
            2.2.4.4 RAPD反应体系和反应程序的建立第28页
            2.2.4.5 PCR扩增程序第28-29页
            2.2.4.6 RAPD引物筛选第29页
            2.2.4.7 聚类分析第29-30页
3 结果与分析第30-52页
    3.1 EMS滴加法处理花药第30-31页
        3.1.1 EMS滴加法处理花药对诱导愈伤组织的影响第30页
        3.1.2 EMS滴加法处理花药对诱导体胚发生的影响第30页
        3.1.3 EMS滴加法处理花药对植株再生率的影响第30-31页
    3.2 EMS处理愈伤组织第31-34页
        3.2.1 EMS处理对愈伤组织存活率的影响第31-32页
        3.2.2 EMS处理愈伤组织对出胚率的影响第32-33页
        3.2.3 EMS处理愈伤组织对植株再生率的影响第33-34页
    3.4 EMS处理初生花药体胚第34-36页
        3.4.1 EMS处理初生花药体胚对愈伤组织诱导率的影响第34-35页
        3.4.2 EMS处理初生花药体胚对出胚率的影响第35页
        3.4.3 EMS处理初生花药体胚对植株再生率的影响第35-36页
    3.5 EMS处理次生体胚第36-38页
        3.5.1 EMS处理次生体胚对愈伤组织诱导率的影响第36页
        3.5.2 EMS处理次生体胚对出胚率的影响第36-37页
        3.5.3 EMS处理次生体胚对植株再生率的影响第37-38页
    3.6 再生植株的移栽第38页
    3.7 再生植株的RAPD检测第38-52页
        3.7.1 橡胶叶片基因组DNA的提取第38-39页
        3.7.2 引物筛选及RAPD扩增结果第39-40页
        3.7.3 不同处理时间再生植株DNA RAPD检测及分析第40-42页
            3.7.3.1 不同浓度EMS处理2小时再生植株RAPD检测结果第40-41页
            3.7.3.2 不同浓度EMS处理4小时再生植株RAPD检测结果第41页
            3.7.3.3 不同浓度EMS处理6小时再生植株RAPD检测结果第41-42页
        3.7.4 聚类分析第42-52页
            3.7.4.1 相似系数第42-51页
            3.7.4.2 聚类分析第51-52页
4 讨论第52-54页
    4.1 EMS诱变受体材料的选择第52页
    4.2 最佳处理组合第52-53页
    4.3 拟诱变植株的移栽第53页
    4.4 RAPD检测的可行性第53-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-62页
附表1第62-63页
缩略词第63-64页
附图版第64-66页
致谢第66页

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