摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1. 前言 | 第9-22页 |
1.1 橡胶树概述 | 第9页 |
1.2 巴西橡胶树组织培养研究概况 | 第9-10页 |
1.3 植物诱变育种技术与组织培养 | 第10-14页 |
1.3.1 诱变育种概况 | 第10-11页 |
1.3.2 诱变育种及最新进展 | 第11-14页 |
1.3.2.1 物理诱变 | 第11-12页 |
1.3.2.2 化学诱变 | 第12-13页 |
1.3.2.3 空间诱变 | 第13-14页 |
1.4 EMS在植物诱变育种中的应用 | 第14-17页 |
1.4.1 EMS诱变的原理 | 第14-16页 |
1.4.2 EMS在植物育种中的运用 | 第16-17页 |
1.5 EMS诱变后代突变体的筛选 | 第17-18页 |
1.5.1 常规筛选鉴定 | 第17-18页 |
1.5.2 分子标记鉴定 | 第18页 |
1.6 RAPD标记 | 第18-19页 |
1.6.1 RAPD标记原理 | 第18-19页 |
1.6.2 RAPD标记的应用 | 第19页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
1.8 技术路线 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-30页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 花药供体无性系 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第22页 |
2.1.3 培养基与培养条件 | 第22-23页 |
2.1.4 RAPD引物 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-30页 |
2.2.1 花药植株的诱导 | 第23-24页 |
2.2.1.1 愈伤组织的诱导 | 第23页 |
2.2.1.2 初生花药体胚发生 | 第23-24页 |
2.2.1.3 次生体胚发生 | 第24页 |
2.2.1.4 植株再生 | 第24页 |
2.2.2 EMS处理 | 第24-26页 |
2.2.2.1 诱变剂EMS无菌溶液的制备 | 第24页 |
2.2.2.2 EMS滴加法处理花药 | 第24-25页 |
2.2.2.3 EMS处理愈伤组织 | 第25页 |
2.2.2.4 EMS处理初生花药体胚 | 第25-26页 |
2.2.2.5 EMS处理次生体胚 | 第26页 |
2.2.3 再生植株的移栽 | 第26页 |
2.2.3.1 移栽基质的准备 | 第26页 |
2.2.3.2 炼苗 | 第26页 |
2.2.3.3 试管苗的移栽 | 第26页 |
2.2.4 再生植株的RAPD检测 | 第26-30页 |
2.2.4.1 再生植株叶片的DNA提取 | 第26-27页 |
2.2.4.2 DNA纯度检测 | 第27页 |
2.2.4.3 DNA的质量检测 | 第27-28页 |
2.2.4.4 RAPD反应体系和反应程序的建立 | 第28页 |
2.2.4.5 PCR扩增程序 | 第28-29页 |
2.2.4.6 RAPD引物筛选 | 第29页 |
2.2.4.7 聚类分析 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-52页 |
3.1 EMS滴加法处理花药 | 第30-31页 |
3.1.1 EMS滴加法处理花药对诱导愈伤组织的影响 | 第30页 |
3.1.2 EMS滴加法处理花药对诱导体胚发生的影响 | 第30页 |
3.1.3 EMS滴加法处理花药对植株再生率的影响 | 第30-31页 |
3.2 EMS处理愈伤组织 | 第31-34页 |
3.2.1 EMS处理对愈伤组织存活率的影响 | 第31-32页 |
3.2.2 EMS处理愈伤组织对出胚率的影响 | 第32-33页 |
3.2.3 EMS处理愈伤组织对植株再生率的影响 | 第33-34页 |
3.4 EMS处理初生花药体胚 | 第34-36页 |
3.4.1 EMS处理初生花药体胚对愈伤组织诱导率的影响 | 第34-35页 |
3.4.2 EMS处理初生花药体胚对出胚率的影响 | 第35页 |
3.4.3 EMS处理初生花药体胚对植株再生率的影响 | 第35-36页 |
3.5 EMS处理次生体胚 | 第36-38页 |
3.5.1 EMS处理次生体胚对愈伤组织诱导率的影响 | 第36页 |
3.5.2 EMS处理次生体胚对出胚率的影响 | 第36-37页 |
3.5.3 EMS处理次生体胚对植株再生率的影响 | 第37-38页 |
3.6 再生植株的移栽 | 第38页 |
3.7 再生植株的RAPD检测 | 第38-52页 |
3.7.1 橡胶叶片基因组DNA的提取 | 第38-39页 |
3.7.2 引物筛选及RAPD扩增结果 | 第39-40页 |
3.7.3 不同处理时间再生植株DNA RAPD检测及分析 | 第40-42页 |
3.7.3.1 不同浓度EMS处理2小时再生植株RAPD检测结果 | 第40-41页 |
3.7.3.2 不同浓度EMS处理4小时再生植株RAPD检测结果 | 第41页 |
3.7.3.3 不同浓度EMS处理6小时再生植株RAPD检测结果 | 第41-42页 |
3.7.4 聚类分析 | 第42-52页 |
3.7.4.1 相似系数 | 第42-51页 |
3.7.4.2 聚类分析 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
4.1 EMS诱变受体材料的选择 | 第52页 |
4.2 最佳处理组合 | 第52-53页 |
4.3 拟诱变植株的移栽 | 第53页 |
4.4 RAPD检测的可行性 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
附表1 | 第62-63页 |
缩略词 | 第63-64页 |
附图版 | 第64-66页 |
致谢 | 第66页 |