| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-34页 |
| 第一章 野生大豆花发育及转录因子 | 第14-34页 |
| 1 野生大豆 | 第14-15页 |
| 1.1 野生大豆简介 | 第14页 |
| 1.2 野生大豆的优良特性 | 第14-15页 |
| 1.2.1 野生大豆是一种高蛋白植物 | 第14-15页 |
| 1.2.2 野生大豆具有丰产特性 | 第15页 |
| 1.2.3 野生大豆抗逆性强 | 第15页 |
| 1.2.4 在野生大豆中可以筛选出人类需要的特殊性状基因 | 第15页 |
| 1.3 野生大豆的利用意义 | 第15页 |
| 2 花发育的分子遗传学进展及花发育的模型 | 第15-24页 |
| 2.1 野生大豆花序 | 第15-16页 |
| 2.2 大豆生育期的划分 | 第16-17页 |
| 2.3 花的诱导 | 第17-21页 |
| 2.3.1 光周期途径 | 第17-18页 |
| 2.3.2 春化途径 | 第18-19页 |
| 2.3.3 自主途径 | 第19-20页 |
| 2.3.4 GA途径 | 第20-21页 |
| 2.4 经典的ABC模型 | 第21-22页 |
| 2.5 ABC模型的发展--ABCDE模型的建立 | 第22-24页 |
| 3 花发育相关的转录因子 | 第24-30页 |
| 4 LEAFY(LFY)同源基因的研究进展 | 第30-31页 |
| 5 APETALA1(AP1)同源基因的研究进展 | 第31-32页 |
| 6 研究展望 | 第32-33页 |
| 7 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 第二部分 研究报告 | 第34-80页 |
| 第二章 野生大豆LFY基因(GsLFY)的克隆与鉴定 | 第36-66页 |
| 1 材料与方法 | 第36-56页 |
| 1.1 材料 | 第36-37页 |
| 1.1.1 供试植物材料 | 第36页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 1.1.3 供试菌株和载体 | 第36页 |
| 1.1.4 供试试剂 | 第36-37页 |
| 1.2 方法 | 第37-56页 |
| 1.2.1 野生大豆基因组DNA的提取 | 第37-39页 |
| 1.2.2 野生大豆各个组织或器官RNA的提取 | 第39-41页 |
| 1.2.3 野生大RNA的纯化与cDNA第一链的合成 | 第41-42页 |
| 1.2.4 序列搜索与引物设计 | 第42-43页 |
| 1.2.5 野生大豆GsLFY基因在cDNA的克隆 | 第43页 |
| 1.2.6 PCR产物目的片段的纯化 | 第43-44页 |
| 1.2.7 连接、转化、转化子的蓝白斑法筛选与测序 | 第44-46页 |
| 1.2.8 序列的比对和分析 | 第46页 |
| 1.2.9 GsLFY基因在基因组中的克隆 | 第46页 |
| 1.2.10 组织表达谱分析 | 第46-47页 |
| 1.2.11 质粒的制备 | 第47-48页 |
| 1.2.12 植物表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 1.2.13 重组质粒转化根癌农杆菌 | 第49-51页 |
| 1.2.14 洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第51页 |
| 1.2.15 农杆菌介导的烟草转基因体系和转基因烟草的获得 | 第51-53页 |
| 1.2.16 转基因植株的检测 | 第53页 |
| 1.2.17 转录激活活性分析 | 第53-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-64页 |
| 2.1 总RNA的提取 | 第56页 |
| 2.2 GsLFY基因的克隆 | 第56-58页 |
| 2.3 GsLFY基因在gDNA中的克隆 | 第58-59页 |
| 2.4 组织表达谱分析 | 第59-60页 |
| 2.5 GsLFY蛋白的序列比对和系统发育分析 | 第60-62页 |
| 2.6 植物表达载体的构建 | 第62页 |
| 2.7 GsLFY融合蛋白的亚细胞定位 | 第62-63页 |
| 2.8 转录激活功能验证 | 第63-64页 |
| 2.9 转基因烟草阳性植株的检测 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 第三章 野生大豆AP1基因(GsAP1)的克隆与鉴定 | 第66-80页 |
| 1 材料与方法 | 第66-72页 |
| 1.1 材料 | 第66页 |
| 1.2 方法 | 第66-72页 |
| 1.2.1 野生大豆基因组DNA的提取 | 第66页 |
| 1.2.2 野生大豆各个组织或器官RNA的提取 | 第66页 |
| 1.2.3 野生大豆RNA的纯化与cDNA第一链的合成 | 第66页 |
| 1.2.4 序列搜索与引物设计 | 第66页 |
| 1.2.5 野生大豆GsAP1基因eDNA的克隆 | 第66-67页 |
| 1.2.6 PCR产物目的片段的纯化 | 第67页 |
| 1.2.7 连接、转化及转化子的蓝白斑法筛选 | 第67页 |
| 1.2.8 序列的比对和分析 | 第67页 |
| 1.2.9 GsAP1基因在基因组中的克隆 | 第67-68页 |
| 1.2.10 组织表达谱分析 | 第68页 |
| 1.2.11 质粒的制备 | 第68页 |
| 1.2.12 植物表达载体的构建 | 第68-69页 |
| 1.2.13 重组质粒转化根癌农杆菌 | 第69页 |
| 1.2.14 洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第69页 |
| 1.2.15 农杆菌介导的烟草转基因体系和转基因烟草的获得 | 第69页 |
| 1.2.16 转基因植株的检测 | 第69页 |
| 1.2.17 转录激活活性分析 | 第69-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-79页 |
| 2.1 GsAP1基因cDNA的克隆 | 第72-73页 |
| 2.2 GsAP1基因gDNA的克隆 | 第73-74页 |
| 2.3 组织表达谱分析 | 第74-75页 |
| 2.4 GsAP1蛋白的序列比对和系统发育分析 | 第75-76页 |
| 2.5 植物表达载体的构建 | 第76-77页 |
| 2.6 GsAP1融合蛋白的亚细胞定位 | 第77页 |
| 2.7 转录激活功能验证 | 第77-78页 |
| 2.8 转基因烟草阳性植株的检测 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-80页 |
| 全文结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 附录 | 第92-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
