摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-10页 |
图表索引 | 第10-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
第一部分 中和性rhbFGF单克隆抗体抗原表位的分析 | 第12-48页 |
1 前言 | 第12-17页 |
2 材料与方法 | 第17-31页 |
·实验材料 | 第17-19页 |
·试剂 | 第17页 |
·主要仪器设备 | 第17页 |
·主要试剂的配置 | 第17-19页 |
·实验方法 | 第19-31页 |
·腹水型单抗的制备 | 第19页 |
·抗体纯化 | 第19-21页 |
·SDS法检测抗体纯度 | 第21页 |
·bFGF多肽引物的设计 | 第21页 |
·bFGF多肽cDNA的合成 | 第21-22页 |
·bFGF多肽T载体的构建和表达鉴定 | 第22-25页 |
·bFGF多肽噬菌体表达载体的构建及鉴定 | 第25-26页 |
·M13噬菌体液体培养 | 第26-27页 |
·M13噬菌体扩增重组噬菌粒 | 第27页 |
·重组噬菌粒滴度的测定 | 第27-28页 |
·ELISA方法鉴定噬菌体展示的多肽 | 第28页 |
·ELISA法检测bFGF单抗结合表位的类型 | 第28页 |
·bFGF分子的酶解反应 | 第28页 |
·表位肽段与单抗MabF7免疫亲和反应 | 第28-29页 |
·单抗MabF10与bFGF的免疫亲和反应 | 第29页 |
·抗原抗体复合物的酶解反应 | 第29页 |
·ABI 4800 MALDI-TOF质谱仪分析肽质指纹图 | 第29-31页 |
3 结果与分析 | 第31-46页 |
·SDS对抗体纯化结果的鉴定 | 第31页 |
·BCA法测抗体浓度 | 第31-32页 |
·bFGF多肽引物的设计 | 第32-34页 |
·bFGF多肽cDNA的合成的鉴定 | 第34页 |
·bFGF多肽T克隆载体表达鉴定 | 第34-35页 |
·bFGF多肽噬菌体表达载体表达鉴定 | 第35-36页 |
·重组噬菌粒滴度的测定 | 第36页 |
·ELISA方法鉴定噬菌体展示的多肽 | 第36-38页 |
·bFGF单抗识别空间或线性表位的鉴定 | 第38页 |
·Trypsin酶解的bFGF多肽段质谱分析 | 第38-40页 |
·MabF7抗原识别表位质谱分析 | 第40-42页 |
·MabF10抗原识别表位质谱分析 | 第42-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
第二部分 VBP3复合肽疫苗安全性和稳定性的初步研究 | 第48-71页 |
1 前言 | 第48-52页 |
2 材料与方法 | 第52-61页 |
·实验材料 | 第52-54页 |
·菌株 | 第52页 |
·主要试剂 | 第52页 |
·主要试剂配制方法 | 第52-54页 |
·主要仪器设备 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-61页 |
·VBP3复合肽基因工程菌的鉴定 | 第54-57页 |
·VBP3复合肽的安全性研究 | 第57-60页 |
·VBP3复合肽的稳定性研究 | 第60-61页 |
3 结果与分析 | 第61-69页 |
·VBP3复合肽基因工程菌的鉴定 | 第61-64页 |
·VBP3复合肽重组质粒的酶切鉴定 | 第61页 |
·VBP3复合肽基因工程菌表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第61-62页 |
·VBP3复合肽基因工程菌表达产物的Western-blot鉴定 | 第62页 |
·VBP3复合肽的纯度分析 | 第62-63页 |
·VBP3复合肽蛋白浓度测定 | 第63-64页 |
·VBP3复合肽的安全性研究 | 第64-68页 |
·家兔局部刺激试验结果 | 第64-65页 |
·豚鼠全身过敏试验结果 | 第65-68页 |
·VBP3复合肽的稳定性研究 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-71页 |
第三部分 全文总结 | 第71页 |
致谢 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
附录 | 第76-77页 |
在校期间发表论文情况 | 第76页 |
在校期间参加的学术活动 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |