| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章文献综述 | 第14-34页 |
| 1.1 杨树对落叶松-杨栅锈菌抗病性 | 第14-15页 |
| 1.2 miRNA概述 | 第15-18页 |
| 1.2.1 miRNA的发现和特点 | 第15-16页 |
| 1.2.2 miRNA的产生和作用方式 | 第16-18页 |
| 1.3 植物microRNA对生长发育的调控 | 第18-20页 |
| 1.3.1 miRNA对根的调控 | 第18-19页 |
| 1.3.2 miRNA对叶的调控 | 第19页 |
| 1.3.3 miRNA对花的调控 | 第19页 |
| 1.3.4 miRNA参与自身代谢负反馈调节 | 第19-20页 |
| 1.4 植物miRNA对胁迫响应的调控 | 第20-22页 |
| 1.4.1 营养胁迫 | 第20-21页 |
| 1.4.2 环境胁迫 | 第21页 |
| 1.4.3 生物胁迫 | 第21-22页 |
| 1.5 植物miRNA的研究内容与方法 | 第22-28页 |
| 1.5.1 miRNA的筛选 | 第23-24页 |
| 1.5.2 miRNA表达分析 | 第24-25页 |
| 1.5.3 miRNA功能分析 | 第25-28页 |
| 1.6 mi R482与NBS-LRR类抗病基因 | 第28-29页 |
| 1.7 杨树miRNA研究进展与发展趋势 | 第29-31页 |
| 1.8 研究问题的提出与研究内容 | 第31-34页 |
| 1.8.1 研究问题的提出 | 第31-32页 |
| 1.8.2 研究内容 | 第32页 |
| 1.8.3 技术路线 | 第32-34页 |
| 第二章 锈菌侵染条件下川杨miRNA的鉴定与表达 | 第34-58页 |
| 2.1 材料与方法 | 第34-39页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第34页 |
| 2.1.2 锈菌接种和采样 | 第34-35页 |
| 2.1.3 试验试剂和仪器设备 | 第35页 |
| 2.1.4 总RNA的提取 | 第35页 |
| 2.1.5 总RNA浓度和纯度的检测 | 第35页 |
| 2.1.6 sRNA的测序 | 第35-36页 |
| 2.1.7 测序数据的计算机分析 | 第36页 |
| 2.1.8 miRNA靶基因的预测和靶基因功能分析 | 第36页 |
| 2.1.9 miRNA的差异表达分析 | 第36-37页 |
| 2.1.10 受落叶松-杨栅锈菌侵染后川杨miRNA的时间动态表达 | 第37-39页 |
| 2.2 结果与分析 | 第39-55页 |
| 2.2.1 川杨反应型观察结果 | 第39-40页 |
| 2.2.2 总RNA质量检测 | 第40-41页 |
| 2.2.3 miRNA序列分析 | 第41-43页 |
| 2.2.4 锈菌侵染川杨后的已知miRNA | 第43-45页 |
| 2.2.5 锈菌侵染川杨后的新miRNA | 第45页 |
| 2.2.6 miRNA的差异表达分析 | 第45-46页 |
| 2.2.7 靶基因预测和功能分析 | 第46-48页 |
| 2.2.8 受落叶松-杨栅锈菌侵染后川杨miRNA的时间动态表达 | 第48-55页 |
| 2.3 讨论 | 第55-57页 |
| 2.3.1 川杨中miRNA的鉴定 | 第55页 |
| 2.3.2 病原菌胁迫下靶基因的功能 | 第55-56页 |
| 2.3.3 受松-杨栅锈菌侵染的川杨miRNA时间动态表达 | 第56-57页 |
| 2.4 结论 | 第57-58页 |
| 第三章 miR482a靶基因的验证 | 第58-78页 |
| 3.1 材料与方法 | 第58-69页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第58页 |
| 3.1.2 锈菌接种和采样 | 第58页 |
| 3.1.3 试验试剂和仪器设备 | 第58-59页 |
| 3.1.4 总RNA的提取和RNA纯度、浓度的检测 | 第59页 |
| 3.1.5 去除基因组DNA | 第59页 |
| 3.1.6 RLM -5’RACE验证miR482a的靶基因 | 第59-63页 |
| 3.1.7 mi R482a靶基因的克隆及全长扩增 | 第63-67页 |
| 3.1.8 qRT-PCR分析miR482a和靶基因的表达 | 第67-69页 |
| 3.2 结果与分析 | 第69-75页 |
| 3.2.1 miR482a靶基因的验证 | 第69-70页 |
| 3.2.2 靶基因全长的扩增及生物信息学分析 | 第70-72页 |
| 3.2.3 川杨受锈菌侵染不同时间miR482a和靶基因的表达 | 第72-75页 |
| 3.3 讨论 | 第75-77页 |
| 3.3.1 miR482a靶基因的验证 | 第75-76页 |
| 3.3.2 miR482对NBS-LRR类抗病基因的调控 | 第76-77页 |
| 3.4 结论 | 第77-78页 |
| 第四章 川杨mi R482a表达载体的构建与遗传转化 | 第78-99页 |
| 4.1 材料与方法 | 第78-85页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第78页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第78-79页 |
| 4.1.3 试验仪器与设备 | 第79页 |
| 4.1.4 试验方法与步骤 | 第79-85页 |
| 4.2 结果与分析 | 第85-95页 |
| 4.2.1 基因组DNA的提取和前体基因的扩增 | 第85-88页 |
| 4.2.2 质粒提取和酶切 | 第88-89页 |
| 4.2.3 重组载体的验证 | 第89页 |
| 4.2.4 根癌农杆菌转化的PCR验证 | 第89-90页 |
| 4.2.5 根癌农杆菌介导的川杨miR482a的遗传转化 | 第90-95页 |
| 4.3 讨论 | 第95-98页 |
| 4.3.1 mi R482过表达载体的构建 | 第95-97页 |
| 4.3.2 根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第97-98页 |
| 4.4 结论 | 第98-99页 |
| 第五章 总体结论与建议 | 第99-101页 |
| 5.1 本研究的主要结论 | 第99页 |
| 5.2 本研究的创新点 | 第99页 |
| 5.3 有待进一步研究的问题 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 附录 | 第113-137页 |
| 缩略词 | 第137-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 作者简介 | 第139页 |
