| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 苹果矮化砧木种质资源与致矮机理研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 矮化砧木种质资源 | 第13-16页 |
| 1.1.2 苹果砧木致矮机理研究进展 | 第16-18页 |
| 1.1.2.1 树体发育与矮化 | 第16页 |
| 1.1.2.2 激素与砧木生长势的关系 | 第16-18页 |
| 1.2 植物体内生长素代谢 | 第18-21页 |
| 1.3 苹果短枝型研究进展 | 第21-25页 |
| 1.4 本论文的研究目的意义 | 第25-26页 |
| 第二章生长素合成、运输和代谢基因在苹果砧木中表达分析 | 第26-54页 |
| 2.1 材料和方法 | 第26-30页 |
| 2.1.1 材料 | 第26页 |
| 2.1.2 采样 | 第26页 |
| 2.1.3 树体生长指标测定 | 第26页 |
| 2.1.4 生长素测定 | 第26-27页 |
| 2.1.5 RNA提取及反转录 | 第27-28页 |
| 2.1.6 苹果基因组中生长素相关基因确定 | 第28-29页 |
| 2.1.7 基因表达量测定 | 第29页 |
| 2.1.8 GH3酶活性测定 | 第29-30页 |
| 2.1.9 基因表达聚类分析 | 第30页 |
| 2.1.10 数据处理与分析 | 第30页 |
| 2.2 结果与分析 | 第30-52页 |
| 2.2.1 株高和根系生长量 | 第30-31页 |
| 2.2.2 生长素含量 | 第31-32页 |
| 2.2.3 苹果生长素合成基因MdYUCCA基因鉴定及表达分析 | 第32-36页 |
| 2.2.4 苹果生长素运输基因MdPIN基因鉴定及表达分析 | 第36-40页 |
| 2.2.5 苹果生长素轭合酶基因MdGH3鉴定及表达分析 | 第40-46页 |
| 2.2.6 苹果生长素轭合物水解酶基因MdILR基因家族鉴定及表达分析 | 第46-51页 |
| 2.2.7 生长素含量和生长素代谢基因表达量聚类分析 | 第51-52页 |
| 2.3 讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 MdYUCCA8和MdYUCCA10a克隆及功能分析 | 第54-75页 |
| 3.1 材料和方法 | 第54-58页 |
| 3.1.1 基因克隆 | 第54页 |
| 3.1.2 蛋白质保守结构域分析和进化分析 | 第54页 |
| 3.1.3 启动子GUS染色及测定 | 第54-56页 |
| 3.1.4 农杆菌感受态细胞的制备 | 第56页 |
| 3.1.5 农杆菌的转化 | 第56页 |
| 3.1.6 烟草双荧光素酶瞬时表达 | 第56-57页 |
| 3.1.7 拟南芥种植 | 第57页 |
| 3.1.8 拟南芥转基因 | 第57-58页 |
| 3.2 结果与分析 | 第58-73页 |
| 3.2.1 MdYUCCA8和MdYUCCA10a基因克隆 | 第58-59页 |
| 3.2.2 MdYUCCA8和MdYUCCA10a基因启动子克隆及顺式作用元件分析 | 第59-66页 |
| 3.2.3 MdYUCCA8和MdYUCCA10a基因启动子对外源激素响应 | 第66页 |
| 3.2.4 温度对M9苹果苗生长的影响 | 第66-69页 |
| 3.2.5 双荧光素酶瞬时表达验证MdYUCCA8启动子和MdPIF4a在烟草叶片中的相互作用 | 第69-70页 |
| 3.2.6 拟南芥中异位表达MdYUCCA8和MdYUCCA10a表型观察 | 第70-73页 |
| 3.3 讨论 | 第73-75页 |
| 第四章 苹果生长素运输基因MdABCB19克隆及其在矮化砧木中的表达 | 第75-88页 |
| 4.1 材料和方法 | 第75-77页 |
| 4.1.1 材料 | 第75页 |
| 4.1.2 MdABCB19的克隆 | 第75页 |
| 4.1.3 氨基酸序列同源性及蛋白质三级结构分析 | 第75-76页 |
| 4.1.4 MdABCB19的表达分析与生长素含量测定 | 第76页 |
| 4.1.5 MdABCB19启动子克隆及顺式作用元件分析 | 第76页 |
| 4.1.6 MdABCB19启动子活性分析 | 第76-77页 |
| 4.2 结果与分析 | 第77-85页 |
| 4.2.1 MdABCB19的组织表达 | 第77-78页 |
| 4.2.2 长富2号/M9和长富2号/MM106中MdABCB19的表达 | 第78页 |
| 4.2.3 MdABCB19的分离与序列分析 | 第78页 |
| 4.2.4 MdABCB19启动子的克隆与分析 | 第78-80页 |
| 4.2.5 M9和MM106 ABCB19启动子活性分析 | 第80-85页 |
| 4.3 讨论 | 第85-88页 |
| 第五章 长富2号及短枝芽变烟富6号miRNA组分析 | 第88-120页 |
| 5.1 材料和方法 | 第88-90页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第88页 |
| 5.1.2 树体生长测量 | 第88页 |
| 5.1.3 激素测定 | 第88页 |
| 5.1.4 GA处理 | 第88页 |
| 5.1.5 miRNA测序样品制备 | 第88-89页 |
| 5.1.6 miRNA鉴定 | 第89-90页 |
| 5.1.7 miRNA靶基因预测 | 第90页 |
| 5.1.8 GO富集和KEGG途径分析 | 第90页 |
| 5.1.9 miRNA和mRNA的荧光定量PCR验证 | 第90页 |
| 5.2 结果与分析 | 第90-117页 |
| 5.2.1 长富2号和烟富6号的生长特性 | 第90页 |
| 5.2.2 植物激素含量 | 第90-92页 |
| 5.2.3 长富2号和烟富6号中miRNA测序数据质量分析 | 第92-98页 |
| 5.2.4 差异表达miRNA的分析 | 第98-99页 |
| 5.2.5 miRNA靶基因预测 | 第99-107页 |
| 5.2.6 长富2号和烟富6号中miRNA靶基因GO和KEGG分析 | 第107-111页 |
| 5.2.7 长富2号和烟富6号中参与SAM发育相关miRNA及其靶基因定量验证 | 第111-112页 |
| 5.2.8 长富2号和烟富6号中参与节间伸长相关miRNA及其靶基因定量验证 | 第112-113页 |
| 5.2.9 烟富6号和长富2号中其它差异miRNA及其靶基因的表达验证 | 第113页 |
| 5.2.10 细胞周期和细胞伸长相关基因的表达 | 第113-114页 |
| 5.2.11 激素相关基因表达 | 第114-116页 |
| 5.2.12 GA对枝条生长和miRNA表达的影响 | 第116-117页 |
| 5.3 讨论 | 第117-120页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第120-121页 |
| 6.1 结论 | 第120页 |
| 6.2 主要创新点 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-130页 |
| 附录 | 第130-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 作者简介 | 第135-136页 |
