| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 γ-PGA的结构和性质特点 | 第12-13页 |
| 1.3 合成γ-PGA的微生物 | 第13-14页 |
| 1.4 γ-PGA的生物合成酶体系 | 第14-15页 |
| 1.5 γ-PGA生物合成的相关基因工程 | 第15-16页 |
| 1.6 γ-PGA的生产方法 | 第16-17页 |
| 1.6.1 化学合成法 | 第16页 |
| 1.6.2 酶转化法 | 第16-17页 |
| 1.6.3 微生物发酵法 | 第17页 |
| 1.7 γ-PGA的分离提纯 | 第17-18页 |
| 1.8 γ-PGA的定量分析 | 第18-19页 |
| 1.9 菌株的诱变研究 | 第19页 |
| 1.10 γ-PGA的应用 | 第19-23页 |
| 1.10.1 医药领域的应用 | 第20页 |
| 1.10.2 食品领域的应用 | 第20页 |
| 1.10.3 农业领域的应用 | 第20-21页 |
| 1.10.4 环保领域的应用 | 第21页 |
| 1.10.5 化妆品方面的应用 | 第21-23页 |
| 1.11 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 纳豆芽孢杆菌产γ-聚谷氨酸的 | 第24-36页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 材料和方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 试验菌种 | 第24页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.3 培养基及培养条件 | 第25页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.3 菌株处理 | 第26-28页 |
| 2.3.1 高压针板电晕电场诱变 | 第26页 |
| 2.3.2 稀土元素对γ-PGA产量的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.3 γ-PGA产量稳定性试验 | 第27页 |
| 2.3.4 γ-PGA的分离提纯 | 第27页 |
| 2.3.5 γ-PGA红外光谱测定 | 第27页 |
| 2.3.6 γ-PGA分子量测定 | 第27-28页 |
| 2.4 结果与分析 | 第28-34页 |
| 2.4.1 处理前后菌株形态 | 第28-29页 |
| 2.4.2 稀土元素对菌株生长形态的影响 | 第29页 |
| 2.4.3 高压针板电晕电场对菌株致死率和合成γ-PGA产量的影响 | 第29-31页 |
| 2.4.4 稀土元素对合成γ-PGA产量的影响 | 第31-33页 |
| 2.4.5 突变菌株和原始菌株产γ-PGA的遗传稳定性 | 第33页 |
| 2.4.6 发酵产物的FTIR测定 | 第33-34页 |
| 2.4.7 γ-PGA分子量测定 | 第34页 |
| 2.5 结论与讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 γ-聚谷氨酸的响应面优化研究 | 第36-52页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 材料和方法 | 第36-37页 |
| 3.2.1 材料 | 第36页 |
| 3.2.2 培养基、培养条件与试剂 | 第36页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第36-37页 |
| 3.2.4 γ-PGA的提纯和测定 | 第37页 |
| 3.3 发酵条件优化 | 第37-38页 |
| 3.3.1 单因素试验 | 第37页 |
| 3.3.2 响应面实验设计 | 第37-38页 |
| 3.3.2.1 Plackett-Burman设计 | 第37页 |
| 3.3.2.2 最陡爬坡实验设计 | 第37-38页 |
| 3.3.2.3 Box-Behnken设计 | 第38页 |
| 3.4 结果与分析 | 第38-50页 |
| 3.4.1 单因素的优化研究 | 第38-44页 |
| 3.4.1.1 碳源种类的筛选与浓度优化的研究 | 第38-40页 |
| 3.4.1.2 氮源优化 | 第40页 |
| 3.4.1.3 谷氨酸钠浓度优化 | 第40-41页 |
| 3.4.1.4 酵母提取粉浓度的影响 | 第41页 |
| 3.4.1.5 多种无机盐不同浓度对γ-PGA合成量的影响 | 第41-43页 |
| 3.4.1.6 pH对γ-PGA的产量影响 | 第43-44页 |
| 3.4.2 菌株N-E5.2b最适培养基的确定 | 第44-50页 |
| 3.4.2.1 Plackett-Burman实验 | 第44-46页 |
| 3.4.2.2 最陡爬坡实验设计 | 第46页 |
| 3.4.2.3 中心组合实验设计及结果 | 第46-50页 |
| 3.4.2.4 确定和验证培养基最佳浓度 | 第50页 |
| 3.5 结论与讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 γ-聚谷氨酸的基因克隆与序列分析 | 第52-62页 |
| 4.1 引言 | 第52页 |
| 4.2 材料与方法 | 第52-55页 |
| 4.2.1 试验菌种 | 第52页 |
| 4.2.2 材料与仪器 | 第52-53页 |
| 4.2.3 引物的设计与合成 | 第53-54页 |
| 4.2.4 菌株基因组DNA的提取 | 第54页 |
| 4.2.5 PCR反应 | 第54页 |
| 4.2.6 PCR产物纯化回收及序列测定 | 第54-55页 |
| 4.2.7 pgsA基因序列分析 | 第55页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第55-60页 |
| 4.3.1 6株菌的γ-PGA合成酶基因的PCR扩增 | 第55页 |
| 4.3.2 γ-PGA合成酶酶基因的序列比对 | 第55-58页 |
| 4.3.3 γ-PGA合成酶蛋白的序列比对 | 第58-60页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 主要结论与展望 | 第62-64页 |
| 5.1 主要结论 | 第62-63页 |
| 5.2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 硕士在读期间发表和即将发表的文章 | 第73页 |
