| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第14-35页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第14-16页 |
| 1.2 RNAI概述 | 第16-19页 |
| 1.2.1 RNAi的发现及意义 | 第16页 |
| 1.2.2 RNAi的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3 SIRNA递送的研究进展 | 第19-24页 |
| 1.3.1 siRNA体内外递送机制研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.2 siRNA递送方法的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.4 硅质体的提出及发展 | 第24-30页 |
| 1.4.1 硅质体的提出 | 第25-26页 |
| 1.4.2 硅质体的研究进展 | 第26-30页 |
| 1.5 脂质纳米盘的研究现状 | 第30-33页 |
| 1.5.1 脂质纳米盘的组成 | 第31-32页 |
| 1.5.2 脂质纳米盘作为药物载体的研究进展 | 第32-33页 |
| 1.5.3 脂质纳米盘作为siRNA递送载体的应用 | 第33页 |
| 1.6 本论文研究内容 | 第33-35页 |
| 第2章 实验材料与研究方法 | 第35-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第35-37页 |
| 2.1.2 自配溶液 | 第37页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第37-38页 |
| 2.1.4 合成所用试剂的纯化 | 第38页 |
| 2.2 实验所用的细胞系 | 第38-39页 |
| 2.3 纳米粒子的制备 | 第39-41页 |
| 2.3.1 复合脂质的合成 | 第39-40页 |
| 2.3.2 阳离子脂质的合成 | 第40-41页 |
| 2.3.3 阳离子硅质体的制备 | 第41页 |
| 2.3.4 阳离子复合脂质纳米盘的制备 | 第41页 |
| 2.4 样品表征的分析测试方法 | 第41-43页 |
| 2.4.1 核磁共振分析(~1H NMR) 和质谱 | 第41-42页 |
| 2.4.2 透射电子显微镜 | 第42页 |
| 2.4.3 原子力显微镜 | 第42页 |
| 2.4.4 红外光谱分析 | 第42页 |
| 2.4.5 差式扫描量热分析 | 第42-43页 |
| 2.4.6 粒度分布及Zeta电位分析 | 第43页 |
| 2.5 凝胶阻滞实验 | 第43页 |
| 2.6 体外细胞实验 | 第43-45页 |
| 2.6.1 细胞毒性实验 | 第43-44页 |
| 2.6.2 荧光素酶分析 | 第44-45页 |
| 2.7 激光共聚焦显微镜观察载体SIRNA复合物的共定位情况 | 第45页 |
| 2.8 流式细胞术 | 第45-46页 |
| 2.9 实时定量PCR检测分析 | 第46页 |
| 2.10 活体成像 | 第46-47页 |
| 2.11 冷冻切片 | 第47页 |
| 2.12 统计学方法 | 第47-48页 |
| 第3章 阳离子硅质体的制备及表征 | 第48-66页 |
| 3.1 引言 | 第48-50页 |
| 3.2 阳离子脂质的设计思路 | 第50页 |
| 3.3 阳离子脂质的合成与表征 | 第50-53页 |
| 3.3.1 阳离子脂质的合成 | 第50-51页 |
| 3.3.2 阳离子脂质的表征 | 第51-53页 |
| 3.4 阳离子硅质体的制备 | 第53-54页 |
| 3.5 阳离子硅质体的表征 | 第54-61页 |
| 3.5.1 粒径和Zeta电位 | 第54-57页 |
| 3.5.2 阳离子硅质体的TEM表征 | 第57-58页 |
| 3.5.3 阳离子硅质体与siRNA的结合能力检测 | 第58-60页 |
| 3.5.4 CCs/siRNA复合物的粒径、电位及TEM表征 | 第60-61页 |
| 3.6 阳离子硅质体的毒性检测 | 第61-64页 |
| 3.7 本章小结 | 第64-66页 |
| 第4章 阳离子硅质体用于体内外基因转染 | 第66-84页 |
| 4.1 引言 | 第66-67页 |
| 4.2 阳离子硅质体的体外转染效果评价 | 第67-69页 |
| 4.3 实时定量PCR检测基因沉默效果 | 第69-71页 |
| 4.4 共聚焦显微镜观察阳离子硅质体在细胞中的共定位 | 第71-73页 |
| 4.5 阳离子硅质体的体内分布 | 第73-77页 |
| 4.6 肝靶向功能研究 | 第77-82页 |
| 4.7 本章小结 | 第82-84页 |
| 第5章 阳离子复合脂质纳米盘的制备及表征 | 第84-98页 |
| 5.1 引言 | 第84-85页 |
| 5.2 阳离子复合脂质纳米盘的制备 | 第85-86页 |
| 5.3 阳离子复合脂质纳米盘的表征 | 第86-91页 |
| 5.3.1 傅里叶红外光谱表征 | 第86-87页 |
| 5.3.2 阳离子复合脂质纳米盘的粒径和电位表征 | 第87-89页 |
| 5.3.3 透射电镜扫描图 | 第89-90页 |
| 5.3.4 原子力显微镜表征 | 第90-91页 |
| 5.4 阳离子复合脂质纳米盘与SIRNA的结合能力检测 | 第91-93页 |
| 5.5 阳离子复合脂质纳米盘的毒性检测 | 第93-97页 |
| 5.6 本章小结 | 第97-98页 |
| 第6章 阳离子复合脂质纳米盘的体内外应用效果评价 | 第98-112页 |
| 6.1 引言 | 第98-99页 |
| 6.2 阳离子复合脂质纳米盘的体外转染效果评价 | 第99-101页 |
| 6.3 阳离子硅质体批次间可重复性及功能稳定性检测 | 第101-102页 |
| 6.4 共聚焦显微镜观察阳离子复合脂质纳米盘在细胞中的共定位 | 第102-105页 |
| 6.5 阳离子复合脂质纳米盘的体内分布 | 第105-108页 |
| 6.6 基于硅质体不同形态转染载体的对比 | 第108-110页 |
| 6.7 本章小结 | 第110-112页 |
| 结论 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-127页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| 个人简历 | 第130页 |
