摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1.1 中华鳖物种简介 | 第12页 |
1.2 性别分化机制相关研究 | 第12-13页 |
1.2.1 性别决定方式 | 第12-13页 |
1.2.2 龟鳖类性别决定 | 第13页 |
1.3 脊椎动物性别分化相关基因的研究 | 第13-17页 |
1.3.1 雌性(卵巢)分化关键基因 | 第14-15页 |
1.3.2 雄性(睾丸)分化关键基因 | 第15-17页 |
1.4 Cyp19a1基因在脊椎动物性别分化中的作用研究 | 第17-19页 |
1.4.1 Cyp19a1基因在哺乳类脊椎动物性别分化中的作用研究 | 第17页 |
1.4.2 Cyp19a1基因在两栖类脊椎动物性别分化中的作用研究 | 第17-18页 |
1.4.3 Cyp19a1基因在鸟类脊椎动物性别分化中的作用研究 | 第18页 |
1.4.4 Cyp19a1基因在鱼类脊椎动物性别分化中的作用研究 | 第18页 |
1.4.5 Cyp19a1基因在爬行类脊椎动物性别分化中的作用研究 | 第18-19页 |
1.5 Cyp19a1与Foxl2在雌性性别分化中的作用研究 | 第19页 |
1.6 本研究的内容与意义 | 第19-21页 |
第二章 中华鳖Cyp19a1基因的表达分析 | 第21-28页 |
2.1 材料与方法 | 第21-24页 |
2.1.1 中华鳖样品采集 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂与仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 RNA提取和cDNA合成 | 第22-23页 |
2.1.4 半定量PCR | 第23-24页 |
2.1.5 实时荧光定量PCR | 第24页 |
2.1.6 数据分析方法 | 第24页 |
2.2 结果与分析 | 第24-26页 |
2.2.1 中华鳖Cyp19a1基因组织差异性表达分析 | 第24-25页 |
2.2.2 中华鳖Cyp19a1基因胚胎性腺不同时期表达分析 | 第25-26页 |
2.3 讨论 | 第26-28页 |
第三章 中华鳖Cyp19a1基因在早期卵巢分化中的功能研究 | 第28-41页 |
3.1 材料与方法 | 第28-33页 |
3.1.1 样品采集 | 第28页 |
3.1.2 实验试剂与仪器 | 第28-29页 |
3.1.3 芳香化酶抑制剂处理 | 第29页 |
3.1.4 Cyp19a1慢病毒干扰载体的构建及鳖胚侵染 | 第29页 |
3.1.5 Cyp19a1慢病毒过表达载体的构建及鳖胚侵染 | 第29-30页 |
3.1.6 RNA提取和cDNA合成 | 第30页 |
3.1.7 实时荧光定量PCR | 第30页 |
3.1.8 石蜡切片 | 第30-31页 |
3.1.9 苏木素-伊红(H&E)染色 | 第31-32页 |
3.1.10 免疫组织化学染色 | 第32-33页 |
3.1.11 数据分析方法 | 第33页 |
3.2 结果与分析 | 第33-39页 |
3.2.1 芳香化酶抑制剂介导的功能分析 | 第33-35页 |
3.2.2 慢病毒载体感染有效性鉴定 | 第35-36页 |
3.2.3 慢病毒载体介导的Cyp19a1功能鉴定 | 第36-39页 |
3.3 讨论 | 第39-41页 |
第四章 Foxl2基因过表达对中华鳖性腺分化的影响研究 | 第41-49页 |
4.1 材料与方法 | 第41-43页 |
4.1.1 样品采集 | 第41页 |
4.1.2 实验试剂与仪器 | 第41-42页 |
4.1.3 Foxl2慢病毒过表达载体的构建及鳖胚感染 | 第42页 |
4.1.4 RNA提取和cDNA合成 | 第42页 |
4.1.5 实时荧光定量PCR | 第42页 |
4.1.6 石蜡切片 | 第42页 |
4.1.7 苏木素-伊红(H&E)染色 | 第42-43页 |
4.1.8 免疫组织化学染色 | 第43页 |
4.1.9 数据分析方法 | 第43页 |
4.2 结果与分析 | 第43-47页 |
4.2.1 慢病毒载体感染有效性鉴定 | 第43-44页 |
4.2.2 慢病毒载体介导的Foxl2功能鉴定 | 第44-47页 |
4.3 讨论 | 第47-49页 |
第五章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
科研成果与资助单位(人) | 第59页 |