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褶纹冠蚌过氧化氢酶基因克隆、原核表达及酶活性分析

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
缩略语表第6-7页
目录第7-9页
第一章 文献综述第9-16页
 1 贝类的免疫学研究第9-13页
   ·贝类的细胞免疫第9-10页
   ·贝类的体液免疫第10-13页
     ·氧化酶类和抗氧化酶类第10-11页
     ·水解酶类第11页
     ·抗菌肽第11页
     ·凝集素第11-12页
     ·硝酸盐超氧化物阴离子第12页
     ·溶血素第12-13页
 2 过氧化氢酶基因第13-14页
   ·CAT基因的种类和分布第13页
   ·CAT基因结构特点和功能第13-14页
   ·CAT基因的应用第14页
     ·CAT基因在纺织方面的应用第14页
     ·CAT基因在食品方面的应用第14页
 3 本研究的意义第14-16页
第二章 褶纹冠蚌过氧化氢酶基因的克隆、原核表达及酶活性分析第16-47页
 1 前言第16页
 2 材料与方法第16-25页
   ·主要仪器设备第16-17页
   ·主要试剂第17页
   ·试验材料第17页
   ·试验方法第17-25页
     ·血细胞总RNA的提取第17-18页
     ·褶纹冠蚌SMART cDNA的合成第18-19页
     ·cpCAT cDNA中间序列的扩增第19-20页
     ·cpCAT基因5’末端和3’末端cDNA扩增第20页
     ·cpCAT基因组克隆第20页
     ·测序和序列分析第20-21页
     ·半定量PCR检测cpCAT的组织表达特征第21-22页
     ·cpCAT基因全长原核表达及重组表达质粒的构建第22-24页
     ·重组cpCAT的诱导表达及纯化第24-25页
     ·CAT重组cpCAT可溶蛋白浓度及活性测定第25页
     ·温度,PH及变性剂对重组cpCAT活性的影响第25页
 3 结果第25-44页
   ·褶纹冠蚌血液中总RNA的纯度第25-26页
   ·褶纹冠蚌CAT基因的cDNA序列第26-27页
   ·cpCAT基因的cDNA全长分析及序列鉴定第27-29页
   ·推导的cpCAT氨基酸序列的同源性比较第29-33页
   ·基于推导的cpCAT氨基酸序列建立的进化树分析第33-35页
   ·cpCAT的基因结构第35-38页
   ·cpCAT的组织表达特征第38-39页
   ·cpCAT重组质粒的构建及在大肠杆菌(DE_3)中的表达第39-40页
   ·cpCAT可溶蛋白诱导表达及纯化第40-41页
   ·可溶蛋白浓度及活性测定第41页
   ·温度,PH及变性剂对重组cpCAT活性的影响第41-44页
 4.讨论第44-47页
第三章 结论与展望第47-49页
 结论第47-48页
 展望第48-49页
参考文献第49-53页
致谢第53-54页
攻读学位期间的研究成果第54页

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