| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1. 绪论 | 第14-23页 |
| 1.1 前言 | 第14-15页 |
| 1.2 生物法降解羽毛研究现状 | 第15-19页 |
| 1.2.1 降解角蛋白的微生物类群 | 第15-16页 |
| 1.2.2 微生物降解角蛋白机制研究现状 | 第16-17页 |
| 1.2.3 角蛋白酶的研究 | 第17-19页 |
| 1.3 细菌多肽转运通道研究进展 | 第19-22页 |
| 1.3.1 细菌孔蛋白家族 | 第19-20页 |
| 1.3.2 肽转运饥饿蛋白家族 | 第20页 |
| 1.3.3 依赖质子的寡肽转运蛋白家族 | 第20-21页 |
| 1.3.4 寡肽转运蛋白家族 | 第21页 |
| 1.3.5 肽/冠瘿氨基酸/镍转运蛋白家族 | 第21-22页 |
| 1.4 选题意义和主要内容 | 第22-23页 |
| 2. 角蛋白单体制备及表征 | 第23-35页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.2.1 羽毛及羽毛粉 | 第23页 |
| 2.2.2 药品与试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.3 仪器设备 | 第24页 |
| 2.2.4 溶解液及溶液 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.3.1 羽毛的溶解条件确定 | 第25页 |
| 2.3.2 角蛋白单体的外源表达与纯化 | 第25-27页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第27-29页 |
| 2.3.4 蛋白质质谱分析 | 第29页 |
| 2.3.5 蛋白质含量的测定 | 第29-30页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第30-34页 |
| 2.4.1 化学法制备水溶性角蛋白 | 第30-32页 |
| 2.4.2 大肠杆菌外源表达角蛋白单体 | 第32-34页 |
| 2.5 本章小结 | 第34-35页 |
| 3. S. maltophilia DHHJ产角蛋白酶小分子诱导源确定 | 第35-47页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-37页 |
| 3.2.1 羽毛及羽毛粉 | 第35页 |
| 3.2.2 供试细菌 | 第35页 |
| 3.2.3 药品与试剂 | 第35-36页 |
| 3.2.4 仪器设备 | 第36页 |
| 3.2.5 培养基（w/v%） | 第36-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.3.1 发酵培养条件的选择 | 第37-38页 |
| 3.3.2 生物法降解羽毛粉验证角蛋白单体 | 第38页 |
| 3.3.3 角蛋白单体诱导S.maltophilia DHHJ产酶 | 第38-39页 |
| 3.3.4 角蛋白单体酶解片段诱导S.maltophilia DHHJ产酶 | 第39页 |
| 3.3.5 角蛋白酶活性的测定 | 第39-40页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第40-45页 |
| 3.4.1 最适发酵培养温度和pH | 第40-41页 |
| 3.4.2 羽毛粉培养基中角蛋白单体检测 | 第41页 |
| 3.4.3 两种培养基下羽毛降解情况对比 | 第41-42页 |
| 3.4.4 以角蛋白单体及角蛋白单体酶解片段诱导S.maltophilia DHHJ产酶 | 第42-45页 |
| 3.5 本章小结 | 第45-47页 |
| 4. 荧光标记示踪角蛋白单体与S. maltophilia DHHJ细胞相互作用 | 第47-56页 |
| 4.1 引言 | 第47页 |
| 4.2 实验材料 | 第47-49页 |
| 4.2.1 供试细菌 | 第47页 |
| 4.2.2 水溶性角蛋白 | 第47-48页 |
| 4.2.3 药品与试剂 | 第48页 |
| 4.2.4 仪器设备 | 第48页 |
| 4.2.5 培养基及溶液 | 第48-49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-50页 |
| 4.3.1 制备异硫氰酸荧光素（FITC）标记的角蛋白单体（FITC-Keratin） | 第49页 |
| 4.3.2 荧光变化值的测定 | 第49页 |
| 4.3.3 荧光显微镜和CLSM样品的制备 | 第49-50页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第50-54页 |
| 4.4.1 荧光强度检测实验 | 第50-53页 |
| 4.4.2 荧光显微镜和CLSM结果 | 第53-54页 |
| 4.5 本章小结 | 第54-56页 |
| 5. 结论与展望 | 第56-58页 |
| 5.1 结论 | 第56页 |
| 5.2 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-66页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
