致谢 | 第7-13页 |
图目录 | 第13-15页 |
摘要 | 第15-19页 |
Abstract | 第19-22页 |
第1章 文献综述 | 第23-50页 |
1.1 植物铝毒机制 | 第24-25页 |
1.1.1 植物铝毒的作用位点 | 第24页 |
1.1.2 铝胁迫对植物的毒害机制 | 第24-25页 |
1.2 植物耐铝机制 | 第25-27页 |
1.2.1 外部排斥机制 | 第25-26页 |
1.2.2 内部耐受机制 | 第26-27页 |
1.3 过氧化氢和一氧化氮在植物适应铝毒等逆境胁迫中的作用机理 | 第27-46页 |
1.3.1 过氧化氢(H_2O_2) | 第27-33页 |
1.3.1.1 H_2O_2的产生与清除 | 第28-29页 |
1.3.1.2 H_2O_2参与的生物学过程 | 第29-30页 |
1.3.1.3 H_2O_2信号对基因表达的调控 | 第30-31页 |
1.3.1.4 铝胁迫下植物体内H_2O_2的响应及作用 | 第31-33页 |
1.3.2 一氧化氮(NO) | 第33-41页 |
1.3.2.1 NO的合成途径 | 第33-35页 |
1.3.2.3 NO与植物逆境胁迫 | 第35-38页 |
1.3.2.4 铝胁迫下植物体内NO的变化及来源 | 第38-39页 |
1.3.2.5 NO在植物适应铝胁迫的作用机制 | 第39-41页 |
1.3.3 H_2O_2和NO在植物逆境响应中的相互作用 | 第41-46页 |
1.3.3.1 H_2O_2和NO在气孔运动中的相互作用 | 第41-43页 |
1.3.3.2 H_2O_2和NO在生物胁迫中的相互作用 | 第43页 |
1.3.3.3 H_2O_2和NO在非生物胁迫中的相互作用 | 第43-44页 |
1.3.3.4 H_2O_2和NO在调控基因表达中的相互作用 | 第44-45页 |
1.3.3.5 MAPK介导的H_2O_2和NO的信号转导 | 第45-46页 |
1.4 问题提出与技术路线 | 第46-50页 |
第2章 铝对不同小麦基因型根尖活性氧和活性氮代谢的影响 | 第50-65页 |
2.1 引言 | 第50-51页 |
2.2 材料与方法 | 第51-55页 |
2.2.1 植物材料与培养 | 第51页 |
2.2.2 相对根伸长 | 第51页 |
2.2.3 根系活力的测定 | 第51-52页 |
2.2.4 根尖铝含量的测定 | 第52页 |
2.2.5 ROS在小麦根系分布情况的显微观察 | 第52页 |
2.2.6 Schiff's reagent和Evans blue染色 | 第52-53页 |
2.2.7 NO和ONOO-含量的测定 | 第53页 |
2.2.8 根系NADPH氧化酶活性测定 | 第53-54页 |
2.2.9 抗坏血酸和谷胱甘肽含量的测定 | 第54页 |
2.2.10 植物体内酶活性的测定 | 第54-55页 |
2.2.11 基因表达分析 | 第55页 |
2.3 结果分析 | 第55-62页 |
2.3.1 铝胁迫对小麦根系伸长和根系活力的影响 | 第55-56页 |
2.3.2 铝胁迫对小麦根尖铝含量的影响 | 第56-57页 |
2.3.3 铝胁迫对小麦根尖O_2·~-和H_2O_2积累的影响 | 第57页 |
2.3.4 铝胁迫对小麦根尖Schiff's reagent和Evans blue吸收量的影响 | 第57-58页 |
2.3.5 铝胁迫对小麦根尖NADPH氧化酶的影响 | 第58-59页 |
2.3.6 铝胁迫对小麦尖抗氧化系统的影响 | 第59-60页 |
2.3.7 铝胁迫对小麦根尖NO含量的影响 | 第60-61页 |
2.3.8 铝胁迫对小麦根系ONOO~-含量的影响 | 第61页 |
2.3.9 铝胁迫对小麦根尖GSNOR活性的影响 | 第61-62页 |
2.4 讨论 | 第62-64页 |
本章小结 | 第64-65页 |
第3章 铝诱导小麦根系NO的早期猝发及其与耐铝性的关系 | 第65-82页 |
3.1 引言 | 第65-66页 |
3.2 材料与方法 | 第66-70页 |
3.2.1 植物材料与培养 | 第66页 |
3.2.2 相对根伸长 | 第66页 |
3.2.3 根系胼胝质的测定 | 第66-67页 |
3.2.4 根系NO含量的测定 | 第67页 |
3.2.5 根系ROS含量的测定 | 第67-68页 |
3.2.6 根系组织染色 | 第68页 |
3.2.7 根系H_2O_2的亚细胞定位 | 第68页 |
3.2.8 根系细胞膜完整性、MDA和蛋白质氧化的测定 | 第68-69页 |
3.2.9 硝酸还原酶(NR)和一氧化氮合酶(NOS)的测定 | 第69-70页 |
3.2.10 抗氧化酶活性的测定 | 第70页 |
3.3 结果分析 | 第70-78页 |
3.3.1 铝胁迫下根尖内源NO的猝发 | 第70-71页 |
3.3.2 NO供体对根系伸长和胼胝质积累的影响 | 第71-74页 |
3.3.3 NO供体对根系ROS积累和氧化损伤程度的影响 | 第74-76页 |
3.3.4 铝胁迫下小麦根尖NO的来源 | 第76-77页 |
3.3.5 NO对小麦根尖抗氧化酶活性的影响 | 第77-78页 |
3.4 讨论 | 第78-81页 |
本章小结 | 第81-82页 |
第4章 铝诱导产生的NO对小麦根尖AsA-GSH循环的影响及其与耐铝性的关系 | 第82-98页 |
4.1 引言 | 第82-83页 |
4.2 材料与方法 | 第83-87页 |
4.2.1 植物材料与培养 | 第83页 |
4.2.2 相对根伸长 | 第83页 |
4.2.3 组织染色和亚细胞定位 | 第83-84页 |
4.2.4 脯氨酸含量的测定 | 第84页 |
4.2.5 抗坏血酸和谷胱甘肽含量的测定 | 第84-85页 |
4.2.6 根系抗氧化能力的测定 | 第85页 |
4.2.7 根系酶活性的测定 | 第85-86页 |
4.2.8 总RNA提取和半定量RT-PCR | 第86-87页 |
4.3 结果分析 | 第87-95页 |
4.3.1 NO供体对根系伸长及内源NO的影响 | 第87-89页 |
4.3.2 NO供体对根系ROS和氧化损伤程度的影响 | 第89-90页 |
4.3.3 NO供体对根尖抗氧化能力的影响 | 第90-91页 |
4.3.4 NO供体对根尖脯氨酸含量的影响 | 第91-92页 |
4.3.5 NO供体对AsA和GSH含量的影响 | 第92-93页 |
4.3.6 NO供体对AsA-GSH循环酶活性和基因表达的影响 | 第93-94页 |
4.3.7 NO供体对GSH代谢酶活性和基因表达的影响 | 第94-95页 |
4.4 讨论 | 第95-97页 |
本章小结 | 第97-98页 |
第5章 铝诱导产生的NO对小麦根细胞壁特性的影响及其与根系伸长的关系 | 第98-111页 |
5.1 引言 | 第98-99页 |
5.2 材料与方法 | 第99-101页 |
5.2.1 植物材料与培养 | 第99页 |
5.2.2 相对根伸长和Evans blue染色 | 第99页 |
5.2.3 根系铝含量的测定 | 第99页 |
5.2.4 苏木精染色 | 第99-100页 |
5.2.5 NO含量的测定 | 第100页 |
5.2.6 根系有机酸的收集与测定 | 第100页 |
5.2.7 细胞壁组分分级提取 | 第100-101页 |
5.2.8 果胶甲基化程度的测定 | 第101页 |
5.2.9 免疫荧光测定 | 第101页 |
5.2.10 果胶甲酯酶的测定 | 第101页 |
5.3 结果分析 | 第101-108页 |
5.3.1 NO清除剂对小麦根系伸长和Evans blue吸收量的影响 | 第101-102页 |
5.3.2 NO清除剂对小麦根尖铝含量的影响 | 第102-103页 |
5.3.3 NO清除剂对小麦根系苹果酸分泌的影响 | 第103-104页 |
5.3.4 NO清除剂对小麦根尖细胞壁组分的影响 | 第104-106页 |
5.3.5 NO清除剂对小麦根尖果胶甲酯化程度的影响 | 第106-107页 |
5.3.6 NO清除剂对小麦根尖果胶甲酯酶活性的影响 | 第107-108页 |
5.4 讨论 | 第108-110页 |
本章小结 | 第110-111页 |
第6章 H_2O_2与NO互作在缓解小麦铝毒中的作用及其机制 | 第111-125页 |
6.1 引言 | 第111-112页 |
6.2 材料与方法 | 第112-114页 |
6.2.1 植物材料与培养 | 第112-113页 |
6.2.2 相对根伸长 | 第113页 |
6.2.3 NO含量的测定 | 第113页 |
6.2.4 根系Evans Blue吸收量和MDA含量的测定 | 第113页 |
6.2.5 根系H_2O_2的亚细胞定位 | 第113页 |
6.2.6 硝酸还原酶(NR)和一氧化氮合酶(NOS)的测定 | 第113页 |
6.2.7 抗氧化酶活性的测定 | 第113-114页 |
6.3 结果分析 | 第114-122页 |
6.3.1 不同浓度H_2O_2处理对铝胁迫下根系伸长的影响 | 第114页 |
6.3.2 H_2O_2处理对铝胁迫下氧化损伤的影响 | 第114-115页 |
6.3.3 铝胁迫下内源H_2O_2含量的变化 | 第115-117页 |
6.3.4 H_2O_2对根尖NO含量的影响 | 第117-118页 |
6.3.5 H_2O_2诱导产生的NO的来源 | 第118-119页 |
6.3.6 H_2O_2与NO在缓解根系伸长中的相互作用 | 第119-120页 |
6.3.7 H_2O_2与NO在缓解氧化损伤中的相互作用 | 第120-121页 |
6.3.8 H_2O_2与NO对根尖抗氧化酶活性的影响 | 第121-122页 |
6.4 讨论 | 第122-124页 |
本章小结 | 第124-125页 |
第7章 MAPK、H_2O_2和NO对铝胁迫下小麦根尖抗氧化系统的调控作用及其相互关系 | 第125-133页 |
7.1 引言 | 第125-126页 |
7.2 材料与方法 | 第126-127页 |
7.2.1 植物材料与培养 | 第126页 |
7.2.2 NO含量的测定 | 第126页 |
7.2.3 抗氧化酶活性的测定 | 第126-127页 |
7.3 结果分析 | 第127-131页 |
7.3.1 MAPK抑制剂对根尖抗氧化酶活性的影响 | 第127-128页 |
7.3.2 MAPK抑制剂对铝胁迫下H_2O_2诱导的根尖抗氧化酶活性的影响 | 第128页 |
7.3.3 MAPK抑制剂对铝胁迫下NO诱导的根尖抗氧化酶活性的影响 | 第128-129页 |
7.3.4 MAPK抑制剂对铝胁迫下H_2O_2诱导根尖NO产生的影响 | 第129-130页 |
7.3.5 MAPK抑制剂对铝胁迫下H_2O_2诱导的NR活性的影响 | 第130-131页 |
7.4 讨论 | 第131-132页 |
本章小结 | 第132-133页 |
第8章 全文总结 | 第133-136页 |
8.1 主要研究结论 | 第133-134页 |
8.2 主要创新点 | 第134-135页 |
8.3 研究展望 | 第135-136页 |
参考文献 | 第136-154页 |
攻读博士学位期间主要成果 | 第154页 |