摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-18页 |
1.1 功能性基因表达组件的研究 | 第8-12页 |
1.1.1 功能性基因表达组件的意义和应用 | 第8-9页 |
1.1.2 表达组件的性质 | 第9-10页 |
1.1.3 表达组件的构建 | 第10-12页 |
1.2 细菌多顺反子的结构与功能 | 第12-14页 |
1.2.1 多顺反子的结构和机理 | 第12-13页 |
1.2.2 双顺反子的应用 | 第13-14页 |
1.3 谷氨酸棒杆菌表达系统的研究进展 | 第14-16页 |
1.3.1 谷氨酸棒杆菌的应用 | 第14页 |
1.3.2 谷氨酸棒杆菌基因表达和调控 | 第14-16页 |
1.4 单链抗体的简介 | 第16页 |
1.5 课题研究内容 | 第16-18页 |
1.5.1 课题来源和意义 | 第16-17页 |
1.5.2 本课题的主要研究内容 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-28页 |
2.1 实验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂和溶液 | 第18-20页 |
2.1.3 主要设备仪器 | 第20页 |
2.1.4 培养基 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-28页 |
2.2.1 质粒的提取及转化 | 第20页 |
2.2.2 感受态的制备及转化 | 第20-21页 |
2.2.3 表达组件探测载体的构建 | 第21-23页 |
2.2.4 基因的筛选及启动子的识别 | 第23-24页 |
2.2.5 传统表达组件的构建 | 第24-25页 |
2.2.6 双顺反子表达组件的构建 | 第25页 |
2.2.7 egfp荧光强度的测定 | 第25-26页 |
2.2.8 egfp基因转录水平的测定 | 第26页 |
2.2.9 egfp相对翻译效率的计算 | 第26-27页 |
2.2.10 样品破碎方法 | 第27页 |
2.2.11 scFv纯化方法 | 第27页 |
2.2.12 Western blot鉴定人鼠嵌合单链抗体方法 | 第27-28页 |
第三章 结果与讨论 | 第28-40页 |
3.1 溶氧稳定启动子的应用和检测 | 第28-32页 |
3.1.1 表达组件探测载体的构建 | 第28-29页 |
3.1.2 溶氧稳定型启动子的识别和应用 | 第29-30页 |
3.1.3 溶氧稳定型表达组件活性的测定 | 第30-32页 |
3.2 高表达基因的挖掘及其表达组件在双顺反子结构中的应用 | 第32-36页 |
3.2.1 高表达水平基因的挖掘及其表达组件的构建 | 第32-33页 |
3.2.2 传统及双顺反子表达组件的表达效果分析 | 第33-36页 |
3.3 表达组件的应用 | 第36-40页 |
3.3.1 表达组件在大肠杆菌中的应用 | 第36-37页 |
3.3.2 表达组件控制scFv表达的应用 | 第37-40页 |
主要结论与展望 | 第40-42页 |
主要结论 | 第40页 |
展望 | 第40-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附录:实验所用引物 | 第47-51页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |