| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩写词表（Abbreviations） | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-22页 |
| 1 研究目的和意义 | 第14-15页 |
| 2 国内外研究现状 | 第15-20页 |
| 2.1 细胞自噬 | 第15-16页 |
| 2.1.1 细胞自噬的概念及其主要生理功能 | 第15-16页 |
| 2.1.2 细胞自噬的调控 | 第16页 |
| 2.2 谷氨酰胺及谷氨酰胺二肽对细胞自噬的调控作用 | 第16-17页 |
| 2.3 mTOR信号通路研究进展 | 第17-19页 |
| 2.3.1 mTOR信号通路与细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 2.3.2 mTOR信号通路与细胞生长和蛋白合成 | 第18页 |
| 2.3.3 mTOR信号通路与细胞自噬 | 第18-19页 |
| 2.4 p38MAPK信号通路研究进展 | 第19-20页 |
| 3 研究内容 | 第20-22页 |
| 3.1 Ala-Gln对仔猪小肠上皮细胞自噬的影响 | 第20页 |
| 3.2 Ala-Gln调节IPEC-1自噬的mTOR和p38MAPK信号通路研究 | 第20页 |
| 3.3 Ala-Gln对IPEC-1细胞mTOR信号通路下游信号分子及相关基因表达的影响 | 第20-21页 |
| 3.4 试验技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 试验研究 | 第22-56页 |
| 试验一 Ala-Gln对仔猪小肠上皮细胞IPEC-1 自噬的影响 | 第22-31页 |
| 前言 | 第22-23页 |
| 1 材料与方法 | 第23-25页 |
| 1.1 材料 | 第23-24页 |
| 1.1.1 试剂 | 第23页 |
| 1.1.2 仪器与设备 | 第23页 |
| 1.1.3 试验分组与设计 | 第23页 |
| 1.1.4 试验细胞 | 第23-24页 |
| 1.2 试验方法 | 第24-25页 |
| 1.2.1 IPEC-1 细胞培养 | 第24页 |
| 1.2.2 MTT试验中IPEC-1细胞接种数与OD值的关系确定及生长曲线的制定 | 第24页 |
| 1.2.3 MTT法检测不同浓度Ala-Gln对IPEC-1细胞活力的影响 | 第24页 |
| 1.2.4 Western blot检测LC3-Ⅱ、p62的蛋白表达量 | 第24-25页 |
| 1.3 统计分析 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-29页 |
| 2.1 IPEC-1细胞接种数与OD值关系及IPEC-1 细胞生长曲线 | 第25-27页 |
| 2.2 Ala-Gln对IPEC-1 细胞活力的影响 | 第27页 |
| 2.3 Ala-Gln对IPEC-1 细胞LC3-Ⅱ、p62蛋白表达量的影响 | 第27-29页 |
| 3 讨论 | 第29-30页 |
| 3.1 MMT试验中IPEC-1 细胞接种数与OD值关系及生长曲线 | 第29页 |
| 3.2 Ala-Gln对IPEC-1 细胞活力的影响 | 第29页 |
| 3.3 Ala-Gln对IPEC-1 细胞LC3-Ⅱ、p62蛋白表达量的影响 | 第29-30页 |
| 4 小结 | 第30-31页 |
| 试验二 Ala-Gln调节IPEC-1 细胞自噬的mTOR和p38MAPK信号通路研究 | 第31-45页 |
| 前言 | 第31-32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-34页 |
| 1.1 材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 1.1.2 主要仪器与设备 | 第32页 |
| 1.1.3 试验分组及设计 | 第32页 |
| 1.1.4 试验细胞 | 第32-33页 |
| 1.2 试验方法 | 第33页 |
| 1.2.1 IPEC-1 细胞培养 | 第33页 |
| 1.2.2 特异性抑制剂雷帕霉素和SB203580对IPEC-1细胞活力的影响 | 第33页 |
| 1.2.3 特异性抑制剂对mTOR、p38MAPK信号通路的影响 | 第33页 |
| 1.2.4 Ala-Gln调节IPEC-1 细胞自噬的mTOR信号通路对细胞自噬的的影响 | 第33页 |
| 1.2.5 Ala-Gln调节IPEC-1 细胞自噬的p38MAPK信号通路对细胞自噬的影响 | 第33页 |
| 1.3 数据统计处理 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-41页 |
| 2.1 雷帕霉素和SB203580信号通路对IPEC-1细胞活力的影响mTOR信号通路对IPEC-1细胞活力的影响见图2.1 | 第34-35页 |
| 2.2 Ala-Gln调节IPEC-1 自噬的mTOR信号通路对自噬的的影响 | 第35-38页 |
| 2.3 Ala-Gln调节IPEC-1 自噬的p38MAPK信号通路对自噬的影响 | 第38-41页 |
| 3 讨论 | 第41-44页 |
| 4 小结 | 第44-45页 |
| 试验三 Ala-Gln对IPEC-1 细胞mTOR信号通路下游信号分子及其相关基因表达的影响 | 第45-56页 |
| 前言 | 第45-46页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| 1.1 材料 | 第46页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第46页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第46页 |
| 1.2 试验方法 | 第46-49页 |
| 1.2.1 细胞培养及收集 | 第46页 |
| 1.2.2 Ala-Gln对mTOR信号通路相关蛋白的影响 | 第46页 |
| 1.2.3 细胞总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 1.2.4 引物设计和合成 | 第47页 |
| 1.2.5 cDNA合成操作步骤 | 第47页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR | 第47-49页 |
| 1.3 数据处理及统计分析 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-53页 |
| 2.1 Ala-Gln对mTOR信号通路相关蛋白的影响 | 第49-50页 |
| 2.2 Ala-Gln对mTOR信号通路中相关mRNA表达量的影响 | 第50-52页 |
| 2.3 Ala-Gln对p53、Bax的mRNA表达量的影响 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 4 小结 | 第55-56页 |
| 第三章 本研究总体结论、创新点及有待进一步研究的问题 | 第56-57页 |
| 1 全文结论 | 第56页 |
| 2 创新点 | 第56页 |
| 3 有待进一步研究的问题 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
