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日本脑炎病毒通过内质网IRE1/JNK信号通路诱导BHK-21细胞凋亡

摘要第5-6页
Abstrct第6-7页
英文缩略词表第8-9页
第一章 绪论第9-20页
    1.1 日本脑炎病毒第9-12页
        1.1.1 世界乙型脑炎流行情况第9页
        1.1.2 我国乙型脑炎流行情况第9页
        1.1.3 JEV传播途径第9页
        1.1.4 JEV的感染与发病第9-10页
        1.1.5 JEV基因组第10-11页
        1.1.6 JEV分型第11页
        1.1.7 JEV的生命周期第11-12页
    1.2 哺乳动物非折叠蛋白反应研究进展第12-18页
        1.2.1 折叠循环、质量控制、ER相关的降解(ERAD)第12-14页
        1.2.2 PERK通路第14-15页
        1.2.3 ATF6途径第15-16页
        1.2.4 IRE1通路第16-18页
    1.3 ER导致的自噬和凋亡第18-20页
第二章 JEV诱导内质网应激反应及细胞凋亡第20-33页
    2.1 前言第20页
    2.2 试验材料第20-22页
        2.2.1 细胞系材料第20页
        2.2.2 病毒株材料第20页
        2.2.3 试剂第20-22页
    2.3 试验方法第22-28页
        2.3.1 细胞培养和病毒扩增、滴度测定第22-23页
        2.3.2 病毒、药物处理细胞试验第23页
        2.3.3 RT-PCR第23-26页
        2.3.4 Western blot第26-28页
        2.3.5 细胞增殖与细胞毒检测(MTT法)第28页
    2.4 试验结果第28-31页
        2.4.1 乙脑病毒感染诱导GRP78,ATF4转录水平升高。第28-29页
        2.4.2 乙脑病毒感染诱导XBP1 mRNA拼接第29-30页
        2.4.3 乙脑病毒感染诱导GRP78, chop蛋白水平升高和ATF6剪切第30页
        2.4.4 乙脑病毒感染和内质网应激反应激活诱导BHK-21细胞病变和活力降低第30-31页
    2.5 讨论第31-33页
第三章 RNA-seq技术研究JEV引起的细胞内基因表达水平变化第33-48页
    3.1 前言第33页
    3.2 实验材料第33页
        3.2.1 细胞系材料第33页
        3.2.2 病毒株材料第33页
        3.2.3 试剂:第33页
    3.3 实验方法第33-36页
        3.3.1 细胞培养等第33页
        3.3.2 病毒、药物处理细胞试验第33页
        3.3.3 RNA提取第33-34页
        3.3.4 送样测序第34-36页
    3.4 实验结果第36-47页
        3.4.1 RNA样品质量满足建库测序要求第36-38页
        3.4.2 得到可靠测序数据第38页
        3.4.3 比对参考基因组第38-39页
        3.4.4 各组基因表达水平差异第39-40页
        3.4.5 差异基因表达分析第40-47页
    3.5 讨论第47-48页
第四章 JEV通过内质网IRE1/JNK信号通路诱导细胞凋亡第48-59页
    4.1 前言第48页
    4.2 实验材料第48-49页
        4.2.1 细胞系材料第48页
        4.2.2 病毒株材料第48页
        4.2.3 试剂第48-49页
    4.3 实验方法第49-54页
        4.3.1 细胞培养第49页
        4.3.2 细胞的处理第49页
        4.3.3 细胞增殖与细胞毒检测(MTT法)第49-50页
        4.3.4 细胞流式实验第50页
        4.3.5 western blot实验第50页
        4.3.6 磷酸化western blot实验第50-51页
        4.3.7 RT-PCR第51-53页
        4.3.8 TCID50第53页
        4.3.9 统计分析第53-54页
    4.4 实验结果第54-57页
        4.4.1 IRE1抑制剂、JNK激酶抑制剂处理接毒后的细胞能显著减少细胞凋亡的发生第54-55页
        4.4.2 IRE1抑制剂处理使接毒细胞内CHOP、caspsase 3 和磷酸化IRE1蛋白水平下降第55-56页
        4.4.3 药物处理对JEV复制没有影响第56-57页
    4.5 讨论第57-59页
在校期间完成的其他工作第59-60页
参考文献第60-67页
致谢第67-68页
在校期间论文发表情况第68页

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