摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第12-17页 |
第二章 人胃粘膜上皮细胞氧糖剥夺损伤模型的建立 | 第17-37页 |
2.1 材料与仪器 | 第17-18页 |
2.1.1 实验用细胞株 | 第17页 |
2.1.2 药品及试剂 | 第17页 |
2.1.3 实验仪器 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-27页 |
2.2.1 实验方案 | 第18-19页 |
2.2.2 细胞的复苏、传代及冻存 | 第19-20页 |
2.2.3 GES-1细胞氧糖剥夺模型的制作及实验分组 | 第20页 |
2.2.4 CCK-8法检测GES-1细胞活力 | 第20-21页 |
2.2.5 Hoechst染色法观察GES-1细胞的形态 | 第21-22页 |
2.2.6 Annexin V-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率 | 第22-23页 |
2.2.7 免疫印迹法检测细胞内Bcl-2,Bax蛋白的表达 | 第23-27页 |
2.2.8 统计分析 | 第27页 |
2.3 结果 | 第27-32页 |
2.3.1 氧糖剥夺对GES-1细胞株生长活力的影响 | 第27页 |
2.3.2 Hoechst染色法观察OGD对GES-1细胞株损伤的形态学改变 | 第27-28页 |
2.3.3 氧糖剥夺处理后GES-1细胞株流式凋亡检测 | 第28页 |
2.3.4 氧糖剥夺对GES-1细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响 | 第28-32页 |
2.4 讨论 | 第32-36页 |
2.4.1 关于GES-1细胞株的选用 | 第32页 |
2.4.2 关于GES-1细胞OGD模型制作方法的讨论 | 第32-34页 |
2.4.3 OGD处理对GES-1细胞损伤的影响 | 第34-35页 |
2.4.4 OGD处理致GES-1细胞损伤可能的作用机制 | 第35-36页 |
2.4.5 本研究的不足之处 | 第36页 |
2.5 结论 | 第36-37页 |
第三章 乌司他丁预处理对氧糖剥夺诱导的GES-1细胞损伤的影响 | 第37-55页 |
3.1 材料与仪器 | 第37-38页 |
3.1.1 实验用细胞株 | 第37页 |
3.1.2 主要药品及试剂 | 第37页 |
3.1.3 主要实验仪器 | 第37-38页 |
3.2 方法 | 第38-44页 |
3.2.1 细胞培养及实验分组 | 第38页 |
3.2.2 CCK-8检测细胞活力 | 第38-39页 |
3.2.3 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第39页 |
3.2.4 免疫印迹法检测Caspase-3和Cleaved Caspase-3的表达 | 第39-40页 |
3.2.5 实时荧光定量PCR分析 | 第40-44页 |
3.2.6 统计学分析 | 第44页 |
3.3 结果 | 第44-51页 |
3.3.1 CCK-8结果 | 第44-45页 |
3.3.2 UTI预处理对细胞凋亡率的影响 | 第45页 |
3.3.3 各组细胞Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白的表达情况 | 第45页 |
3.3.4 荧光定量PCR法检测TRPV1 mRNA的表达 | 第45-51页 |
3.4 讨论 | 第51-54页 |
3.4.1 关于药物UTI的选用 | 第51页 |
3.4.2 UTI预处理时浓度的选择 | 第51-52页 |
3.4.3 UTI预处理能减轻OGD造成的GES-1细胞损伤 | 第52页 |
3.4.4 UTI预处理减轻GES-1细胞株OGD损伤可能的作用机制 | 第52-54页 |
3.4.5 本实验的不足之处 | 第54页 |
3.5 结论 | 第54-55页 |
全文总结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录: 缩略语和中英文对照表 | 第62-63页 |
攻读学位期间的成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-66页 |