| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 奶牛乳腺炎的分类 | 第11-13页 |
| 1.1.1 临床型乳腺炎 | 第12页 |
| 1.1.2 亚临床型乳腺炎 | 第12页 |
| 1.1.3 慢性型乳腺炎 | 第12页 |
| 1.1.4 传染性乳腺炎 | 第12-13页 |
| 1.2 奶牛乳腺炎的诊断 | 第13-14页 |
| 1.2.1 病原微生物的检测 | 第13页 |
| 1.2.2 乳汁体细胞计数( Somatic Cell Counts,SCC)法 | 第13页 |
| 1.2.3 PCR快速诊断法 | 第13-14页 |
| 1.2.4 CMT法( California mastitis test) | 第14页 |
| 1.2.5 基因芯片检测法 | 第14页 |
| 1.3 金黄色葡萄球菌 | 第14-16页 |
| 1.3.1 金黄色葡萄球菌的生物学特征 | 第14页 |
| 1.3.2 金黄色葡萄球毒力因子 | 第14-16页 |
| 1.4 奶牛乳腺免疫防御机制 | 第16页 |
| 1.5 Fc受体(Neonatal Fc receptor,FcRn)研究进展 | 第16-17页 |
| 1.6 金黄色葡萄球菌疫苗的研究现状 | 第17-21页 |
| 1.6.1 全菌灭活苗 | 第17页 |
| 1.6.2 弱毒疫苗 | 第17-18页 |
| 1.6.3 亚单位疫苗 | 第18页 |
| 1.6.4 DNA疫苗 | 第18-19页 |
| 1.6.5 基因缺失疫苗 | 第19页 |
| 1.6.6 亚单位疫苗和核酸疫苗的结合使用 | 第19页 |
| 1.6.7 金黄色葡萄球菌疫苗的展望 | 第19-21页 |
| 2 抗原Fc-FnBPB-ClfA的制备及纯化 | 第21-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 pET32a-Fc-FnBPB-ClfA质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 培养基与主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 试验主要仪器 | 第21页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第21-22页 |
| 2.2 目的蛋白Fc-FnBPB-ClfA的制备 | 第22-27页 |
| 2.2.1 重组表达质粒pET32a-Fc-FnBPB-ClfA的转化 | 第22-23页 |
| 2.2.2 目的蛋白Fc-FnBPB-ClfA的表达 | 第23页 |
| 2.2.3 细菌裂解物的制备 | 第23页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE电泳 | 第23-24页 |
| 2.2.5 目的蛋白Fc-FnBPB-ClfA的纯化及浓缩 | 第24-27页 |
| 2.3 Fc-FnBPB-ClfA疫苗的制备 | 第27页 |
| 2.3.1 1%盐酸左旋咪唑佐剂 | 第27页 |
| 2.3.2 疫苗的制备 | 第27页 |
| 2.3.3 疫苗安全性试验 | 第27页 |
| 2.4 结果 | 第27-29页 |
| 2.4.1 Fc-FnBPB-ClfA重组蛋白的表达 | 第27页 |
| 2.4.2 Fc-FnBPB-ClfA蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| 2.4.3 目的蛋白的浓缩及浓度测定 | 第28页 |
| 2.4.4 安全性评价 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 3 Fc-FnBPB-ClfA疫苗的免疫效果 | 第30-47页 |
| 3.1 试验材料 | 第30-32页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第30页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 3.1.3 免疫动物、免疫程序及分组情况 | 第30页 |
| 3.1.4 奶牛乳汁中细菌的分离鉴定及初乳乳清的制备 | 第30-31页 |
| 3.1.5 奶牛隐性乳腺炎的监测 | 第31页 |
| 3.1.6 免疫血清和乳清特异性抗体动态监测 | 第31-32页 |
| 3.1.7 Western Blot检测 | 第32页 |
| 3.2 结果 | 第32-47页 |
| 3.2.1 奶牛乳汁中细菌的分离鉴定结果 | 第32-34页 |
| 3.2.2 奶牛隐性乳房炎的监测结果 | 第34-36页 |
| 3.2.3 血清及乳清抗体效价检测结果 | 第36-45页 |
| 3.2.4 Western blot的结果分析 | 第45-47页 |
| 4 总体讨论 | 第47-49页 |
| 4.1 抗体效价的分析 | 第47-48页 |
| 4.2 奶样中细菌分离结果及CMT检测结果分析 | 第48-49页 |
| 5 总体结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
