| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语表 | 第14-15页 |
| 1 引言 | 第15-29页 |
| 1.1 病原学 | 第15-16页 |
| 1.2 流行情况 | 第16页 |
| 1.3 临床症状 | 第16-17页 |
| 1.4 感染机制研究 | 第17页 |
| 1.5 毒力因子研究 | 第17-18页 |
| 1.6 布鲁氏菌与宿主的相互作用 | 第18-19页 |
| 1.6.1 双组分调控系统 | 第18页 |
| 1.6.2 Ⅳ型分泌系统 | 第18-19页 |
| 1.6.3 蛋白折叠机制 | 第19页 |
| 1.6.4 激活宿主磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)通路 | 第19页 |
| 1.6.5 激活中性粒细胞(PMNs) | 第19页 |
| 1.7 实验室常用的诊断方法 | 第19-22页 |
| 1.7.1 细菌学诊断 | 第19-20页 |
| 1.7.2 血清学诊断 | 第20-21页 |
| 1.7.3 分子生物学法 | 第21-22页 |
| 1.8 疫苗 | 第22-25页 |
| 1.8.1 布鲁氏杆菌病现有疫苗 | 第23页 |
| 1.8.2 亚单位疫苗 | 第23-25页 |
| 1.9 防控 | 第25-26页 |
| 1.10 治疗 | 第26页 |
| 1.11 基因组学研究 | 第26-27页 |
| 1.12 鉴别诊断研究情况 | 第27页 |
| 1.13 选题目的和意义 | 第27-29页 |
| 2 研究一 布鲁氏菌疫苗株S2全基因组测序及基因功能分析 | 第29-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.1 菌株 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 2.1.3 功能注释和相关分析软件及数据库 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 布鲁氏菌S2疫苗株基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.2 布鲁氏菌S2全基因组测序、基因预测及功能注释 | 第29-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-41页 |
| 2.3.1 S2疫苗株基因DNA的提取 | 第32页 |
| 2.3.2 布鲁氏菌S2疫苗株基因组注释、基因预测及功能注释 | 第32-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 3 研究二 S2疫苗基因GL_0002181、GL_0002189及BP26基因克隆、原核表达 | 第43-76页 |
| 3.1 实验材料 | 第43-46页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第43-44页 |
| 3.1.2 主要酶和试剂 | 第44页 |
| 3.1.3 主要仪器与设备 | 第44-45页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第45-46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-52页 |
| 3.2.1 GL_0002181、GL_0002189生物信息学分析 | 第46页 |
| 3.2.2 GL_0002181、GL_0002189和BP26原核表达及免疫印迹 | 第46-52页 |
| 3.3 试验结果 | 第52-73页 |
| 3.3.1 GL_0002181、GL_0002189生物信息学分析 | 第52-57页 |
| 3.3.2 GL_0002181、GL_0002189和BP26原核表达及免疫印迹 | 第57-73页 |
| 3.4 讨论 | 第73-74页 |
| 3.5 小结 | 第74-76页 |
| 4 研究三布鲁氏菌IELISA鉴别诊断方法的建立 | 第76-96页 |
| 4.1 实验材料 | 第76-77页 |
| 4.1.1 实验血清 | 第76页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第76页 |
| 4.1.3 实验试剂及配方 | 第76-77页 |
| 4.2 实验方法 | 第77-81页 |
| 4.2.1 血清检测及鉴定 | 第77-79页 |
| 4.2.2 iELISA检测方法的建立 | 第79-81页 |
| 4.3 实验结果 | 第81-94页 |
| 4.3.1 标准阳性血清验证 | 第81-82页 |
| 4.3.2 标准阴性血清验证 | 第82-83页 |
| 4.3.3 自然感染血清验证 | 第83-84页 |
| 4.3.4 S2免疫血清 | 第84-85页 |
| 4.3.5 最佳包被浓度和血清稀释度的确定 | 第85-87页 |
| 4.3.6 二抗最佳稀释度的确定 | 第87-88页 |
| 4.3.7 重复性实验 | 第88-89页 |
| 4.3.8 判定点的确定 | 第89-92页 |
| 4.3.9 特异性和敏感性实验 | 第92-93页 |
| 4.3.10 田间血清检测 | 第93-94页 |
| 4.4 讨论 | 第94-95页 |
| 4.5 小结 | 第95-96页 |
| 5 总体讨论 | 第96-98页 |
| 6 结论 | 第98-99页 |
| 7 创新点 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-112页 |
| 作者简介 | 第112页 |
