| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·生物膜 | 第10-14页 |
| ·生物膜EPS 研究进展 | 第11-12页 |
| ·生物膜中细菌标记技术比较 | 第12-14页 |
| ·转座 | 第14-17页 |
| ·转座现象简介 | 第14页 |
| ·转座子种类及转座机制 | 第14-17页 |
| ·转座作用的遗传效应 | 第17页 |
| ·好氧同时硝化-反硝化菌的研究现状 | 第17-19页 |
| ·研究背景及意义 | 第19页 |
| ·研究内容及创新点 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-25页 |
| 第二章 Pseudomonas stutzeri LYS-86 反硝化基因的克隆 | 第25-46页 |
| 前言 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·菌种和质粒: 本实验用到的菌株和质粒见表4-1。 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·生物化学试剂，酶及试剂盒 | 第27页 |
| ·抗生素 | 第27页 |
| ·PCR 引物 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-31页 |
| ·基因组DNA 分离提取 | 第27-28页 |
| ·试剂盒快速小量提取质粒DNA | 第28-29页 |
| ·凝胶回收纯化DNA | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第30页 |
| ·连接反应 | 第30页 |
| ·PCR 扩增 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-43页 |
| ·narG 基因部分基因片段的克隆 | 第31-34页 |
| ·nir S 基因的克隆 | 第34-37页 |
| ·nor C 基因的克隆 | 第37-39页 |
| ·nos Z 基因的克隆 | 第39-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 第三章 自杀性转座载体pUT/mini-Tn5-km2-Pnir-gfp的构建 | 第46-64页 |
| 前言 | 第46-47页 |
| ·材料 | 第47-49页 |
| ·菌种与质粒 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47-48页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·实验仪器 | 第48-49页 |
| ·引物 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-54页 |
| ·引物设计与合成 | 第49页 |
| ·基因组DNA 分离提取 | 第49-50页 |
| ·试剂盒快速小量提取质粒DNA | 第50-51页 |
| ·凝胶回收纯化DNA | 第51页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第51-52页 |
| ·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第52页 |
| ·酶切反应 | 第52页 |
| ·去磷酸化处理 | 第52页 |
| ·连接反应 | 第52-53页 |
| ·PCR 扩增 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-62页 |
| ·自杀性转座载体pUT/mini-Tn5-km2-Pnir-gfp 的构建流程 | 第54-57页 |
| ·亚硝酸盐还原酶nir 启动子Pnir 的获得 | 第57-58页 |
| ·重组质粒pEGFP-Pnir 的获得 | 第58-60页 |
| ·pUT/mini-Tn5-km2-Pnir-gfp 的获得 | 第60-62页 |
| ·小结 | 第62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第四章 荧光标记菌P. stutzeri LYS-Pnir-gfp性能研究 | 第64-78页 |
| 前言 | 第64页 |
| ·材料 | 第64-68页 |
| ·菌种和质粒 | 第64-65页 |
| ·培养基 | 第65页 |
| ·实验试剂与器材 | 第65-66页 |
| ·主要试剂 | 第66-67页 |
| ·主要仪器设备 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-70页 |
| ·荧光标记菌P. stutzeri LYS-Pnir-gfp 的获得 | 第68-69页 |
| ·P. stutzeri LYS-Pnir-gfp 性能研究 | 第69-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-77页 |
| ·P. stutzeri LYS-Pnir-gfp 的获得 | 第70-71页 |
| ·P. stutzeri LYS-Pnir-gfp 基因组PCR 扩增鉴定 | 第71-72页 |
| ·P. stutzeri LYS-Pnir-gfp 的荧光稳定性研究 | 第72-73页 |
| ·P. stutzeri LYS-Pnir-gfp 的功能研究 | 第73-77页 |
| ·小结 | 第77页 |
| 参考文献 | 第77-78页 |
| 第五章 研究总结与展望 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 研究生阶段发表论文情况 | 第80页 |
