摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
主要试剂配方和所用仪器 | 第11-14页 |
前言 | 第14-15页 |
第一篇 文献综述 | 第15-23页 |
第一章 镰形扇头蜱及Rhipilin-1基因概述 | 第15-17页 |
1 镰形扇头蜱概述 | 第15页 |
2 镰形扇头蜱Rhipilin-1基因概述 | 第15-17页 |
第二章 蜱RNA干扰研究进展 | 第17-23页 |
1 蜱RNA干扰机制 | 第17页 |
2 蜱RNA干扰的不同方法与应用进展 | 第17-21页 |
2.1 显微注射法 | 第18页 |
2.2 浸泡法 | 第18-19页 |
2.3 饲喂法 | 第19-20页 |
2.4 病毒转染法 | 第20页 |
2.5 电转染法 | 第20-21页 |
3 展望 | 第21-23页 |
第二篇 试验研究 | 第23-51页 |
第三章 目的基因Rhipilin-1与对照基因Luciferase dsRNA的体外合成 | 第23-29页 |
1 材料 | 第23页 |
2 方法 | 第23-27页 |
2.1 引物设计 | 第23-24页 |
2.2 PCR扩增 | 第24-25页 |
2.3 PCR产物胶回收 | 第25-26页 |
2.4 dsRNA的合成 | 第26页 |
2.5 dsRNA的纯化 | 第26-27页 |
3 结果 | 第27-28页 |
3.1 合成的dsRNA浓度纯度测定 | 第27页 |
3.2 dsRNA电泳结果 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-29页 |
第四章 镰形扇头蜱Rhipilin-1基因RNA干扰浸泡条件筛选 | 第29-45页 |
1 材料 | 第29页 |
2 方法 | 第29-35页 |
2.1 镰形扇头蜱的准备 | 第29页 |
2.2 脂质剂筛选实验 | 第29-30页 |
2.3 浸泡时间筛选实验 | 第30-31页 |
2.4 浸泡比例筛选实验 | 第31-32页 |
2.5 鼠体模型设计与接蜱及半饱血蜱的采集 | 第32页 |
2.6 RNA提取 | 第32-33页 |
2.7 Real-time PCR | 第33-34页 |
2.8 荧光标记dsRNA浸泡实验 | 第34-35页 |
3 结果 | 第35-42页 |
3.1 脂质剂选取 | 第35-37页 |
3.2 浸泡时间选取 | 第37-38页 |
3.3 浸泡比例选取 | 第38-40页 |
3.4 荧光标记dsRNA浸泡实验 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
第五章 Rhipilin-1dsRNA对镰形扇头蜱抑制和杀灭效果 | 第45-51页 |
1 材料 | 第45页 |
2 方法 | 第45-47页 |
2.1 镰形扇头蜱的准备与浸泡处理 | 第45-46页 |
2.2 兔耳模型制作与镰形扇头蜱接种 | 第46页 |
2.3 镰形扇头蜱的观察与收集 | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-48页 |
3.1 镰形扇头蜱幼蜱动物实验结果 | 第47页 |
3.2 镰形扇头蜱若蜱动物实验结果 | 第47-48页 |
3.3 镰形扇头蜱成蜱动物实验结果 | 第48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
全文总结 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59页 |