| 中文摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第15-23页 |
| ·沙门氏菌 | 第15-17页 |
| ·鼠伤寒沙门氏菌 | 第17页 |
| ·鼠伤寒沙门氏菌引起宿主的免疫反应 | 第17-19页 |
| ·鼠伤寒沙门氏菌的毒力因子 | 第19-22页 |
| ·外膜蛋白 | 第19页 |
| ·沙门氏菌鞭毛 | 第19-20页 |
| ·脂多糖 | 第20页 |
| ·毒力岛及III型分泌系统（T3SS） | 第20-21页 |
| ·肠毒素 | 第21-22页 |
| ·EF-Tu蛋白的相关研究 | 第22-23页 |
| ·研究目的与意义 | 第23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-52页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验动物、载体和菌株 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-52页 |
| ·构建EF-Tu蛋白原核表达质粒 | 第25-32页 |
| ·重组蛋白GST-EF-Tu / His-EF-Tu的原核表达及纯化 | 第32-36页 |
| ·EF-Tu单克隆抗体的制备 | 第36-38页 |
| ·EF-Tu在鼠伤寒沙门氏菌的表面定位 | 第38-39页 |
| ·筛选与EF-Tu相互作用的THP-1 细胞蛋白 | 第39-40页 |
| ·质谱分析 | 第40-41页 |
| ·相互作用蛋白的验证 | 第41-46页 |
| ·相互作用蛋白在细胞内共定位 | 第46-50页 |
| ·检测基因的表达情况 | 第50-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-74页 |
| ·EF-Tu重组蛋白的原核表达 | 第52-57页 |
| ·构建原核表达质粒pGEX-6p1tufA / pET30a-tufA | 第52-55页 |
| ·GST-EF-Tu / His-EF-Tu重组蛋白的原核表达 | 第55-57页 |
| ·EF-Tu单克隆抗体的制备 | 第57-58页 |
| ·EF-Tu MAbs的筛选 | 第57页 |
| ·MAbs效价及亚型测定 | 第57页 |
| ·Western-blot分析 | 第57-58页 |
| ·鼠伤寒沙门氏菌EF-Tu的表面定位 | 第58-61页 |
| ·EF-Tu的IFA检测 | 第58-59页 |
| ·EF-Tu的流式细胞仪检测 | 第59-60页 |
| ·血清补体试验测定EF-Tu存在细菌表面 | 第60-61页 |
| ·EF-Tu与THP-1 细胞蛋白相互作用的筛选 | 第61-63页 |
| ·实验产物的 12% SDS-PAGE分析 | 第61-62页 |
| ·差异蛋白的质谱测序 | 第62-63页 |
| ·相互作用蛋白的验证 | 第63-69页 |
| ·构建原核表达质粒pET30a-eEF1α1 / pET28a-pkM2 | 第63-66页 |
| ·His-eEF1α1 / His-pkM2重组蛋白的原核表达 | 第66-67页 |
| ·Western-blot分析 | 第67-69页 |
| ·相互作用蛋白在细胞内共定位 | 第69-72页 |
| ·构建EF-Tu真核表达质粒 | 第69-70页 |
| ·重组质粒在细胞内的表达 | 第70-71页 |
| ·蛋白在细胞内的共定位 | 第71-72页 |
| ·检测基因的表达情况 | 第72-74页 |
| ·提取不同侵染时间的细胞RNA | 第72-73页 |
| ·检测eEF1α1 / pkM2表达的变化 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-83页 |
| 5 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-99页 |
| 附录 | 第99-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第106页 |
