| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-18页 |
| ·甜菜M14品系的来源及研究进展 | 第9-10页 |
| ·甜菜M14品系来源 | 第9页 |
| ·甜菜M14品系研究进展 | 第9-10页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂 | 第10-13页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶抑制剂简介 | 第10页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂分类及结构 | 第10-11页 |
| ·植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂功能研究 | 第11-13页 |
| ·cDNA末端快速扩增技术 | 第13-14页 |
| ·经典RACE技术 | 第13页 |
| ·SMART RACE技术 | 第13-14页 |
| ·农杆菌介导的植物遗传转化 | 第14-15页 |
| ·原核表达体系及蛋白纯化 | 第15页 |
| ·本实验研究目的及意义 | 第15-17页 |
| ·本实验技术路线 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-35页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第18页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第18页 |
| ·实验所需常用溶液、试剂及培养基的配制 | 第18页 |
| ·实验所需引物 | 第18-20页 |
| ·实验方法 | 第20-35页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因全长的获得 | 第20-24页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因组织表达分析 | 第24页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin蛋白的表达纯化及性质研究 | 第24-29页 |
| ·BvM14-Cystatin基因在拟南芥中过量表达及功能鉴定 | 第29-35页 |
| 第3章 结果与分析 | 第35-56页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因全长的克隆 | 第35-37页 |
| ·甜菜M14品系总RNA的提取 | 第35页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因3'末端的获得 | 第35-36页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因5'末端的获得 | 第36页 |
| ·BvM14-Cystatin基因全长的RT-PCR验证 | 第36-37页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因的生物信息学分析 | 第37-40页 |
| ·BvM14-Cystatin基因全长的序列分析 | 第37-38页 |
| ·BvM14-Cystatin蛋白多重序列比对 | 第38-39页 |
| ·BvM14-Cystatin蛋白的系统发育分析 | 第39-40页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因组织表达分析 | 第40-41页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin蛋白抑制活性研究 | 第41-45页 |
| ·原核表达载体pET28a-BvM14-Cystatin的构建 | 第41-43页 |
| ·BvM14-Cystatin蛋白的原核诱导表达 | 第43页 |
| ·BvM14-Cystatin蛋白纯化洗脱浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·BvM14-Cystatin蛋白抑制活力鉴定 | 第44-45页 |
| ·BvM14-Cystatin基因在拟南芥中过量表达及功能鉴定 | 第45-56页 |
| ·植物表达载体pBI121-BvM14-Cystatin的构建 | 第45-47页 |
| ·植物表达载体pBI121-BvM14-Cystatin转化农杆菌 | 第47-48页 |
| ·利用花序侵染法获得T_0代阳性转基因植株 | 第48-49页 |
| ·获得T_2代纯合转基因株系 | 第49页 |
| ·T_2代纯合转基因株系的分子检测 | 第49-50页 |
| ·T_2代纯合转基因株系的耐盐性鉴定 | 第50-53页 |
| ·T_2代纯合转基因株系的耐旱性鉴定 | 第53-56页 |
| 第4章 讨论 | 第56-58页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因5'末端的克隆 | 第56页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin基因组织表达分析 | 第56页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin蛋白诱导表达及纯化 | 第56-57页 |
| ·甜菜M14品系BvM14-Cystatin提高转基因植株耐盐和耐旱性 | 第57-58页 |
| 第5章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位论文期间发表的学术论文 | 第67-69页 |
