| 摘要 | 第1-6页 |
| abstract | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·TNFα 的研究进展 | 第12-13页 |
| ·TNFα 的发现与命名 | 第12页 |
| ·TNFα 的基因与蛋白结构 | 第12-13页 |
| ·TNFα 与相关临床疾病 | 第13页 |
| ·TNFα 在类风湿关节炎中作用的研究进展 | 第13-18页 |
| ·类风湿关节炎 | 第13-14页 |
| ·TNFα 在RA中的作用原理 | 第14页 |
| ·TNFα 的疫苗的研究进展 | 第14-15页 |
| ·Kinoid免疫原与免疫原的制备 | 第15-16页 |
| ·Kinoid的抗原性和免疫原性 | 第16页 |
| ·Kinoid的药效学与药物代谢动力学 | 第16-17页 |
| ·Kinoid的安全控制 | 第17-18页 |
| ·载体蛋白的研究进展 | 第18-20页 |
| ·白喉毒素DT | 第18-19页 |
| ·霍乱毒素B亚基CTB | 第19页 |
| ·结核分枝杆菌蛋白 | 第19-20页 |
| ·课题研究思路及技术路线 | 第20-22页 |
| ·课题研究的目的及思路 | 第20-21页 |
| ·课题研究的技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 重组质粒CTB-hTNFα~(mut)和hTNFα~(mut)-CTB的构建 | 第22-36页 |
| ·本章介绍 | 第22页 |
| ·实验材料与仪器 | 第22-25页 |
| ·实验试剂 | 第22页 |
| ·试剂配制 | 第22-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·融合蛋白的设计方案 | 第25-26页 |
| ·引物设计与合成 | 第26页 |
| ·目的基因TNFα 的扩增 | 第26-28页 |
| ·pCTB2质粒的单酶切与pCTB2质粒的双酶切 | 第28-29页 |
| ·hTNFα~(mut)-CTB与CTB-hTNFα~(mut)的构建 | 第29-33页 |
| ·实验结果 | 第33-35页 |
| ·重组蛋白表达载体设计 | 第33页 |
| ·重组质粒TNF-hTNFα~(mut)与CTB-hTNFα~(mut)的构建 | 第33-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 融合蛋白及载体蛋白的纯化 | 第36-60页 |
| ·本章介绍 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36-41页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·溶液的配制 | 第37-41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-54页 |
| ·hTNFα~(mut)的纯化 | 第41-46页 |
| ·CTB的纯化 | 第46-49页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第49-50页 |
| ·DTT的纯化 | 第50-52页 |
| ·结核分枝杆菌Rv2991和Rv3607的蛋白纯化 | 第52-54页 |
| ·实验结果 | 第54-58页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第54-58页 |
| ·目标蛋白定量 | 第58页 |
| ·本章小结 | 第58-60页 |
| 第四章 hTNFα~(mut)与不同载体蛋白化学偶联 | 第60-70页 |
| ·本章介绍 | 第60页 |
| ·实验材料 | 第60-63页 |
| ·药品与试剂 | 第60页 |
| ·试剂配制 | 第60-62页 |
| ·实验仪器 | 第62-63页 |
| ·实验步骤与方法 | 第63-64页 |
| ·戊二醛法化学偶联原理 | 第63页 |
| ·hTNFα~(mut)与Rv2991进行二步化学偶联法 | 第63-64页 |
| ·hTNFα~(mut)与不同载体蛋白进行一步化学交联法 | 第64页 |
| ·实验结果 | 第64-68页 |
| ·hTNFα~(mut)与Rv2991的二步化学偶联 | 第64-65页 |
| ·hTNFα~(mut)与不同载体蛋白的一步化学交联 | 第65-68页 |
| ·本章小结 | 第68-70页 |
| 第五章 动物免疫及效价测定 | 第70-79页 |
| ·本章介绍 | 第70页 |
| ·实验材料与仪器 | 第70-72页 |
| ·实验试剂 | 第70-71页 |
| ·试剂配制 | 第71-72页 |
| ·主要的实验仪器 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-75页 |
| ·小鼠免疫 | 第72-73页 |
| ·动物的采血及样品的处理 | 第73页 |
| ·ELISA法检测抗体的产生 | 第73-74页 |
| ·ELISA法测定血清的效价 | 第74-75页 |
| ·实验结果 | 第75-77页 |
| ·ELISA检测抗体产生 | 第75-76页 |
| ·ELISA检测抗体效价 | 第76-77页 |
| ·本章小结 | 第77-79页 |
| 全文总结 | 第79-81页 |
| 研究展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 在校期间科研成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
