| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1. 硬骨鱼类下丘脑-垂体-性腺轴（HPG）调控研究 | 第12-14页 |
| 2. 孕酮受体膜组分的研究进展 | 第14-22页 |
| ·孕酮受体膜组分的研究历程 | 第14-16页 |
| ·孕酮受体膜组分 1 | 第14-16页 |
| ·孕酮受体膜组分 2 | 第16页 |
| ·孕酮受体膜元件1的生物结构和生理学功能 | 第16-22页 |
| ·PGRMC1结构特征 | 第16-17页 |
| ·PGRMC1的生理学功能 | 第17-22页 |
| 3. 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 半滑舌鳎PGRMC1基因的克隆及组织和周期表达特征 | 第24-42页 |
| 1. 材料 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·相关试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2. 实验方法 | 第26-31页 |
| ·卵巢发育时期的确定 | 第26页 |
| ·总RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·半滑舌鳎PGRMC1基因保守序列的克隆 | 第27-28页 |
| ·cDNA合成 | 第27-28页 |
| ·PGRMC1 cDNA保守序列的克隆 | 第28页 |
| ·PGRMC1基因cDNA全长克隆 | 第28-29页 |
| ·PGRMC1的 5’-RACE cDNA和 3’-RACE cDNA合成 | 第28页 |
| ·PGRMC1的 5’-RACE和 3’-RACE | 第28-29页 |
| ·序列分析 | 第29页 |
| ·PGRMC1基因mRNA在性成熟雌鱼的组织表达特征 | 第29-31页 |
| ·PGRMC1引物设计 | 第29-30页 |
| ·PGRMC1 cDNA第一链合成 | 第30页 |
| ·PGRMC1标准曲线的制作 | 第30页 |
| ·PGRMC1 mRNA在性成熟雌鱼的组织表达特征 | 第30页 |
| ·数据处理 | 第30-31页 |
| ·半滑舌鳎PGRMC1 mRNA在繁殖周期脑、垂体、卵巢中的表达 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·半滑舌鳎繁殖周期卵巢组织学分析 | 第31-32页 |
| ·PGRMC1序列分析 | 第32-34页 |
| ·PGRMC1系统进化分析 | 第34页 |
| ·PGRMC1氨基酸序列比对及同源性分析 | 第34-36页 |
| ·PGRMC1基因mRNA在性成熟雌鱼的组织表达特征 | 第36页 |
| ·PGRMC1基因mRNA在繁殖周期脑、垂体、卵巢中的表达 | 第36-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-42页 |
| ·半滑舌鳎PGRMC1基因的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| ·半滑舌鳎PGRMC1时空表达与生理功能分析 | 第39-42页 |
| 第三章 半滑舌鳎PGRMC1的组织定位和分布 | 第42-64页 |
| 1. 材料 | 第43-48页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·试剂及耗材 | 第43-48页 |
| ·组织切片实验主要试剂 | 第44页 |
| ·原位试剂及其配制方法 | 第44-47页 |
| ·Western-blotting试剂 | 第47-48页 |
| ·免疫组化相关试剂 | 第48页 |
| 2. 实验方法 | 第48-52页 |
| ·H.E染色石蜡切片 | 第48页 |
| ·PGRMC1／PBST-18质粒的构建 | 第48-49页 |
| ·地高辛标记PGRMC1正、反义RNA探针的合成和纯化 | 第49页 |
| ·切片原位杂交分析 | 第49-50页 |
| ·PGRMC1多克隆抗体制备及组织蛋白表达 | 第50-51页 |
| ·免疫组化 | 第51-52页 |
| ·统计分析 | 第52页 |
| 3. 结果 | 第52-61页 |
| ·PGRMC1蛋白在组织的表达 | 第52-53页 |
| ·PGRMC1蛋白的细胞学定位 | 第53-57页 |
| ·PGRMC1基因的细胞学定位 | 第57-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-64页 |
| ·PGRMC1组织的表达与定位分析 | 第61-62页 |
| ·PGRMC1生理学作用分析 | 第62-64页 |
| 第四章 卵母细胞PGRMC1的表达特征和敲降分析 | 第64-76页 |
| 1. 实验材料与方法 | 第64-67页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·仪器和药品 | 第65页 |
| ·注射物的准备 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-67页 |
| ·细胞培养 | 第65-66页 |
| ·卵母细胞的显微注射 | 第66页 |
| ·PGRMC1的实时荧光定量PCR检测 | 第66页 |
| ·PGRMC1的Western-blotting分析 | 第66-67页 |
| ·数据统计分析 | 第67页 |
| 2. 结果 | 第67-73页 |
| ·PGRMC1在不同时相卵母细胞中的表达 | 第67-71页 |
| ·卵母细胞成熟过程中PGRMC1时序表达 | 第67-68页 |
| ·促性腺激素调控不同时相卵母细胞PGRMC1的表达 | 第68-71页 |
| ·孕激素诱导卵母细胞成熟 | 第71页 |
| ·卵母细胞PGRMC1显微注射分析 | 第71-72页 |
| ·基因敲降后卵母细胞PGRMC1的表达分析 | 第72-73页 |
| 3. 讨论 | 第73-76页 |
| ·卵母细胞成熟过程PGRMC1的表达分析 | 第73-74页 |
| ·PGRMC1敲降对卵母细胞成熟的影响 | 第74-75页 |
| ·PGRMC1参与卵母细胞成熟的重要基因 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-88页 |
| 攻读硕士学位期间撰写的学术论文 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-94页 |
