| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| ·乙烯生物合成与果实成熟的关系 | 第10-11页 |
| ·转录因子研究进展 | 第11-16页 |
| ·转录因子 | 第11-13页 |
| ·HD-Zip型转录因子 | 第13-16页 |
| ·酵母双杂交 | 第16-18页 |
| ·酵母双杂交原理 | 第16-17页 |
| ·用酵母双杂技术在苹果中鉴定到的互作蛋白 | 第17-18页 |
| ·研究意义和目的 | 第18-19页 |
| 第二章 构建嘎啦苹果果实酵母双杂交cDNA文库 | 第19-26页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·RNA的提取 | 第20页 |
| ·cDNA的合成与纯化 | 第20页 |
| ·嘎啦苹果cDNA双链的扩增 | 第20-21页 |
| ·纯化嘎啦苹果dscDNA | 第21页 |
| ·酵母株Y187感受态制备 | 第21-22页 |
| ·纯化的ds cDNA与p GADT7-Rec载体与共转化Y187酵母感受态 | 第22页 |
| ·文库滴度测定和质量检测 | 第22-23页 |
| ·结果分析 | 第23-24页 |
| ·文库构建 | 第23-24页 |
| ·文库质量评价 | 第24页 |
| ·讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 诱饵载体的构建及其自激活和毒性检测 | 第26-34页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-31页 |
| ·MdHB-1 基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·诱饵载体pGBKT7-MdHB1、pGBKT7-MdHB1-ΔCS1的构建 | 第29-30页 |
| ·制备酵母菌株Y2HGold感受态细胞 | 第30页 |
| ·转化诱饵载体到Y2HGold菌株 | 第30-31页 |
| ·诱饵载体的自激活检测 | 第31页 |
| ·诱饵载体的毒性检测 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-33页 |
| ·重组质粒的构建 | 第31页 |
| ·诱饵载体pGBKT7-MdHB1、pGBKT7-MdHB1ΔCS1的构建 | 第31-32页 |
| ·诱饵表达载体的自激活和毒性检测 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| 第四章 酵母双杂交筛选与MdHB1的互作蛋白 | 第34-45页 |
| ·材料与方法 | 第34-39页 |
| ·菌株 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·pGBKT7-MdHB1诱饵筛选酵母双杂交cDNA文库 | 第35-37页 |
| ·PCR鉴定蓝斑克隆中插入cDNA的片段 | 第37页 |
| ·提取经PCR检测过的阳性蓝斑克隆质粒 | 第37-38页 |
| ·回复杂交验证 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-41页 |
| ·阳性克隆子筛选 | 第39-40页 |
| ·互作蛋白的生物信息学分析 | 第40-41页 |
| ·互作蛋白的回复杂交验证 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-45页 |
| 第五章 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 附录 | 第54-58页 |
| 缩略词 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
