| 缩略语及中英文对照 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-25页 |
| ·葡萄霜霉病 | 第11-15页 |
| ·葡萄霜霉菌 | 第11-12页 |
| ·不同葡萄对霜霉病的抗性 | 第12-13页 |
| ·葡萄霜霉病抗性研究进展 | 第13-15页 |
| ·植物的免疫系统 | 第15-17页 |
| ·PTI免疫 | 第15-16页 |
| ·ETI免疫 | 第16-17页 |
| ·植物抗病基因的研究进展 | 第17-21页 |
| ·植物抗病基因种类 | 第17-18页 |
| ·抗病基因TIR结构域功能研究进展 | 第18-19页 |
| ·抗病基因LRR结构域的功能及研究进展 | 第19-20页 |
| ·R基因抗性信号转导通路相关基因的研究进展 | 第20-21页 |
| ·植物病原卵菌效应因子 | 第21-24页 |
| ·植物病原卵菌效应因子的挖掘 | 第22页 |
| ·卵菌效应蛋白转运机制研究进展 | 第22-23页 |
| ·卵菌效应蛋白的寄主靶标研究进展 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 MrRPV1蛋白TIR结构域信号转导功能研究 | 第25-42页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料与方法 | 第25-27页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·实验仪器与设备 | 第25-26页 |
| ·酶及主要的实验试剂 | 第26页 |
| ·常用培养基与溶液配置 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-35页 |
| ·引物设计、PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第28页 |
| ·BP反应 | 第28-29页 |
| ·LR反应 | 第29页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的转化 | 第30页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·DNA测序 | 第32页 |
| ·农杆菌介导的烟草瞬时转化实验 | 第32-33页 |
| ·烟草叶片蛋白提取和含量测定 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳和Western Blot | 第33-34页 |
| ·基因枪法瞬时转化和显微观察 | 第34-35页 |
| ·实验结果 | 第35-41页 |
| ·MrRPV1蛋白TIR结构域的边界界定 | 第35-38页 |
| ·MrRPV1-TIR结构域的二聚体化 | 第38页 |
| ·MrRPV1-TIR结构域点突变功能分析 | 第38-41页 |
| ·小结与讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 MrRPV1蛋白LRR结构域的功能研究 | 第42-54页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·材料与方法 | 第42-47页 |
| ·植物材料、载体及菌株 | 第42页 |
| ·实验仪器与设备 | 第42页 |
| ·酶及主要的实验试剂 | 第42-43页 |
| ·常用溶液与培养基配制 | 第43-44页 |
| ·LRR结构域互换重组载体构建 | 第44-45页 |
| ·农杆菌介导的葡萄体细胞胚的遗传转化 | 第45页 |
| ·转基因阳性苗鉴定 | 第45-46页 |
| ·台盼蓝染色 | 第46页 |
| ·阳性植株霜霉病和白粉病抗性鉴定 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-52页 |
| ·阳性转基因植株的鉴定 | 第47-50页 |
| ·RGA10-8LRR阳性植株霜霉病抗性鉴定 | 第50-51页 |
| ·RGA8-10LRR阳性植株白粉病抗性鉴定 | 第51-52页 |
| ·小结与讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 MrRPV1基因亚细胞定位及其互作蛋白的研究 | 第54-62页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·植物材料、霜霉菌与质粒 | 第54-55页 |
| ·主要仪器与设备 | 第55页 |
| ·酶及主要的实验试剂 | 第55页 |
| ·亚细胞定位及突变载体的构建 | 第55-56页 |
| ·GDA配置与叶片处理 | 第56页 |
| ·双分子荧光表达载体的构建 | 第56页 |
| ·基因枪法瞬时转化和显微观察 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-59页 |
| ·MrRPV1定位于核质 | 第56-57页 |
| ·MrRPV1介导的霜霉菌抗性依赖于HSP90的参与 | 第57页 |
| ·MrRPV1介导的霜霉菌抗性依赖于EDS1的参与 | 第57-59页 |
| ·小结与讨论 | 第59-62页 |
| 第五章 葡萄霜霉菌转录组从头组装及其效应因子筛选 | 第62-80页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料与方法 | 第62-67页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·试剂与仪器设备 | 第62-63页 |
| ·霜霉菌侵染与取材 | 第63页 |
| ·台盼蓝染色 | 第63页 |
| ·侵染材料总RNA提取 | 第63页 |
| ·文库构建与测序 | 第63-64页 |
| ·转录组从头组装 | 第64-65页 |
| ·分泌蛋白的预测 | 第65页 |
| ·霜霉菌RXLR类效应蛋白的预测 | 第65-66页 |
| ·霜霉菌CRN类效应蛋白的预测 | 第66页 |
| ·霜霉菌分泌蛋白功能注释 | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67-78页 |
| ·不同侵染阶段显微观察结果 | 第67页 |
| ·总RNA样品检测 | 第67-68页 |
| ·转录组从头组装 | 第68-70页 |
| ·分泌蛋白预测和功能分析 | 第70-71页 |
| ·RXLR类型效应蛋白 | 第71-75页 |
| ·PvRXLR效应蛋白表达模式分析 | 第75-76页 |
| ·CRN类型效应蛋白 | 第76-78页 |
| ·小结与讨论 | 第78-80页 |
| 第六章 葡萄霜霉菌效应因子PvRXLR18的功能分析 | 第80-92页 |
| ·引言 | 第80页 |
| ·材料与方法 | 第80-85页 |
| ·菌株、载体与植物材料 | 第80-81页 |
| ·主要试剂与仪器设备 | 第81页 |
| ·溶液与培养基配置 | 第81-82页 |
| ·RNA提取与cDNA合成 | 第82-83页 |
| ·载体构建 | 第83-84页 |
| ·农杆菌介导的本氏烟草瞬时表达 | 第84页 |
| ·霜霉菌侵染‘赤霞珠’叶片cDNA文库的构建 | 第84页 |
| ·酵母感受态细胞的制备和转化 | 第84-85页 |
| ·诱饵蛋白的自激活检测 | 第85页 |
| ·实验结果 | 第85-90页 |
| ·PvRXLR18对烟草PCD抑制作用 | 第85-86页 |
| ·诱饵蛋白的构建和自激活检测 | 第86-88页 |
| ·cDNA文库的筛选 | 第88-89页 |
| ·回补实验 | 第89-90页 |
| ·小结与讨论 | 第90-92页 |
| 第七章 结论和展望 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-106页 |
| 附录 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 作者简介 | 第109页 |
