| 个人简历 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-11页 |
| ABSTRACT | 第11-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 材料与方法 | 第20-45页 |
| 1 实验材料 | 第20-25页 |
| ·质粒 | 第20页 |
| ·干扰片段 | 第20页 |
| ·细胞株 | 第20页 |
| ·细胞培养试剂及耗材 | 第20页 |
| ·感受态细胞 | 第20-21页 |
| ·所有的酶类 | 第21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·试剂盒 | 第21页 |
| ·核酸杂交的试剂及材料 | 第21页 |
| ·电泳试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器设备 | 第22页 |
| ·抗体 | 第22页 |
| ·转染试剂 | 第22页 |
| ·常用化学试剂 | 第22页 |
| ·配制的溶液 | 第22-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-45页 |
| ·分子克隆 | 第25-30页 |
| ·慢病毒包装 | 第30-31页 |
| ·细胞培养 | 第31-33页 |
| ·细胞转染 | 第33-34页 |
| ·细胞HBV复制中间体DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·Southem blot检测HBV复制中间体DNA | 第35-39页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第39页 |
| ·反转录及qRT-PCR定量 | 第39-40页 |
| ·Northern blot检测HBV RNA的表达 | 第40-43页 |
| ·Western blot检测蛋白的表达 | 第43-44页 |
| ·双荧光素酶报告基因系统检测INTS10激活ISRE的情况 | 第44页 |
| ·统计分析 | 第44-45页 |
| 结果 | 第45-82页 |
| 1 INTS10表达水平改变对HBV复制及表达的影响 | 第45-62页 |
| ·INTS10过表达载体的过表达效果评价 | 第45-47页 |
| ·INTS10 siRNA干扰效果评价 | 第47-48页 |
| ·过表达INTS10对HBV的影响 | 第48-54页 |
| ·INTS10过表达抑制HBV DNA的复制 | 第48-50页 |
| ·INTS10过表达下调HBV RNA的表达 | 第50-52页 |
| ·过表达INTS10对HBsAg和HBeAg分泌的抑制 | 第52-54页 |
| ·干扰内源性INTS10的表达对HBV的影响 | 第54-62页 |
| ·内源性INTS10的下调促进HBV DNA的复制 | 第54-56页 |
| ·内源性INTS10减少可上调HBV RNA的表达 | 第56-60页 |
| ·内源性INTS10下调促进HBsAg和HBeAg的分泌 | 第60-62页 |
| 2 INTS10表达水平改变影响IRF3的磷酸化水平和ISRE的转录活性 | 第62-79页 |
| ·慢乙肝及自限恢复者组织表达芯片进行通路富集分析 | 第62-65页 |
| ·INTS10过表达上调pho-IRF3(ser396),敲低INTS10下调pho-IRF3(ser396) | 第65-66页 |
| ·过表达INTS10在HBV刺激下可增强ISRE的转录活性,上调IFN-λ的表达,而INTS10的下调则减弱ISRE的转录活性,下调IFN-λ的表达 | 第66-75页 |
| ·阻断IRF3后过表达INTS10,INTS10的抗病毒作用减弱 | 第75-79页 |
| 3 INTS10与HBV的临床相关性分析 | 第79-82页 |
| 讨论 | 第82-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 附录 | 第88-91页 |
| 文献综述 | 第91-105页 |
| 参考文献 | 第101-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第107-108页 |
| 附件 | 第108-112页 |
