| 摘要 | 第1-9页 |
| 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 肝癌 | 第9-10页 |
| ·肝癌概述 | 第9页 |
| ·中药抗癌途径 | 第9-10页 |
| ·直接杀伤肿瘤细胞 | 第9页 |
| ·诱导细胞分化 | 第9-10页 |
| ·诱导细胞凋亡 | 第10页 |
| ·抑制肿瘤血管的生成 | 第10页 |
| ·调节细胞信号传导通路 | 第10页 |
| 2 Wnt通路 | 第10-15页 |
| ·Wnt通路概述 | 第10-11页 |
| ·Wnt通路中相关因子在不同肿瘤中的表达 | 第11-15页 |
| 3 秦皮乙素的研究进展 | 第15-18页 |
| ·秦皮乙素的理化特征 | 第15-16页 |
| ·秦皮乙素的药理活性 | 第16-18页 |
| ·抗炎镇痛作用 | 第16页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第16页 |
| ·抗氧化和清除自由基作用 | 第16-17页 |
| ·抗病原微生物作用 | 第17页 |
| ·抗凝和抗过敏作用 | 第17页 |
| ·其他作用 | 第17-18页 |
| 前言 | 第18-19页 |
| 1 试验材料 | 第19-22页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·试剂配制 | 第19-21页 |
| ·试验仪器 | 第21页 |
| ·试验药物 | 第21页 |
| ·细胞 | 第21-22页 |
| ·来源 | 第21-22页 |
| ·细胞培养 | 第22页 |
| ·细胞传代 | 第22页 |
| ·细胞冻存 | 第22页 |
| ·复苏细胞 | 第22页 |
| 2 试验方法 | 第22-29页 |
| ·秦皮乙素药效学检测 | 第22-23页 |
| ·药物的溶解和配制 | 第22-23页 |
| ·MTT法测定抑制率 | 第23页 |
| ·观测肝癌细胞SMMC-7721病变效应 | 第23页 |
| ·分组设置 | 第23页 |
| ·普通PCR检测目的基因 | 第23-25页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·样品制备 | 第24页 |
| ·提取细胞总RNA | 第24页 |
| ·合成cDNA | 第24-25页 |
| ·荧光定量PCR检测目的基因 | 第25-26页 |
| ·Western blot | 第26-29页 |
| ·总蛋白样品的制备 | 第26-27页 |
| ·磷酸化蛋白的提取 | 第27页 |
| ·BCA法测定蛋白浓度 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第27-28页 |
| ·转膜 | 第28页 |
| ·封闭 | 第28页 |
| ·一抗孵育 | 第28-29页 |
| ·二抗孵育 | 第29页 |
| ·蛋白检测 | 第29页 |
| ·数据统计与分析 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-39页 |
| ·秦皮乙素的药效作用 | 第29-32页 |
| ·秦皮乙素对人肝癌细胞SMMC-7721和人肝细胞HL-7702增殖的影响 | 第29-31页 |
| ·秦皮乙素对人肝癌细胞SMMC-7721导致的病变 | 第31-32页 |
| ·荧光定量PCR测定结果 | 第32-38页 |
| ·人肝癌细胞SMMC-7721总RNA提取与检测 | 第32页 |
| ·普通PCR电泳验证目的基片段 | 第32-33页 |
| ·荧光定量PCR目的基因特异性验证 | 第33-34页 |
| ·荧光定量PCR产物测序验证 | 第34页 |
| ·不同时间点秦皮乙素对人肝癌细胞SMMC-7721β-catenin基因表达量的影响 | 第34-36页 |
| ·不同时间点秦皮乙素对人肝癌细胞SMMC-7721 C-myc基因表达量的影响 | 第36-37页 |
| ·不同时间点秦皮乙素对人肝癌细胞SMMC-7721 Cyclin D1基因表达量的影响 | 第37-38页 |
| ·Western blot测定结果 | 第38-39页 |
| ·BCA蛋白浓度测定结果 | 第38页 |
| ·秦皮乙素对人肝癌细胞SMMC-7721磷酸化蛋白β-catenin表达量的影响 | 第38页 |
| ·秦皮乙素对人肝癌细胞SMMC-7721 β-catenin蛋白表达量的影响 | 第38-39页 |
| ·秦皮乙素对人肝癌细胞SMMC-7721 C-myc和Cyclin D1蛋白表达量的影响 | 第39页 |
| 4 分析与讨论 | 第39-42页 |
| ·秦皮乙素的细胞毒性和抗癌活性 | 第39-40页 |
| ·秦皮乙素通过上调β-catenin磷酸化蛋白表达水平而下调其β-catenin总蛋白的表达 | 第40-41页 |
| ·秦皮乙素通过降低C-myc和CycliD1在基因和蛋白水平上的表达而发挥抗肿瘤作用 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| Abstract | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
