缩略词表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
前言 | 第14-18页 |
第一章 EPR 距离测量原理及其应用 | 第18-31页 |
1 定点自旋标记技术(SDSL) | 第18-19页 |
2 EPR 距离测量原理 | 第19-26页 |
·偶极-偶极耦合作用 | 第19-22页 |
·EPR 距离计算方法 | 第22-26页 |
·CW-EPR 距离计算方法 | 第23-24页 |
·Pulsed EPR 距离计算方法 | 第24-26页 |
·CW-EPR 与 Pulsed EPR 比较 | 第26页 |
3 EPR 距离测量在生物研究中的应用 | 第26-31页 |
·蛋白质结构研究 | 第27页 |
·蛋白质相互作用 | 第27-29页 |
·核酸分子研究 | 第29页 |
·长距离的测量应用 | 第29-31页 |
第二章 连续波 EPR 距离计算软件 | 第31-44页 |
1 软件简介 | 第32-33页 |
2 波谱拟合 | 第33-39页 |
·各类型实验谱拟合 | 第34-36页 |
·波谱反拟合程序 | 第36-38页 |
·高斯拟合程序 | 第38-39页 |
·拟合过程的方法改进 | 第39页 |
3 距离计算 | 第39-42页 |
·增宽函数的拟合 | 第40-41页 |
·波谱中心点的选择 | 第41-42页 |
4 本章总结 | 第42-44页 |
第三章 双自旋距离刻度分子标尺 | 第44-67页 |
1 标尺分子的设计 | 第44-45页 |
2 C60单/双自旋分子的合成与鉴定 | 第45-50页 |
·材料与方法 | 第45-46页 |
·主要分析仪器 | 第45-46页 |
·C60单/双加成化合物的合成及分离 | 第46页 |
·C60单/双自旋化合物的合成与鉴定 | 第46页 |
·结果与讨论 | 第46-50页 |
·紫外吸收谱 | 第47-48页 |
·室温 CW-EPR 实验 | 第48-49页 |
·稳定性实验 | 第49-50页 |
·小结 | 第50页 |
3 标尺分子距离测量实验 | 第50-59页 |
·材料与方法 | 第51-52页 |
·设备与材料 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-52页 |
·结果与分析 | 第52-58页 |
·不同温度下 C60单/双自旋分子 EPR 波谱 | 第52-55页 |
·不同浓度下 C60单/双自旋分子 EPR 波谱 | 第55-56页 |
·不同溶剂下 C60单/双自旋分子 EPR 波谱 | 第56-57页 |
·微波功率对 C60单/双自旋分子 EPR 波谱的影响 | 第57-58页 |
·本底信号 | 第58页 |
·小结 | 第58-59页 |
4 距离刻度实验及刻度标尺的建立 | 第59-65页 |
·不同浓度下波谱增宽效应与双基间距离的关系 | 第60-61页 |
·不同温度下波谱增宽效应与双基间距离的关系 | 第61-63页 |
·不同功率下波谱增宽效应与双基间距离的关系 | 第63-64页 |
·不同溶剂下波谱增宽效应与双基间距离的关系 | 第64-65页 |
5 本章总结 | 第65-67页 |
第四章 距离测量蛋白质实验模型的构建 | 第67-86页 |
1 单/双 Cys 点突变 hLSECtin-CRD 结构域蛋白质模型的设计 | 第67-69页 |
2 膜蛋白 hLSECtin-CRD 结构域(野生型)的表达 | 第69-77页 |
·实验材料与设备 | 第69页 |
·实验材料 | 第69页 |
·主要试剂与设备 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-73页 |
·载体构建 | 第69-72页 |
·hLSECtin-CRD 结构域蛋白的诱导表达 | 第72页 |
·SDS-PAGE 检测 | 第72页 |
·Western blotting 检测 | 第72页 |
·透射电镜检测 | 第72-73页 |
·生物功能检测 | 第73页 |
·数据处理及统计分析 | 第73页 |
·结果 | 第73-77页 |
·原核表达载体构建 | 第73-74页 |
·常规原核表达载体蛋白表达结果 | 第74页 |
·Tat-hLSECtin-CRD 蛋白表达结果 | 第74-75页 |
·细胞亚显微结构 | 第75-76页 |
·Tat-hLSECtin-CRD 生物功能检测结果 | 第76页 |
·小结 | 第76-77页 |
3 单/双 Cys 点突变 hLSECtin-CRD 结构域蛋白的表达与纯化 | 第77-84页 |
·材料与设备 | 第77页 |
·实验方法 | 第77-80页 |
·单/双 Cys 点突变的引入 | 第77-78页 |
·原核载体表达与纯化 | 第78-79页 |
·真核载体表达与纯化 | 第79-80页 |
·结果 | 第80-84页 |
·单/双 Cys 点突变 hLSECtin-CRD 结构域蛋白的原核表达与纯化 | 第80-83页 |
·单/双 Cys 点突变 hLSECtin-CRD 结构域蛋白的真核表达与纯化 | 第83-84页 |
4 本章总结 | 第84-86页 |
第五章 总结与讨论 | 第86-89页 |
参考文献 | 第89-101页 |
文献综述 | 第101-107页 |
参考文献 | 第105-107页 |
个人简历 | 第107-108页 |
致谢 | 第108页 |