中英文缩略词表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
前言 | 第13-15页 |
材料与方法 | 第15-31页 |
1 材料 | 第15页 |
·白纹伊蚊 | 第15页 |
·病毒株 | 第15页 |
·细胞株 | 第15页 |
·实验小鼠 | 第15页 |
2 主要仪器设备 | 第15-16页 |
3 主要试剂及溶液 | 第16-17页 |
4 方法 | 第17-31页 |
·野生白纹伊蚊的采集、鉴定与实验室驯养 | 第17-19页 |
·白纹伊蚊中肠样本的分组与收集 | 第19-21页 |
·乳鼠脑内接种 DENV-2 与 DENV-2 鼠脑悬液制备 | 第21页 |
·DENV-2 在 C6/36 细胞中传代 | 第21页 |
·DENV-2 病毒滴度 TCID50 的测定 | 第21-22页 |
·含 DENV-2 人工血餐制备及蚊虫经口感染实验 | 第22页 |
·白纹伊蚊总 RNA 提取 | 第22页 |
·RT-PCR 检测蚊虫体内的 DENV-2 | 第22-23页 |
·白纹伊蚊中肠总 RNA 提取(构建小 RNA 库用) | 第23页 |
·白纹伊蚊中肠小 RNA 建库及高通量测序 | 第23-24页 |
·白纹伊蚊小 RNA 高通量测序后的生物信息学分析 | 第24-25页 |
·miRNA 表达的差异分析 | 第25页 |
·miRNA 靶基因预测 | 第25-26页 |
·茎环引物 qRT-PCR 验证 miRNA | 第26-28页 |
·白纹伊蚊 C6/36 细胞瞬时转染实验 | 第28-31页 |
结果 | 第31-127页 |
1 白纹伊蚊对 DENV-2 易感性研究 | 第31-35页 |
·白纹伊蚊身体和中肠对 DENV-2 敏感性测定 | 第31-32页 |
·DENV-2 鼠脑悬液与 DENV-2 人工血餐滴度测定 | 第32-33页 |
·白纹伊蚊 C6/36 细胞感染 DENV-2 模型的建立 | 第33-35页 |
2 白纹伊蚊中肠 miRNA 高通量测序及生物信息学分析 | 第35-53页 |
·白纹伊蚊中肠总 RNA 浓度及 RNA 完整性分析 | 第35页 |
·白纹伊蚊中肠小 RNA 的 Solexa 测序及生物信息学分析 | 第35-38页 |
·白纹伊蚊中肠保守 miRNA 比对 | 第38-43页 |
·白纹伊蚊中肠新 miRNA 的预测 | 第43-50页 |
·白纹伊蚊中肠 miRNA 表达谱特征分析 | 第50-51页 |
·白纹伊蚊中肠保守miRNA茎环引物qRT-PCR验证 | 第51-53页 |
3 吸血后白纹伊蚊中肠 miRNA 表达谱变化及差异分析 | 第53-74页 |
·吸血后白纹伊蚊中肠总 RNA 浓度及 RNA 完整性分析 | 第53-54页 |
·Solexa 高通量测序及生物信息学分析 | 第54-59页 |
·吸血后白纹伊蚊中肠 miRNA 表达谱变化及差异分析 | 第59-74页 |
4 吸入 DENV-2 人工血餐后感染与未感染蚊中肠小 RNA 表达谱及差异分析 | 第74-88页 |
·感染与未感染蚊中肠总 RNA 浓度及 RNA 完整性分析 | 第74-75页 |
·感染与未感染中肠样品测序后的生物信息学分析 | 第75-82页 |
·DENV-2 感染与未感染蚊中肠保守 miRNA 表达与新 miRNA 的预测 | 第82-83页 |
·DENV-2 感染与未感染蚊中肠 miRNA 表达谱变化及差异分析 | 第83-88页 |
5 吸入 DENV-2 血餐后中肠 miRNA 表达谱动态变化及差异分析 | 第88-109页 |
·高通量测序及生物信息学分析 | 第88-92页 |
·保守 miRNA 表达和新 miRNA 预测 | 第92-95页 |
·吸入 DENV-2 血餐后中肠 miRNA 表达谱变化特征 | 第95-97页 |
·吸食含与不含 DENV-2 血餐后中肠 miRNA 表达差异分析 | 第97-102页 |
·所有筛选的差异表达 miRNA 汇总分析 | 第102-103页 |
·差异表达 miRNA 的靶基因预测 | 第103-107页 |
·差异表达 miRNA 的茎环引物 qRT-PCR 验证 | 第107-109页 |
6 白纹伊蚊中肠 miRNA 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响研究 | 第109-127页 |
·qRT-PCR 检测 C6/36 细胞内有无目的 miRNA 的表达 | 第109-110页 |
·人工合成双链 miRNA 类似物转染 C6/36 细胞及转染效率检测 | 第110-111页 |
·aal-miR-4728-5p 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用 | 第111-115页 |
·aal-miR-1767 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用 | 第115-118页 |
·aal-miR-276-3p 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用 | 第118-121页 |
·aal-miR-622 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用 | 第121-123页 |
·aal-miR-4448 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用 | 第123-127页 |
讨论 | 第127-134页 |
1 白纹伊蚊个体和中肠对 DENV-2 的感染率不同 | 第127页 |
2 未吸血白纹伊蚊中肠 miRNA 表达谱特征 | 第127-129页 |
3 吸血后白纹伊蚊中肠 miRNA 的表达谱变化特征 | 第129-130页 |
4 吸食含 DENV-2 血餐后白纹伊蚊中肠 miRNA 的表达谱变化特征 | 第130页 |
5 感染与未感染 DENV-2 白纹伊蚊中肠 miRNA 表达差异分析 | 第130-131页 |
6 差异表达 miRNA 的靶基因预测 | 第131-132页 |
7 差异表达 miRNA 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响 | 第132-134页 |
小结 | 第134-135页 |
参考文献 | 第135-143页 |
附录 1 试剂配制方法 | 第143-144页 |
附录 2 16 份白纹伊蚊中肠样本 miRNA 表达谱 | 第144-157页 |
综述 | 第157-167页 |
参考文献 | 第162-167页 |
已接收文章 | 第167-198页 |
个人简介 | 第198-199页 |
致谢 | 第199页 |