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登革病毒易感性相关的白纹伊蚊中肠特异性microRNA的鉴定、筛选与功能研究

中英文缩略词表第1-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-13页
前言第13-15页
材料与方法第15-31页
 1 材料第15页
   ·白纹伊蚊第15页
   ·病毒株第15页
   ·细胞株第15页
   ·实验小鼠第15页
 2 主要仪器设备第15-16页
 3 主要试剂及溶液第16-17页
 4 方法第17-31页
   ·野生白纹伊蚊的采集、鉴定与实验室驯养第17-19页
   ·白纹伊蚊中肠样本的分组与收集第19-21页
   ·乳鼠脑内接种 DENV-2 与 DENV-2 鼠脑悬液制备第21页
   ·DENV-2 在 C6/36 细胞中传代第21页
   ·DENV-2 病毒滴度 TCID50 的测定第21-22页
   ·含 DENV-2 人工血餐制备及蚊虫经口感染实验第22页
   ·白纹伊蚊总 RNA 提取第22页
   ·RT-PCR 检测蚊虫体内的 DENV-2第22-23页
   ·白纹伊蚊中肠总 RNA 提取(构建小 RNA 库用)第23页
   ·白纹伊蚊中肠小 RNA 建库及高通量测序第23-24页
   ·白纹伊蚊小 RNA 高通量测序后的生物信息学分析第24-25页
   ·miRNA 表达的差异分析第25页
   ·miRNA 靶基因预测第25-26页
   ·茎环引物 qRT-PCR 验证 miRNA第26-28页
   ·白纹伊蚊 C6/36 细胞瞬时转染实验第28-31页
结果第31-127页
 1 白纹伊蚊对 DENV-2 易感性研究第31-35页
   ·白纹伊蚊身体和中肠对 DENV-2 敏感性测定第31-32页
   ·DENV-2 鼠脑悬液与 DENV-2 人工血餐滴度测定第32-33页
   ·白纹伊蚊 C6/36 细胞感染 DENV-2 模型的建立第33-35页
 2 白纹伊蚊中肠 miRNA 高通量测序及生物信息学分析第35-53页
   ·白纹伊蚊中肠总 RNA 浓度及 RNA 完整性分析第35页
   ·白纹伊蚊中肠小 RNA 的 Solexa 测序及生物信息学分析第35-38页
   ·白纹伊蚊中肠保守 miRNA 比对第38-43页
   ·白纹伊蚊中肠新 miRNA 的预测第43-50页
   ·白纹伊蚊中肠 miRNA 表达谱特征分析第50-51页
   ·白纹伊蚊中肠保守miRNA茎环引物qRT-PCR验证第51-53页
 3 吸血后白纹伊蚊中肠 miRNA 表达谱变化及差异分析第53-74页
   ·吸血后白纹伊蚊中肠总 RNA 浓度及 RNA 完整性分析第53-54页
   ·Solexa 高通量测序及生物信息学分析第54-59页
   ·吸血后白纹伊蚊中肠 miRNA 表达谱变化及差异分析第59-74页
 4 吸入 DENV-2 人工血餐后感染与未感染蚊中肠小 RNA 表达谱及差异分析第74-88页
   ·感染与未感染蚊中肠总 RNA 浓度及 RNA 完整性分析第74-75页
   ·感染与未感染中肠样品测序后的生物信息学分析第75-82页
   ·DENV-2 感染与未感染蚊中肠保守 miRNA 表达与新 miRNA 的预测第82-83页
   ·DENV-2 感染与未感染蚊中肠 miRNA 表达谱变化及差异分析第83-88页
 5 吸入 DENV-2 血餐后中肠 miRNA 表达谱动态变化及差异分析第88-109页
   ·高通量测序及生物信息学分析第88-92页
   ·保守 miRNA 表达和新 miRNA 预测第92-95页
   ·吸入 DENV-2 血餐后中肠 miRNA 表达谱变化特征第95-97页
   ·吸食含与不含 DENV-2 血餐后中肠 miRNA 表达差异分析第97-102页
   ·所有筛选的差异表达 miRNA 汇总分析第102-103页
   ·差异表达 miRNA 的靶基因预测第103-107页
   ·差异表达 miRNA 的茎环引物 qRT-PCR 验证第107-109页
 6 白纹伊蚊中肠 miRNA 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响研究第109-127页
   ·qRT-PCR 检测 C6/36 细胞内有无目的 miRNA 的表达第109-110页
   ·人工合成双链 miRNA 类似物转染 C6/36 细胞及转染效率检测第110-111页
   ·aal-miR-4728-5p 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用第111-115页
   ·aal-miR-1767 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用第115-118页
   ·aal-miR-276-3p 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用第118-121页
   ·aal-miR-622 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用第121-123页
   ·aal-miR-4448 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响作用第123-127页
讨论第127-134页
 1 白纹伊蚊个体和中肠对 DENV-2 的感染率不同第127页
 2 未吸血白纹伊蚊中肠 miRNA 表达谱特征第127-129页
 3 吸血后白纹伊蚊中肠 miRNA 的表达谱变化特征第129-130页
 4 吸食含 DENV-2 血餐后白纹伊蚊中肠 miRNA 的表达谱变化特征第130页
 5 感染与未感染 DENV-2 白纹伊蚊中肠 miRNA 表达差异分析第130-131页
 6 差异表达 miRNA 的靶基因预测第131-132页
 7 差异表达 miRNA 对 C6/36 细胞内 DENV-2 复制的影响第132-134页
小结第134-135页
参考文献第135-143页
附录 1 试剂配制方法第143-144页
附录 2 16 份白纹伊蚊中肠样本 miRNA 表达谱第144-157页
综述第157-167页
 参考文献第162-167页
已接收文章第167-198页
个人简介第198-199页
致谢第199页

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