| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 材料和方法 | 第16-27页 |
| 结果 | 第27-49页 |
| 第一部分 OC43-FL病毒的拯救及鉴定 | 第27-31页 |
| 1. pBAC-OC43~(FL)质粒的鉴定 | 第27-29页 |
| 2. OC43-FL病毒的拯救 | 第29页 |
| 3. OC43-FL病毒的鉴定 | 第29-30页 |
| 本章小结 | 第30-31页 |
| 第二部分 带GFP重组pBAC-OC43质粒的构建及鉴定 | 第31-41页 |
| 1. 构建策略 | 第31-33页 |
| 2. GFP取代NS2的重组pBAC-OC43的构建与鉴定 | 第33-35页 |
| ·带GFP的重组片段的构建与克隆 | 第33-34页 |
| ·GFP取代NS2的重组pBAC-OC43质粒的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| 3. GFP取代NS12.9的重组pBAC-OC43质粒的构建及鉴定 | 第35-38页 |
| ·带GFP的重组片段的构建与克隆 | 第35-36页 |
| ·GFP取代NS12.9的重组pBAC-OC43质粒的构建及鉴定 | 第36-38页 |
| 4. GFP插入N基因后的重组pBAC-OC43质粒的构建及鉴定 | 第38-40页 |
| ·带GFP的重组片段的构建与克隆 | 第38页 |
| ·GFP插入N基因后的重组pBAC-OC43质粒的构建及鉴定 | 第38-40页 |
| 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三部分 带GFP的重组HCoV-OC43病毒的拯救及体外鉴定 | 第41-49页 |
| 1. GFP取代NS2的重组HCoV-OC43病毒的拯救及鉴定 | 第41-45页 |
| ·GFP表达情况的连续观察 | 第41-42页 |
| ·免疫荧光和Western blot检测 | 第42-43页 |
| ·转染细胞的传代扩增 | 第43-44页 |
| ·上清感染实验 | 第44-45页 |
| ·细胞冻融裂解上清感染实验 | 第45页 |
| 2. GFP取代NS12. 9的重组HCoV-OC43病毒的拯救及鉴定 | 第45-47页 |
| ·GFP表达情况的连续观察 | 第45-46页 |
| ·免疫荧光检测 | 第46-47页 |
| ·上清感染实验 | 第47页 |
| 3. GFP插入N基因后的重组HCoV-OC43病毒的拯救 | 第47-48页 |
| 本章小结 | 第48-49页 |
| 讨论 | 第49-52页 |
| 全文总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 综述 | 第56-69页 |
| RNA病毒感染性克隆技术及其应用 | 第56-61页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 冠状病毒载体研究进展 | 第61-69页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简历 | 第70页 |
