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MAPK通路调控下经TGF-β1/Smad信号途径的肝纤维化—肝癌发病机制研究

英文缩略词表(Abbreviation)第1-12页
中文摘要第12-19页
Abstract第19-29页
1. 前言第29-31页
2. 材料与方法第31-50页
   ·材料第31-37页
     ·细胞株第31页
     ·主要仪器第31-32页
     ·主要试剂及抗体第32-35页
     ·主要试剂配制第35-37页
   ·方法第37-50页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Smad3L磷酸化的影响第38页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Smads蛋白转位入核的影响第38页
     ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Imp7/Imp8蛋白表达的影响第38-39页
     ·细胞免疫荧光染色法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Imp7/Imp8蛋白表达的影响第39页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内PAI-1 mRNA表达的影响第39-40页
       ·TGF-β_1诱导HepG2细胞内PAI-1 mRNA表达最适条件的选择第39-40页
       ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内PAI-1 mRNA表达的影响第40页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内ERK通路、JNK通路、p38通路活化的抑制作用第40-41页
     ·三种MAPK抑制因子对HepG2细胞内TGF-β_1诱导的磷酸化Smad3C、Smad3L转位的影响第41页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Smad2/3/4复合物形成的影响第41-42页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Smads蛋白转位入核的影响第42页
     ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Imp7/Imp8蛋白表达的影响第42-43页
     ·细胞免疫荧光染色法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Imp7/Imp8蛋白表达的影响第43页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内PAI-1 mRNA表达的影响第43-44页
       ·TGF-β_1诱导HepG2细胞内PAI-1 mRNA表达最适条件的选择第43-44页
       ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内PAI-1 mRNA表达的影响第44页
     ·检测方法第44-50页
       ·免疫沉淀和western blot分析第44-46页
       ·细胞免疫荧光染色法第46-47页
       ·SYBR Green Ⅰ荧光实时定量RT-PCR第47-50页
     ·统计分析第50页
3. 结果第50-74页
   ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Smad3L磷酸化的影响第50-51页
   ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的HSC细胞磷酸化Smad3L蛋白转位入核的影响第51-52页
   ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的HSC细胞中Smad4细胞内定位的影响第52-53页
   ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Imp7/Imp8蛋白表达的影响第53-56页
     ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Imp7蛋白表达的影响第53-55页
     ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Imp8蛋白表达的影响第55-56页
   ·细胞免疫荧光染色法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内Imp7/Imp8蛋白表达的影响第56-57页
   ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HSC细胞内PAI-1mRNA表达的影响第57-61页
     ·PCR产物分析第57-58页
     ·TGF-β_1刺激HSC细胞内PAI-1mRNA表达的量效作用第58-59页
     ·TGF-β_1刺激HSC细胞内PAI-1mRNA表达的时效作用第59-60页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的HSC细胞内PAI-1mRNA表达的影响第60-61页
   ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的HepG2细胞内MAPK通路活化的抑制作用第61-64页
     ·ERK抑制因子(PD98059)对TGF-β_1诱导的HepG2细胞内ERK通路活化的抑制作用第61-62页
     ·JNK抑制因子(SP600125)对TGF-β_1诱导的HepG2细胞内JNK通路活化的抑制作用第62-63页
     ·p38抑制因子(SB203580)对TGF-β_1诱导的HepG2细胞内p38通路活化的抑制作用第63-64页
   ·三种MAPK抑制因子对HepG2细胞内TGF-β_1诱导的磷酸化Smad3C、Smad3L转位的影响第64-65页
   ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Smad2/3/4复合物形成的影响第65-67页
   ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Imp7/Imp8蛋白表达的影响第67-69页
     ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Imp蛋白表达的影响第67-68页
     ·Western blot法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Imp蛋白表达的影响第68-69页
   ·细胞免疫荧光染色法检测三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内Imp7/Imp8蛋白表达的影响第69-71页
   ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导HepG2细胞内PAI-1 mRNA表达的影响第71-74页
     ·PCR产物分析第71页
     ·TGF-β_1刺激HepG2细胞内PAI-1 mRNA表达的量效作用第71-72页
     ·TGF-β_1刺激HepG2细胞内PAI-1 mRNA表达的时效作用第72-73页
     ·三种MAPK抑制因子对TGF-β_1诱导的HepG2细胞内PAI-1 mRNA表达的影响第73-74页
4. 讨论第74-81页
5. 结论第81-83页
6. 下一步研究设想和展望第83-84页
参考文献第84-90页
附录一 个人简历第90-92页
附录二 致谢第92-93页
附录三 综述第93-115页
 中文摘要第93-94页
 Abstract第94-105页
 参考文献第105-115页

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