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pTAC14甲基化酶功能对拟南芥叶绿体发育影响的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第一章 引言第9-19页
   ·叶绿体的形态结构、功能及发育过程第9-12页
     ·叶绿体的形态结构和功能第9-11页
     ·叶绿体的发育第11-12页
   ·叶绿体起源学说第12页
     ·内共生起源学说第12页
     ·非共生起源学说第12页
   ·叶绿体的基因组及其表达调控第12-14页
     ·叶绿体中遗传物质信息量第12-13页
     ·叶绿体基因转录所需的 RNA 聚合酶第13-14页
   ·叶绿体中 TAC 复合物的研究第14-15页
   ·叶绿体研究的主要方法第15-16页
     ·正向遗传学第15-16页
     ·反向遗传学第16页
   ·蛋白质赖氨酸甲基化酶研究进展第16-19页
     ·SET 结构域蛋白的特征第16-17页
     ·SET 结构域蛋白的分类第17-18页
     ·SET 结构域蛋白的生物学功能第18-19页
第二章 材料和方法第19-38页
   ·材料第19-22页
     ·植物材料第19页
     ·工具酶和试剂第19页
     ·主要使用仪器第19-20页
     ·抗生素及其配方第20页
     ·菌株和质粒第20-21页
       ·菌株第20-21页
       ·质粒第21页
     ·各种培养基配方第21-22页
   ·实验方法第22-38页
     ·拟南芥的土壤种植和无菌培养第22页
       ·拟南芥的土壤种植第22页
       ·拟南芥的无菌培养第22页
     ·农杆菌的转染与转基因植株的筛选第22-23页
     ·点突变互补载体的构建第23-24页
     ·大肠杆菌转化实验第24-25页
     ·大肠杆菌碱裂解法质粒提取、酶切及连接体系第25-26页
       ·碱裂解法提取质粒第25-26页
       ·酶切体系第26页
       ·连接体系第26页
     ·DNA 的提取第26页
     ·蛋白的原核表达及纯化第26-28页
       ·制备原核表达感受态细胞第26-27页
       ·融合蛋白原核表达第27页
       ·His 标签融合蛋白的纯化第27-28页
       ·GST 标签蛋白的纯化第28页
     ·Pull-Down 实验第28-29页
     ·蛋白质免疫杂交实验第29页
       ·蛋白质的提取第29页
       ·Western Blot第29页
     ·酵母双杂交实验第29-30页
     ·蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)实验第30-31页
     ·体外甲基化孵育实验第31-32页
     ·Blue Native PAGE第32-36页
       ·实验原理第32页
       ·BN-PAGE 所需试剂的配方第32-34页
       ·材料处理第34页
       ·Blue Native 梯度胶配胶体系第34-35页
       ·银染第35-36页
     ·实验所需引物设计第36-38页
第三章 结果第38-50页
   ·pTAC14 属于 SET 结构域蛋白质甲基转移酶家族中一员第38-41页
   ·定点诱变分析 pTAC14 SET 结构域保守残基的功能第41-43页
   ·pTAC14 与 rbcL 在体外能够相互作用第43-45页
   ·rbcL 在体外能被 pTAC14 进行甲基化修饰第45-46页
   ·白化突变体背景下叶绿体中其他光合蛋白积累情况第46-47页
   ·酵母双杂交分析 pTAC14 与 pTAC12 具体相互作用区段第47-50页
第四章 讨论第50-53页
   ·pTAC14~(G103。N286。Y324)是 pTAC14 行使功能所必需的第50页
   ·pTAC14 与 rbcL 相互作用可能甲基化 rbcL第50-51页
   ·pTAC14 蛋白与 TAC 复合物其他成员的关系第51-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-58页

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