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肽链释放因子与tRNA的协同进化对终止密码子重新分配的影响

中文摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
第一章 文献综述第15-21页
   ·第一类肽链释放因子第15-17页
     ·第一类肽链释放因子的结构第15页
     ·第一类肽链识别终止密码子的机制第15-17页
   ·蛋白质合成终止过程中各因子之间相互作用第17-18页
   ·蛋白质合成终止过程中各因子在进化上存在一定的协同性第18-19页
   ·蓝氏贾第鞭毛虫、滴虫和八肋游仆虫的特点及本课题的研究意义第19-21页
     ·蓝氏贾第鞭毛虫第19页
     ·滴虫第19页
     ·八肋游仆虫第19-20页
     ·本课题研究的意义第20-21页
第二章 滴虫两类肽链释放因子的相互作用第21-26页
   ·实验材料第21-22页
     ·菌株和质粒第21页
     ·主要试剂的配制第21-22页
     ·主要的酶和生化试剂第22页
   ·实验方法第22-24页
     ·酵母双杂交重组质粒的构建第22-23页
     ·酵母双杂交重组质粒的共转化第23页
     ·β-半乳糖苷酶活性分析第23-24页
   ·实验结果第24-25页
     ·酵母双杂交重组质粒的构建第24页
     ·酵母双杂交实验第24-25页
   ·讨论第25-26页
第三章 贾第虫eRF1及突变体识别终止密码子的性质和活性分析第26-40页
   ·材料第26-28页
     ·实验菌株和质粒第26-27页
     ·试剂、引物合成及测序第27页
     ·试剂的配制第27-28页
   ·方法第28-30页
     ·贾第虫杂合eRF1(G1/Sc eRF1)的构建(含HA标签)第28页
     ·定点突变第28-29页
     ·质粒洗牌技术和双荧光素酶通读效率实验第29-30页
     ·Western blot第30页
   ·实验结果第30-38页
     ·重组质粒pDB086的构建第30页
     ·贾第虫eRF1突变质粒的构建第30-33页
     ·贾第虫eRF1野生型和突变体识别终止密码子的活性分析第33-34页
     ·贾第虫eRF1野生型和突变体的识别性质分析第34-37页
     ·Gl/Sc eRF1杂合蛋白在酵母细胞中稳定表达第37-38页
   ·讨论第38-40页
第四章 游仆虫eRF1b突变体识别终止密码子的性质和活性分析第40-49页
   ·材料与方法第40-42页
     ·实验菌株及质粒第40-41页
     ·试剂、引物合成及测序第41页
     ·定点突变第41页
     ·tRNA的克隆第41-42页
     ·质粒洗牌技术和双荧光素酶通读效率实验第42页
     ·Western blot第42页
   ·结果第42-47页
     ·Eo eRF1b突变质粒的构建第42-43页
     ·Eo eRF1b野生型和突变体识别终止密码子的活性分析第43-44页
     ·Eo eRF1b的N端结构域中对密码子识别具有影响作用的氨基酸残基第44-47页
     ·tRNA的克隆第47页
   ·小结第47-49页
总结与展望第49-51页
参考文献第51-56页
附录第56-58页
攻读硕士期间取得的研究成果第58-60页
致谢第60-61页
个人简介及联系方式第61-63页

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