中文摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-21页 |
·第一类肽链释放因子 | 第15-17页 |
·第一类肽链释放因子的结构 | 第15页 |
·第一类肽链识别终止密码子的机制 | 第15-17页 |
·蛋白质合成终止过程中各因子之间相互作用 | 第17-18页 |
·蛋白质合成终止过程中各因子在进化上存在一定的协同性 | 第18-19页 |
·蓝氏贾第鞭毛虫、滴虫和八肋游仆虫的特点及本课题的研究意义 | 第19-21页 |
·蓝氏贾第鞭毛虫 | 第19页 |
·滴虫 | 第19页 |
·八肋游仆虫 | 第19-20页 |
·本课题研究的意义 | 第20-21页 |
第二章 滴虫两类肽链释放因子的相互作用 | 第21-26页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·菌株和质粒 | 第21页 |
·主要试剂的配制 | 第21-22页 |
·主要的酶和生化试剂 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-24页 |
·酵母双杂交重组质粒的构建 | 第22-23页 |
·酵母双杂交重组质粒的共转化 | 第23页 |
·β-半乳糖苷酶活性分析 | 第23-24页 |
·实验结果 | 第24-25页 |
·酵母双杂交重组质粒的构建 | 第24页 |
·酵母双杂交实验 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
第三章 贾第虫eRF1及突变体识别终止密码子的性质和活性分析 | 第26-40页 |
·材料 | 第26-28页 |
·实验菌株和质粒 | 第26-27页 |
·试剂、引物合成及测序 | 第27页 |
·试剂的配制 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-30页 |
·贾第虫杂合eRF1(G1/Sc eRF1)的构建(含HA标签) | 第28页 |
·定点突变 | 第28-29页 |
·质粒洗牌技术和双荧光素酶通读效率实验 | 第29-30页 |
·Western blot | 第30页 |
·实验结果 | 第30-38页 |
·重组质粒pDB086的构建 | 第30页 |
·贾第虫eRF1突变质粒的构建 | 第30-33页 |
·贾第虫eRF1野生型和突变体识别终止密码子的活性分析 | 第33-34页 |
·贾第虫eRF1野生型和突变体的识别性质分析 | 第34-37页 |
·Gl/Sc eRF1杂合蛋白在酵母细胞中稳定表达 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第四章 游仆虫eRF1b突变体识别终止密码子的性质和活性分析 | 第40-49页 |
·材料与方法 | 第40-42页 |
·实验菌株及质粒 | 第40-41页 |
·试剂、引物合成及测序 | 第41页 |
·定点突变 | 第41页 |
·tRNA的克隆 | 第41-42页 |
·质粒洗牌技术和双荧光素酶通读效率实验 | 第42页 |
·Western blot | 第42页 |
·结果 | 第42-47页 |
·Eo eRF1b突变质粒的构建 | 第42-43页 |
·Eo eRF1b野生型和突变体识别终止密码子的活性分析 | 第43-44页 |
·Eo eRF1b的N端结构域中对密码子识别具有影响作用的氨基酸残基 | 第44-47页 |
·tRNA的克隆 | 第47页 |
·小结 | 第47-49页 |
总结与展望 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录 | 第56-58页 |
攻读硕士期间取得的研究成果 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
个人简介及联系方式 | 第61-63页 |