| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·干扰素 | 第12-15页 |
| ·IF-N-γ的产生 | 第12-13页 |
| ·IFN-γ的分子结构与生物学功能 | 第13-15页 |
| ·IFN-γ的应用及发展前景 | 第15页 |
| ·microRNA | 第15-22页 |
| ·microRNA的生成 | 第15-17页 |
| ·microRNA的作用方式 | 第17页 |
| ·microRNA的表达调控 | 第17-18页 |
| ·microRNA的研究方法 | 第18-20页 |
| ·microRNA的应用前景 | 第20-22页 |
| 第2章 目的与意义 | 第22-23页 |
| 第3章 材料与方法 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·细胞系以及转染相关材料 | 第23页 |
| ·载体构建所用材料及获赠载体 | 第23-25页 |
| ·培养基及其配制 | 第25-26页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-36页 |
| ·质粒的构建 | 第27-31页 |
| ·靶点突变报告质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·双荧光素酶报告系统 | 第32页 |
| ·miRNA mimics、inhibitors及超表达质粒的电转 | 第32页 |
| ·Real-Time PCR检测IFN-γmRNA表达水平 | 第32-33页 |
| ·ELISA检测IFN-γ蛋白表达水平 | 第33页 |
| ·荧光定量qRT-PCR检测miRNA表达差异 | 第33-35页 |
| ·统计学方法 | 第35-36页 |
| 第4章 结果与分析 | 第36-53页 |
| ·IFN-γ启动子及3’UTR报告质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·IFN-γ启动子报告质粒的构建 | 第36页 |
| ·IFN-γ 3’UTR报告质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·靶向IFN-γ启动子及靶向其3’UTR的miRNA预测 | 第37-40页 |
| ·靶向IFN-γ启动子的miRNA筛选 | 第40-44页 |
| ·IFN-γ转录起始位点上游1197bp片段启动子活性的验证 | 第40-41页 |
| ·靶向IFN-γ启动子的miRNA的初步筛选 | 第41-42页 |
| ·miR-27a抑制IFN-γ启动子活性的验证 | 第42-43页 |
| ·miR-27a与IFN-γ启动子作用靶点的验证 | 第43-44页 |
| ·靶向IFN-γ3’UTR的miRNA筛选 | 第44-47页 |
| ·靶向IFN-γ3’UTR的miRNA的初步筛选 | 第44-45页 |
| ·miR-27a结合IFN-γ3’UTR的验证 | 第45-46页 |
| ·miR-27a与IFN-γ3’UTR作用靶点的验证 | 第46-47页 |
| ·T细胞中miR-27a对IFN-γ表达的调控作用 | 第47-51页 |
| ·EL4细胞电转条件的优化 | 第47-48页 |
| ·EL4细胞中IFN-γ表达的检测 | 第48-49页 |
| ·EL4细胞中miR-27a对IFN-γ表达的调控作用 | 第49-50页 |
| ·EL4细胞中T-bet表达质粒表达效率的检测 | 第50-51页 |
| ·EL4细胞中IFN-γ的表达对miR-27a表达的影响 | 第51-53页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第53-56页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| ·靶向IFN-γ启动子及靶向其3’UTR的miRNA的预测 | 第53-54页 |
| ·靶向IFN-γ启动子及靶向其3’UTR的miRNA的筛选与验证 | 第54页 |
| ·miR-27a抑制IFN-γ表达 | 第54页 |
| ·表达量增加的IFN-γ对miR-27a表达的影响 | 第54-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
