| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略词表(Abbreviaitons) | 第8-9页 |
| 1. 前言 | 第9-19页 |
| ·本课题的提出 | 第9-10页 |
| ·文献综述 | 第10-18页 |
| ·逆境胁迫对植物的影响 | 第10页 |
| ·植物对非生物逆境胁迫的响应 | 第10-12页 |
| ·植物中PRP蛋白的特征及分类 | 第12-13页 |
| ·PRP的表达特异性 | 第13-15页 |
| ·RNA干涉技术在研究基因功能中的应用 | 第15-18页 |
| ·研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-33页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·所用酶及试剂 | 第19页 |
| ·载体和菌株 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-28页 |
| ·不同胁迫处理下PtrPRP基因的表达分析 | 第20-23页 |
| ·PtrPRP基因的亚细胞定位 | 第23-27页 |
| ·农杆菌介导PtrPRP-RNAi基因转枳 | 第27-28页 |
| ·转基因植株的分子鉴定 | 第28-33页 |
| ·DNA提取 | 第28-29页 |
| ·PCR鉴定 | 第29-30页 |
| ·半定量PCR进行干涉抑制效果分析 | 第30-31页 |
| ·转基因植株的扩繁 | 第31页 |
| ·低温处理 | 第31页 |
| ·电导率的测定 | 第31页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第31-32页 |
| ·H_2O_2及O_2~-的检测和测定 | 第32页 |
| ·脯氨酸含量的测定 | 第32-33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·PtrPRP基因在不同胁迫条件下的表达 | 第33-34页 |
| ·PtrPRP基因的组织表达分析 | 第34页 |
| ·PtrPRP基因的亚细胞定位 | 第34-35页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第35-37页 |
| ·PtrPRP-RNAi转化枳及再生 | 第35-36页 |
| ·PtrPRP-RNAi转化枳的PCR鉴定 | 第36页 |
| ·干涉抑制效果分析 | 第36-37页 |
| ·PtrPRP-RNAI枳抗寒功能的初步验证 | 第37-41页 |
| ·PtrPRP-RNAi转枳的电导率测定 | 第37-38页 |
| ·低温处理后的丙二醛含量测定 | 第38页 |
| ·低温处理的ROS染色 | 第38-39页 |
| ·低温处理后H_2O_2和抗超氧离子含量分析 | 第39页 |
| ·低温处理后的脯氨酸含量测定 | 第39-40页 |
| ·低温处理前后干涉植株的表达分析 | 第40-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-45页 |
| ·不同组织以及不同胁迫胁迫处理下PtrPRP基因的表达模式分析 | 第41-42页 |
| ·PtrPRP基因的亚细胞定位 | 第42-43页 |
| ·PtrPRP基因在枳中的功能分析 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 附录Ⅰ 图版及说明 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |