摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
·脑胶质瘤 | 第13-15页 |
·脑胶质瘤的分类 | 第13页 |
·脑胶质瘤的治疗 | 第13-15页 |
·PKCε研究进展 | 第15-18页 |
·PKC家族的分类 | 第15页 |
·PKCε蛋白的结构 | 第15-16页 |
·PKCε与致癌相关蛋白的关系 | 第16-17页 |
·PKCε与肿瘤 | 第17-18页 |
·Stat3 研究进展 | 第18-21页 |
·Stat3 蛋白的结构 | 第18-19页 |
·Stat3 信号通路调控机制 | 第19-20页 |
·Stat3 在肿瘤中的作用 | 第20-21页 |
·RNA干扰 | 第21-25页 |
·RNAi的分子机制 | 第21-22页 |
·RNAi的特点 | 第22页 |
·RNAi技术的应用 | 第22-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-45页 |
·实验材料 | 第25-27页 |
·实验细胞、动物与样本 | 第25页 |
·实验试剂与耗材 | 第25-27页 |
·仪器 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-44页 |
·组织免疫染色 | 第28-29页 |
·PKCεRNA干扰质粒的构建 | 第29-30页 |
·质粒的提取、纯化与鉴定 | 第30-34页 |
·脑胶质瘤细胞系U251 和U87 的体外培养与转染 | 第34-35页 |
·细胞免疫荧光染色 | 第35页 |
·细胞增殖检测 | 第35-36页 |
·线粒体膜电位检测 | 第36页 |
·Hoechst 33258 细胞染色 | 第36-37页 |
·Annexin V- Cy3 检测 | 第37页 |
·细胞侵袭检测 | 第37页 |
·Western blot | 第37-40页 |
·免疫共沉淀 | 第40页 |
·脑胶质瘤动物模型的构建 | 第40-41页 |
·裸鼠体内移植瘤生长体积与重量的测量 | 第41页 |
·溶液的配制 | 第41-44页 |
·数据分析与统计 | 第44-45页 |
第三章 实验结果 | 第45-66页 |
·PKCε在人正常脑组织和人恶性脑胶质瘤组织中的差异表达 | 第45页 |
·PKCε在脑胶质瘤细胞中的表达与分布 | 第45-46页 |
·PKCε RNA干扰质粒的鉴定 | 第46-47页 |
·共转染RNA干扰质粒及pEGFP-C1 荧光质粒 | 第47-48页 |
·Western blot分析体外PKCεRNA干扰效率 | 第48-49页 |
·下调PKCε的表达能够抑制脑胶质瘤细胞的增殖 | 第49-51页 |
·下调PKCε的表达能够导致脑胶质瘤细胞线粒体膜电位下降 | 第51-52页 |
·下调PKCε的表达能够诱导脑胶质瘤细胞发生凋亡 | 第52-54页 |
·下调PKCε的表达能够降低脑胶质瘤细胞的侵袭能力 | 第54-56页 |
·裸鼠体内移植瘤的形成 | 第56-57页 |
·PKCεRNA干扰质粒对裸鼠体内移植瘤生长的影响 | 第57-59页 |
·人恶性脑胶质瘤组织中內源性PKCε与Stat3 的共定位 | 第59页 |
·脑胶质瘤细胞中內源性PKCε与Stat3 的共定位 | 第59-61页 |
·脑胶质瘤细胞中内源性PKCε与Stat3 的相互作用 | 第61-62页 |
·下调PKCε的表达对Stat3 表达及其磷酸化水平的影响 | 第62-63页 |
·下调PKCε的表达对Stat3 下游靶基因Bcl-xL与Bcl-2 表达的影响 | 第63-66页 |
第四章 讨论 | 第66-70页 |
第五章 结论 | 第70-71页 |
附录 | 第71-77页 |
附图Ⅰ | 第71-75页 |
附图Ⅱ | 第75-76页 |
附图Ⅲ | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-89页 |
作者在攻读博士学位期间公开发表的论文和专利申请 | 第89-91页 |
作者在攻读博士学位期间所参与的项目 | 第91-92页 |
致谢 | 第92-93页 |