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靶向干扰PKCε的表达对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及其分子作用机制的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 绪论第13-25页
   ·脑胶质瘤第13-15页
     ·脑胶质瘤的分类第13页
     ·脑胶质瘤的治疗第13-15页
   ·PKCε研究进展第15-18页
     ·PKC家族的分类第15页
     ·PKCε蛋白的结构第15-16页
     ·PKCε与致癌相关蛋白的关系第16-17页
     ·PKCε与肿瘤第17-18页
   ·Stat3 研究进展第18-21页
     ·Stat3 蛋白的结构第18-19页
     ·Stat3 信号通路调控机制第19-20页
     ·Stat3 在肿瘤中的作用第20-21页
   ·RNA干扰第21-25页
     ·RNAi的分子机制第21-22页
     ·RNAi的特点第22页
     ·RNAi技术的应用第22-25页
第二章 材料与方法第25-45页
   ·实验材料第25-27页
     ·实验细胞、动物与样本第25页
     ·实验试剂与耗材第25-27页
   ·仪器第27-28页
   ·实验方法第28-44页
     ·组织免疫染色第28-29页
     ·PKCεRNA干扰质粒的构建第29-30页
     ·质粒的提取、纯化与鉴定第30-34页
     ·脑胶质瘤细胞系U251 和U87 的体外培养与转染第34-35页
     ·细胞免疫荧光染色第35页
     ·细胞增殖检测第35-36页
     ·线粒体膜电位检测第36页
     ·Hoechst 33258 细胞染色第36-37页
     ·Annexin V- Cy3 检测第37页
     ·细胞侵袭检测第37页
     ·Western blot第37-40页
     ·免疫共沉淀第40页
     ·脑胶质瘤动物模型的构建第40-41页
     ·裸鼠体内移植瘤生长体积与重量的测量第41页
     ·溶液的配制第41-44页
   ·数据分析与统计第44-45页
第三章 实验结果第45-66页
   ·PKCε在人正常脑组织和人恶性脑胶质瘤组织中的差异表达第45页
   ·PKCε在脑胶质瘤细胞中的表达与分布第45-46页
   ·PKCε RNA干扰质粒的鉴定第46-47页
   ·共转染RNA干扰质粒及pEGFP-C1 荧光质粒第47-48页
   ·Western blot分析体外PKCεRNA干扰效率第48-49页
   ·下调PKCε的表达能够抑制脑胶质瘤细胞的增殖第49-51页
   ·下调PKCε的表达能够导致脑胶质瘤细胞线粒体膜电位下降第51-52页
   ·下调PKCε的表达能够诱导脑胶质瘤细胞发生凋亡第52-54页
   ·下调PKCε的表达能够降低脑胶质瘤细胞的侵袭能力第54-56页
   ·裸鼠体内移植瘤的形成第56-57页
   ·PKCεRNA干扰质粒对裸鼠体内移植瘤生长的影响第57-59页
   ·人恶性脑胶质瘤组织中內源性PKCε与Stat3 的共定位第59页
   ·脑胶质瘤细胞中內源性PKCε与Stat3 的共定位第59-61页
   ·脑胶质瘤细胞中内源性PKCε与Stat3 的相互作用第61-62页
   ·下调PKCε的表达对Stat3 表达及其磷酸化水平的影响第62-63页
   ·下调PKCε的表达对Stat3 下游靶基因Bcl-xL与Bcl-2 表达的影响第63-66页
第四章 讨论第66-70页
第五章 结论第70-71页
附录第71-77页
 附图Ⅰ第71-75页
 附图Ⅱ第75-76页
 附图Ⅲ第76-77页
参考文献第77-89页
作者在攻读博士学位期间公开发表的论文和专利申请第89-91页
作者在攻读博士学位期间所参与的项目第91-92页
致谢第92-93页

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