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G蛋白偶联受体激酶2在肝细胞癌侵袭转移中的作用及其可能机制

英文缩略词表第1-9页
摘要第9-13页
ABSTRACT第13-17页
1 前言第17-19页
2 实验材料第19-23页
   ·肝细胞癌(HCC)患者肝脏组织第19页
   ·动物第19页
   ·细胞株第19页
   ·试剂第19-21页
   ·仪器与设备第21-23页
3 实验方法第23-31页
   ·G 蛋白偶联受体激酶(GRK)2 和 GRK3 在 HCC 患者肝脏中的表达第23-26页
     ·免疫组化法检测 HCC 患者肝脏组织石蜡切片中 GRK2 和 GRK3 蛋白的表达第23页
     ·q-PCR 检测 HCC 患者肝脏组织中 GRK2 和 GRK3 mRNA 的表达第23页
     ·Western blot 检测 HCC 患者肝脏组织中 GRK2 和 GRK3 蛋白的表达第23-26页
   ·小鼠肝癌模型的制备以及小鼠肝组织 GRK2 和 GRK3 蛋白的检测第26-27页
     ·DEN 诱导的 C57BL/6J 小鼠肝癌模型的制备和分组第26页
     ·病理学检查第26-27页
     ·Western blot 法检测小鼠肝脏组织 GRK2 和 GRK3 蛋白的表达第27页
     ·免疫组织化学染色法检测 EP2 的表达第27页
   ·GRK2 和 GRK3 在不同转移潜能的人 HCC 细胞株中的表达第27-28页
     ·不同转移潜能的人 HCC 细胞的培养第27-28页
     ·人 HCC 细胞株总蛋白、胞浆蛋白和胞膜蛋白的提取第28页
     ·Western blot 法检测不同转移潜能人 HCC 细胞株中 GRK2、GRK3 和 EP2 的总蛋白和胞浆、胞膜蛋白表达第28页
   ·激光共聚焦显微镜法检测人 HCC 细胞株中 GRK2、EP2 的分布和表达第28-29页
   ·GRK2 siRNA 转染人 SMMC-7721 细胞第29页
     ·实验分组第29页
     ·转染第29页
     ·转染效率的鉴定第29页
   ·划痕法检测人 HCC 细胞移行能力的变化第29-30页
   ·Transwell 法检测人 HCC 细胞侵袭能力的变化第30页
   ·Western blot 法检测 ERK1/2、p-ERK1/2、Akt 和 p-Akt 的表达第30页
   ·统计学处理第30-31页
4 结果第31-43页
   ·GRK2 和 GRK3 在 HCC 患者肝脏组织中的表达第31-33页
     ·不同分化程度 HCC 患者肝癌组织中 GRK2 和 GRK3 的表达和分布第31-32页
     ·HCC 患者肝脏组织中 GRK2,GRK3 mRNA 和蛋白的表达第32-33页
   ·DEN 诱导的肝癌模型小鼠肝脏整体和病理变化第33-35页
   ·DEN 诱导的肝癌小鼠肝脏组织中 GRK2、GRK3 和 EP2 的表达变化第35-37页
   ·GRK2 和 GRK3 在不同转移潜能的人 HCC 细胞株中表达差异第37-38页
   ·选择性 EP2 受体激动剂(Butaprost)刺激对 HCC 细胞 GRK2 和 EP2 胞浆、胞膜分布的影响第38-40页
   ·转染针对 GRK2 siRNA 对 SMMC-7721 细胞 GRK2 表达的影响第40-41页
   ·转染 siRNA GRK2 后对 SMMC-7721 细胞迁移和侵袭能力的影响第41-42页
   ·转染针对 GRK2 siRNA 对人 SMMC-7721 细胞 ERK1/2、Akt 通路激活的影响36第42-43页
5 讨论第43-48页
   ·GRK2 在抑制 HCC 侵袭和转移中可能发挥重要作用第43-45页
   ·GRK2 可能通过下调 EP2 受体信号通路来抑制 HCC 的侵袭和转移第45-48页
6 结论第48-49页
参考文献第49-57页
附录第57-59页
致谢第59-62页
综述:G 蛋白偶联受体激酶活性调控及其在恶性肿瘤中的作用第62-77页
 参考文献第72-77页

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